基于免疫學(xué)原理及現(xiàn)有技術(shù)制定免疫治療方案

1、基于腫瘤免疫原理及現(xiàn)有技術(shù)設(shè)計臨床細(xì)胞免疫治療方案中國人民解放軍總醫(yī)院腫瘤中心實(shí)驗(yàn)室王 歈,,2013年12月20日，SCIENCE雜志“腫瘤免疫療法”：全球十大科技突破之首,2,Ipilimumab（α-CTLA-4）和Nivolumab （α-PD1）: 患者體內(nèi)抗腫瘤T細(xì)胞被非特異性激活,CAR-T：CTL019：賦予患者體內(nèi)T細(xì)胞以特異性腫瘤抗原識別能力,39名罕見并致命的急性淋巴細(xì)胞白血病兒童，有36名兒童（

2、92%）在輸注該藥物后經(jīng)歷了完全緩解。6個月后，70%的響應(yīng)者仍處于緩解中，75%的兒童仍存活。CTL019在5名濾泡性淋巴瘤患者中達(dá)到了100%的緩解率和80%的完全緩解率，使5/11名彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者腫瘤縮小，到第三個月時，36%的人未顯示有疾病跡象。24名慢性淋巴細(xì)胞白血病2期，達(dá)到42%的緩解率，一半的受試者出現(xiàn)完全緩解。在9個月的隨訪中，有68%的總生存率。主要副作用：在每一項(xiàng)研究中，一些或全部的患者經(jīng)歷了細(xì)胞因子

3、釋放綜合征(CRS)，這是人體對細(xì)胞治療藥物的一種響應(yīng)，這種響應(yīng)可導(dǎo)致類似流感的癥狀，甚至?xí)?dǎo)致一些病例死亡。諾華報道了三例與CTL019相關(guān)的CRS相關(guān)死亡，指出每個死亡病例的感染都是獨(dú)立的，該綜合征嚴(yán)重程度往往與疾病負(fù)擔(dān)相對應(yīng)。,,Cancer Antigens vs Cytotoxic T Cells,特異性免疫治療,,腫瘤抗原的類型,TIL治療惡黑PR和混合型反應(yīng)>50% Science. 2002 ),,TCR基因轉(zhuǎn)染T

4、細(xì)胞治療惡黑（Science，2006）,,CAR-T19治療CLL（14例，2015）,,療效持續(xù)監(jiān)測：CAR-T19治療CLL（14例，2015）,,精準(zhǔn)免疫細(xì)胞治療治愈一例膽管細(xì)胞癌（Science，2014）,A “blueprint” for the treatment of patients with T cells recognizing tumor-specific mutations.,Steven A. Rosenb

5、erg, and Nicholas P. Restifo Science 2015;348:62-68,Published by AAAS,體外活化、擴(kuò)增腫瘤記憶性T淋巴細(xì)胞,,,,抗原活化的樹突狀細(xì)胞（AADC）,AADC作用機(jī)制,體外腫瘤抗原活化大量抗原提呈細(xì)胞（APC）APC體內(nèi)活化腫瘤抗原特異性記憶性T細(xì)胞記憶細(xì)胞大量增殖成為效應(yīng)細(xì)胞效應(yīng)細(xì)胞進(jìn)入外周組織殺傷腫瘤通過不斷重復(fù)此過程，控制殘存腫瘤細(xì)胞復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,,APC體外活

6、化,Sipuleucel-T（Provenge，2010年獲FDA批準(zhǔn)上市）顯著延長晚期去勢治療失敗的前列腺癌患者的OS,Kantoff PW et al. N Engl J Med. 2010;363(5):411-22,Sipuleucel-T治療轉(zhuǎn)移性前列腺癌，疾病進(jìn)展時間不延長，但OS顯著提高4.1個月。,AADC可延長手術(shù)后黑色素瘤患者無進(jìn)展生存期和生存率,AADC可延長晚期黑色素瘤患者的總生存期,LDC, 74歲,女,胃癌

7、術(shù)后復(fù)發(fā)后5年余(頸部、縱膈及腹膜后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腹水中等量）Her-2 +,手術(shù),2010.6.22,1－2周期化療,2010年7-8月,2011年6-8月,多發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,2011年9-10月,6－12周期S1+Lapatinib,2012年1-2月,SD,2012年3月,2013年6-11月,Lapatinib,3－5周期化療＋Lapatinib,PD,PD,SD,PR,2014年 1月,EAAL,2011年6-8月,2011年

8、9-11月,EAAL,2012年1-2月,EAAL,2013年5、11月,AADC-1、2,2014年1、5、8月,AADC-3、4、5,2015年1月,AADC-6,2015年1月,2015年5、6月,AADC-7、8,cCR,cCR,2015年10月,?? CTLA4單抗/PD-1單抗 ??,?,WDQ, 41歲, 男, 惡性黑色素瘤(右手中節(jié)）,AADC適應(yīng)癥,腫瘤抗原明確、免疫原性明確的腫瘤疾病進(jìn)展較為緩慢ECOG PS 0

9、～1,非特異性免疫治療,,腫瘤微環(huán)境：反應(yīng)性腫瘤間質(zhì)Tumor Microenvironment: Reactive Stroma,Ipilimumab（α-CTLA-4）和Nivolumab （α-PD1）: 患者體內(nèi)抗腫瘤T細(xì)胞被非特異性激活,Immune Monitoring of αCTLA-4 and αPD-1 Antibodies,血液淋巴細(xì)胞計數(shù)在治療過程中的變化CD4+ICOS+腫瘤抗原特異性抗體腫瘤特異性T

10、細(xì)胞TregMDSCPD-L1/PD-1表達(dá)突變抗原錯配修復(fù)基因,Signatures of mutational processes in human cancer,體外活化、擴(kuò)增腫瘤記憶性T淋巴細(xì)胞,,,,,,外周血20-100ml,擴(kuò)增及活化,回輸100ml/次，1-8次,培養(yǎng)及擴(kuò)增14-35天,收集誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞,,,,,,擴(kuò)增活化的淋巴細(xì)胞（EAL）,EAL作用機(jī)制,體外活化擴(kuò)增記憶性T細(xì)胞，獲得含有大量腫瘤

11、抗原特異性效應(yīng)細(xì)胞的混合T細(xì)胞T細(xì)胞進(jìn)入體內(nèi)殺傷腫瘤細(xì)胞,,記憶性T細(xì)胞體外活化擴(kuò)增,EAAL細(xì)胞培養(yǎng)后腫瘤特異性T細(xì)胞比例顯著增加,外周血T細(xì)胞體外培養(yǎng)前后的腫瘤抗原特異性分析,兩項(xiàng)隨機(jī)對照臨床試驗(yàn),,,,,,,生存曲線分析,,EAL臨床效果,回顧病理明確及隨訪資料完整、接受過至少六次EAAL過繼性細(xì)胞免疫治療的54例NSCLC、16例SCLC、42例胃癌、38例結(jié)直腸癌及24例胰腺癌患者作為治療組研究對象，按1:1的比例選取與治療

12、組患者同期入院的上述5種惡性腫瘤患者作為對照組研究對象，隨訪所有患者，Kaplan-Meier法分析治療組及對照組OS的差異，COX回歸法多因素分析對OS產(chǎn)生影響的因素，并分層分析不同亞組患者接受EAAL細(xì)胞治療后OS獲益情況。,,不同類型惡性腫瘤總生存期結(jié)果,NSCLC,SCLC,PCGC,CRC,40,胰腺癌肝轉(zhuǎn)移病例報告,,EAL清除急性髓性淋巴細(xì)胞白血病（AML）微小殘留的作用,2010年1月至2013年6月北京大學(xué)人民醫(yī)院兒

13、科收治的初治AML（除M3外）患兒65例，均為化療后白血病基因殘存患兒。對照組：24例；EAL治療組：41例男孩28例（43%），女孩37例（57%）診斷時年齡1-16歲，中位年齡9歲。按照FAB分型，M2型49例（75.4%），M4型12例（18.5%），M5型4例（6.1%）。中位隨訪時間為25個月（5-50個月）。65例患兒中有5例失訪，失訪率7.6%。對患兒的遺傳學(xué)特點(diǎn)的檢測分為2方面：白血病融合基

14、因的檢測，應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR）定量檢測突變基因方法對診斷時的骨髓標(biāo)本進(jìn)行白血病基因檢測，主要檢測的靶基因有：AML1-ETO、CBFβ-MYH11、CEBPA、NPM1、WT1、c-kit、FLT3；2）、染色體檢測，采用24小時培養(yǎng)G顯帶描述核型。,,,,,,,,,謝飛，男，14歲首次住院：2011.5.24入院

15、血象：WBC142.76×109/L骨髓形態(tài)：AML-M2染色體：46，XY，inv(16)基因：CBF-MYH（+) 83.2% c-kit點(diǎn)突變陽性。治療經(jīng)過：ADE雙誘導(dǎo)后，予大劑量阿糖胞苷與HA交替治療，8個月時CBF-MYH（+）0.13%，加用EAAL2療程， CBF-MYH轉(zhuǎn)為0%，但停用4個月后CBF-MYH（+）0.024%，繼續(xù)EAAL2療程CBF-MYH0%，再鞏固EAA

16、L1療程，現(xiàn)CBF-MYH持續(xù)0%1年余。,宋宇卉，女，11歲首次住院：2012.7.17發(fā)病時WBC 73×109/L染色體：46，XX，del(7)(q32),t(8,21）基因：AML-ETO（+），c-kit（-）治療經(jīng)過：化療8個月后AML-ETO（+）為0.05%，加用EAAL治療，2療程后融合基因轉(zhuǎn)為0%，現(xiàn)繼續(xù)治療中。,王穎，女，5歲發(fā)病日期：2013.1發(fā)病時WBC53.7×109/L

17、骨髓形態(tài)：AML-M4EO染色體：47,XX,+8,inv(16)基因： CBF-MYH（+） c-kit點(diǎn)突變（-）治療經(jīng)過：院外2療程后CR，建議予HSCT來我院。入院CBF-MYH（+）0.22%，加用大劑量阿糖胞苷化療3個月，基因仍（+），遂行化療加EAAL治療，2療程后融合基因?yàn)?%，現(xiàn)仍繼續(xù)治療中。,,EAL細(xì)胞聯(lián)合化療治療兒童AML療效優(yōu)于單純化療，可明顯延長MRD陰性持續(xù)時間及無事

18、件生存時間,EAL適應(yīng)癥,腫瘤抗原不明確根治性治療后預(yù)防復(fù)發(fā)與化療聯(lián)合產(chǎn)生協(xié)同作用與化療聯(lián)合有效降低化療副作用ECOG PS 0～2,常規(guī)治療基礎(chǔ)上的非小細(xì)胞癌免疫細(xì)胞治療方案,常規(guī)治療基礎(chǔ)上的小細(xì)胞癌免疫細(xì)胞治療方案,常規(guī)治療基礎(chǔ)上的卵巢癌免疫細(xì)胞治療方案,常規(guī)治療基礎(chǔ)上的復(fù)發(fā)難治卵巢癌免疫細(xì)胞治療方案,常規(guī)治療基礎(chǔ)上的宮頸癌免疫細(xì)胞治療方案,常規(guī)治療基礎(chǔ)上的子宮內(nèi)膜癌免疫細(xì)胞治療方案,腫瘤免疫治療療效,目前臨床療效: