黑柄炭角菌的人工栽培技術(shù)及部分活性成分的研究.pdf

1、本文以產(chǎn)于湖南望城縣的黑柄炭角菌（Xylariannigripes）為實驗材料，利用菌種分離、人工栽培、液體發(fā)酵、PCR、柱層析、紫外光譜、高效液相色譜技術(shù)和化學(xué)反應(yīng)等手段，對黑柄炭角菌的人工栽培技術(shù)、ITS序列、不同組織（栽培子座、野生子座及菌核、發(fā)酵菌絲）的部分生物活性成分進(jìn)行了比較研究，主要內(nèi)容包括：黑柄炭角菌菌種的分離及其ITS序列測定，人工栽培培養(yǎng)基的選擇，最佳培養(yǎng)環(huán)境條件的確定，黑柄炭角菌發(fā)酵菌絲、栽培子座、野生子座及野生菌

2、核等不同組織的粗多糖、甘露醇、核苷及氨基酸的含量分析比較，實驗結(jié)果如下： 1.成功分離了黑柄炭角菌純菌種，并運(yùn)用PCR擴(kuò)增技術(shù)測定了不同采集地的黑柄炭角菌的ITS序列，并與Genbank中序列比對，通過比對證明本文分離得到的菌種為黑柄炭角菌，人工栽培子座亦為黑柄炭角菌。 2.篩選出了黑柄炭角菌人工栽培最適培養(yǎng)基和最佳培養(yǎng)條件，結(jié)果表明，培養(yǎng)基以木屑培養(yǎng)基為最佳培養(yǎng)基。最佳培養(yǎng)條件：黑柄炭角菌25℃生化培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)，菌絲

3、滿瓶快、菌絲生長密度和潔白度高；轉(zhuǎn)到室內(nèi)培養(yǎng)，在溫度25℃，濕度85％，自然光照的條件下子座形成早、數(shù)量多、質(zhì)量好。 3.經(jīng)熱水浸提、醇析、脫蛋白，得粗多糖每克菌粉含量分別為發(fā)酵菌絲1.76mg、栽培子座1.66mg、野生子座1.45mg，野生菌核1.65mg，總糖含量分別為發(fā)酵菌粉20.60％、栽培子座25.85％、野生子座20.15％、野生菌核23.65％。 4.黑柄炭角菌含有豐富的甘露醇，其發(fā)酵菌絲、栽培子座、野生

4、子座及野生菌核每克干粉中甘露醇的含量依次分別為75.0mg、65.0mg、36.5mg、41.3mg。 5.高效液相色譜技術(shù)分析表明，黑柄炭角菌的發(fā)酵菌絲、栽培子座、野生子座及野生菌核中主要含有兩種核苷：尿苷和腺苷，且各部位中尿苷含量依次分別為1120.15μg/g干重、2078.46μg/g干重、2305.01μg/g干重、340.43μg/g干重；腺苷含量依次分別為1156.19μg/g干重、1886.19μg/g干重、24

5、23.45μg/g干重、909.72μg/g干重。另外還有兩種其它核苷的含量相對較高，有待進(jìn)一步研究。 6.以黑柄炭角菌不同組織（野生子座、野生菌核、栽培子座及發(fā)酵菌絲）為材料，采用氨基酸自動分析儀進(jìn)行了水解氨基酸和游離氨基酸的組成和含量測定。結(jié)果表明黑柄炭角菌不同組織均含有17種水解氨基酸，總量為121.521～271.594（mg/g），其中必需氨基酸7種，必需氨基酸占氨基酸總量（E/T）39.87～57.60％。同時測得游