擬南芥非寄主抗性機(jī)理的研究.pdf

1、非寄主抗性(Non-host resistance)是植物在物種水平上表現(xiàn)出的抗性，也是植物抵御病原菌侵染的第一道防線。它具有廣譜、抗性強(qiáng)烈和持久的特點(diǎn)，使植物免受大多數(shù)病原菌的危害，其分子機(jī)理的揭示將為植物病害的防治提供新的策略。AtPEN1是非寄主抗性的重要組成部分，其功能的喪失會(huì)直接導(dǎo)致擬南芥對(duì)大麥白粉病菌(Blumeria graminisf.sp hordei，Bgh)的穿透抗性降低。AtPEN1編碼AtSYP121，定位在質(zhì)

2、膜上，屬于N-乙基馬來酰亞胺敏感因子連接物復(fù)合體(Soluble N-ethyl-maleimide-sensitlve fusion protein attachment protein receptor,SNARE)家族的成員。現(xiàn)已證明，AtPEN1介導(dǎo)的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)參與了病原菌侵染位點(diǎn)處乳突的形成過程，AtPEN1還是多條信號(hào)傳導(dǎo)途徑的負(fù)調(diào)節(jié)子。但是AtPEN1參與乳突形成和信號(hào)傳導(dǎo)的機(jī)制還不清楚。 由NO介導(dǎo)的亞硝基化(S-

3、nitrosylation,SNO)是植物免疫系統(tǒng)中一種重要的翻譯后修飾作用，這種修飾作用具有快速、可逆并且高度特異的特性，它通過對(duì)蛋白活性、穩(wěn)定性及定位的調(diào)節(jié)，介導(dǎo)抗病過程中信號(hào)的傳遞。由于NO的產(chǎn)生是植物受病原菌侵染后最早做出的反應(yīng)之一。本研究猜測(cè)，Atpenl-1功能的喪失可能會(huì)影響細(xì)胞內(nèi)蛋白亞硝基化水平。 本實(shí)驗(yàn)利用Saville-Griess法對(duì)野生型和Atpenl-1中的SNO水平進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)突變體中SNO水平有了

4、明顯的降低，說明AtPEN1功能的缺失造成了植物胞內(nèi)蛋白質(zhì)亞硝基化修飾的變化。S-亞硝基谷胱甘肽還原酶(S-nitrosoglutathione reducase，GSNOR)轉(zhuǎn)錄水平及酶活檢測(cè)顯示，突變體中GSNOR的轉(zhuǎn)錄水平和酶活性都沒有發(fā)生改變，所以推測(cè)Atpenl-1中SNO水平的變化可能是由其它未知的調(diào)節(jié)途徑的變化引起的。本研究用Biotin-Switch與LC/MS/MS相結(jié)合的方法，分離鑒定出兩個(gè)亞硝基化修飾發(fā)生改變的蛋白