色氨酸對仔豬類胰島素生長因子系統(tǒng)基因表達的調(diào)控.pdf

1、通過體內(nèi)和體外5個試驗研究日糧色氨酸對仔豬類胰島素生長因子系統(tǒng)基因表達的調(diào)控.飼料試驗1,選用54頭28日齡斷奶,平均體重8.82±0.29kg的三元雜交(長白×大白×北京黑)仔豬.隨機采食下列3種日糧:(1)低色氨酸高賴氨酸日糧(總Trp:總Lys=0.12:1.16);(2)高色氨酸高賴氨酸日糧(總Trp:總Lys=0.25:1.15);(3)高色氨酸低賴氨酸日糧(總Trp:總Lys=0.26:0.52).飼養(yǎng)試驗2,選用54頭28

2、日齡斷奶,平均體重9.98±0.31kg的三元雜交(長白×大白×皮特蘭)仔豬.其日糧處理為:(1)低色氨酸日糧(總Trp:總Lys=0.11:1.14);(2)對照日糧(總Trp:總Lys=0.19:1.13);(3)高色氨酸日糧(總Trp:總Lys=0.24:1.14).試驗1和試驗2均按體重和性別隨機分為3個處理,每個處理6個重復,每個重復3頭仔豬.試驗1第7和14d,每欄選1頭仔豬;試驗2第7、14、21和28d,每欄選1~2頭仔

3、豬采血以檢測血清生長因子、激素及尿素氮水平.試驗2第21d,每欄選擇1~2頭仔豬,屠宰,取垂體、肝臟、背最長肌與十二指腸,提取總RNA.利用RT-PCR,合成GH、IGF-1、GHR、IGF-I受體與IGFBP-3基因的cDNA探針,同位素標記.用斑點雜交和/或Northern雜交檢測不同組織中這5種基因的mRNA水平.結(jié)果表明,飼養(yǎng)試驗1中,與其它兩個處理相比,飼喂高色氨酸高賴氨酸日糧的仔豬日增重提高,飼料轉(zhuǎn)化效率得到改善,血清IGF

4、-I濃度提高,血清尿素氮水平降低(P≤0.01).飼養(yǎng)試驗2中,隨著日糧色氨酸水平的升高,仔豬生產(chǎn)性能提高,血清中IGF-I濃度提高(P<0.01);與對照組和高色氨酸組相比,低色氨酸組GH水平和IGFBP-3濃度降低,但血清尿素氮濃度升高(P≤0.05);仔豬平均日增重與血清IGF-I濃度之間存在著顯著的正相關(guān)(r=0.951,P<0.01);垂體GH,肝臟、背最長肌與十二指腸IGF-I,肝臟與十二指腸GHR,肝臟IGF-I受體mRN

5、A豐度隨日糧色氨酸水平升高而增加(P<0.01);背最長肌與十二指腸IGF-I受體和肝臟IGFBP-3 mRNA豐度隨日糧色氨酸水平升高而降低(P<0.01);色氨酸對背最長肌GHR mRNA的表達具有雙重調(diào)節(jié)作用.在體外,分別用含0,4,16,48mg/L色氨酸濃度的無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)豬原代肝細胞,0(用含血清的DMEM培養(yǎng)24h后),8,16,24h每處理取1mL培養(yǎng)液,用RIA法測定溶液中的IGF-I濃度;培養(yǎng)24h后收集細胞,提取

6、總RNA,斑點雜交檢測IGF-I、GHR、IGF-I受體與IGFBP-3 mRNA豐度.在開始時和培養(yǎng)8h,各處理組的IGF-I濃度無顯著差異;在16h,0與4mg/L處理組IGF-I水平顯著低于16與48mg/L組(P<0.01);在24h,IGF-I水平隨色氨酸濃度增加而增加(P<0.01).隨培養(yǎng)液中色氨酸濃度的增加,IGF-I、GHR、IGF-I受體mRNA豐度增加,而IGFBP-3 mRNA豐度則降低.日糧低水平色氨酸降低了仔

7、豬循環(huán)中IGF-I和GH濃度,抑制了內(nèi)分泌生長軸的促生長功能,進而影響了仔豬生長.色氨酸主要通過調(diào)控類胰島素生長因子系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄水平的表達影響肝臟IGF-I的分泌與釋放,調(diào)節(jié)仔豬生長;在垂體,低色氨酸降低了垂體GH mRNA水平;在靶組織,降低了肝臟與肝外組織GHR和IGF-I轉(zhuǎn)錄水平表達;提高了肝臟IGF-I受體mRNA水平并降低了肝臟IGFBP-3 mRNA水平;低的血清IGFBP-3濃度說明增加的IGF-I 清除率也可能與這一調(diào)節(jié)作用