鵝脂肪代謝基因多態(tài)性與屠宰性狀的相關(guān)分析及其組織表達(dá)差異研究.pdf

1、脂滴包被蛋白(PLIN)和脂肪分化相關(guān)蛋白(ADFP)定位于脂滴表面,是脂滴相關(guān)蛋白家族(PAT)中的成員。它們不僅參與脂質(zhì)代謝,而且在動脈粥樣硬化、2-型糖尿病等疾病的發(fā)展中也起作用。PPARγ是過氧化物酶體增殖物激活受體家族(PPARs)的成員之一,在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控多種參與脂肪酸轉(zhuǎn)運和代謝的基因,有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。
　　 本試驗以鵝肝臟和脂肪組織為試驗材料,通過RT-PCR擴增獲得了鵝PLIN基因的全編碼區(qū)序列(1589bp

2、)(GenBank accession numbers:GU938447),編碼527個氨基酸,克隆獲得鵝ADFP基因的部分序列(1304bp)。通過多種生物信息學(xué)方法分析,鵝PLIN基因序列與雞PLIN基因的序列一致性達(dá)到85％,鵝ADFP基因序列與雞、鴨ADFP序列一致性分別達(dá)到93％和96％。對其保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測,確定兩條氨基酸序列具有PAT家族的結(jié)構(gòu)特征,證實本試驗克隆獲得的ADFP和PLIN序列為鵝PAT家族成員ADFP和PLI

3、N基因。
　　 本試驗以浙東白鵝和朗德鵝為材料,采用SYBR greenⅡ定量PCR分析ADFP、PLIN和PPARγ基因在鵝9個生長點,兩個品種不同組織間表達(dá)差異。試驗結(jié)果表明,ADFP基因在鵝的各組織廣泛表達(dá),PLIN和PPARγ基因在鵝脂肪組織高表達(dá)。并且ADFP、PLIN和PPARγ基因在鵝不同生長階段各有優(yōu)勢表達(dá)組織,同一組織中也有表達(dá)的優(yōu)勢時間點,基因在浙東白鵝和朗德鵝品種間表達(dá)差異顯著。脂肪組織中,ADFP表達(dá)量隨

4、機體的生長發(fā)育呈先升后降的趨勢,而PLIN表達(dá)量隨機體的生長發(fā)育呈先降后升的趨勢,28日齡為兩個基因表達(dá)值變化的轉(zhuǎn)折點。相對而言,PPARγ基因在脂肪組織表達(dá)量低于ADFP和PLIN。由此推測,隨著脂肪細(xì)胞的發(fā)育成熟,ADFP和PLIN基因?qū)Z脂肪組織的代謝發(fā)揮主要調(diào)控作用。
　　 本試驗以浙東白鵝為材料,采用PCR-SSCP方法,掃描ADFP和PPARγ基因外顯了區(qū)域的多態(tài)位點。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在ADFP基因的編碼區(qū)存在9個突變位點

5、中,等位基因G、G、G、C、T、G、C、T、C依次為SNP1、SNP2、SNP3、SNP4、SNP5、SNP6、SNP7、SNP8和SNP9的優(yōu)勢等位摹因。ADFP基因突變位點在群體的屠宰性狀關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示:SNP2對浙東白鵝胸肌重、胸肌率的遺傳效應(yīng)達(dá)到極顯著水平,對腿肌率的遺傳效應(yīng)達(dá)到顯著水平;SNP3對浙東白鵝胸肌率的遺傳效應(yīng)達(dá)到極顯著水平,對胸肌重和腿肌重的遺傳效應(yīng)達(dá)到顯著水平。在PPARγ基因外顯予區(qū)域發(fā)現(xiàn)一個SNP(A/G)