長(zhǎng)、短光周期敏感雄性不育水稻幼穗育性相關(guān)蛋白差異分析.pdf

1、本研究在相同溫度條件下在水稻幼穗分化第二次枝梗原基分化期至花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂期對(duì)長(zhǎng)光周期敏感核不育水稻N5088S、NW04S，短光周期敏感核不育水稻D52S分別進(jìn)行長(zhǎng)光照(14.5h)和短光照(10h)處理，在獲得明確的雄性育性差異基礎(chǔ)上，將不育和可育條件下的水稻幼穗蛋白采用雙向電泳技術(shù)進(jìn)行了分離，找出差異蛋白并進(jìn)行了質(zhì)譜鑒定及蛋白功能預(yù)測(cè)，比較了兩類(lèi)光周期誘導(dǎo)效應(yīng)完全相反的光敏感雄性不育水稻育性相關(guān)蛋白的差異。主要結(jié)果如下：

2、　　 1.育性光周期誘導(dǎo)處理獲得較理想的雄性育性差異結(jié)果：相同溫度下，D52S在短光照(SD,10h)下花粉表現(xiàn)為完全不育，不育度為100％，在長(zhǎng)光照(LD，14.5h)下花粉可育率達(dá)54.3％。N5088S、NW04S在短光照(SD,10h)處理下花粉都表現(xiàn)高度可育，可育度分別為81.0％、74.8％，而在長(zhǎng)光照(LD，14.5h)處理下均為100％敗育。
　　 2.分別對(duì)D52S、NW04S、N5088S在不育和可育條件下

3、幼穗分化到花粉母細(xì)胞形成至減數(shù)分裂期的幼穗蛋白進(jìn)行了雙向電泳分離，獲得了分辨率和重復(fù)性較好的雙向電泳圖譜。分析檢測(cè)差異蛋白，選擇了其中的28個(gè)蛋白點(diǎn)進(jìn)行了質(zhì)譜鑒定，成功鑒定出其中的14個(gè)蛋白點(diǎn)并進(jìn)行了功能預(yù)測(cè)。D52S鑒定成功的差異蛋白中，在可育條件下特異表達(dá)的蛋白有逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子蛋白，在不育條件下特異表達(dá)的蛋白有腺苷激酶，不育水稻中表達(dá)量上升的蛋白有蔗糖合酶和真核生物翻譯起始因子3(EIF3)蛋白；對(duì)于未成功鑒定的蛋白對(duì)其做同源性分析，

4、推測(cè)在不育水稻中表達(dá)量上升的蛋白有ATP合酶，乙醇脫氫酶及鈣依賴(lài)型蛋白激酶。在可育條件下表達(dá)量上升的蛋白有GTP結(jié)合蛋白及光敏色素類(lèi)ATP酶。
　　 水稻品種NW04S鑒定成功的差異蛋白中，不育條件下特異表達(dá)的蛋白有核苷三磷酸水解酶，氨酰tRNA合成酶，不育條件下表達(dá)量上調(diào)的蛋白有核苷轉(zhuǎn)移酶，真核生物翻譯起始因子3；對(duì)于未成功鑒定的蛋白對(duì)其做同源性分析，推測(cè)在不育水稻中表達(dá)量上升的蛋白有鈣結(jié)合蛋白，催化結(jié)構(gòu)域蛋白激酶，絲氨酸/蘇

5、氨酸蛋白激酶，逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子蛋白和糖基水解酶。可育條件下表達(dá)量上升的蛋白有組氨酸似ATP酶。
　　 水稻品種N5088S鑒定成功的差異蛋白中，可育條件下特異表達(dá)的蛋白有天冬氨酸蛋白酶，甲硫氨酰tRNA合成酶，可育條件下表達(dá)量上調(diào)的蛋白有短鏈脫氫酶SDR，對(duì)于未成功鑒定的蛋白對(duì)其做同源性分析，推測(cè)在可育水稻中表達(dá)量上升的蛋白有染色體分離ATP酶，鋅指，磷酸果糖激酶，TBP作用蛋白。不育條件下表達(dá)量上調(diào)的蛋白有核苷三磷酸水解酶。