轉(zhuǎn)雙元基因單倍體小黑楊的抗蟲(chóng)性研究.pdf

1、為探索轉(zhuǎn)Bt+蜘蛛殺蟲(chóng)肽基因單倍體小黑楊(PopulussimoniiCarr.×P.nigraL.)的抗蟲(chóng)性，本研究以?xún)蓚€(gè)轉(zhuǎn)基因無(wú)性系TT1、TT3植株為測(cè)試對(duì)象，以未轉(zhuǎn)基因的單倍體小黑楊植株為對(duì)照，采用葉片離體飼養(yǎng)和樹(shù)上套籠飼養(yǎng)法測(cè)定了轉(zhuǎn)基因株系對(duì)舞毒蛾Lymantriadispar(Linnaeus)、天幕毛蟲(chóng)MalacosomaneustriatestaceaMotschulsky、楊扇舟蛾Closteraanachoreta(

2、Fabricius)的抗性，并采用石蠟切片技術(shù)分析了轉(zhuǎn)基因株系所表達(dá)殺蟲(chóng)蛋白對(duì)楊扇舟蛾幼蟲(chóng)中腸結(jié)構(gòu)的影響，以期為轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因株系的擴(kuò)繁和商品化生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。 本論文的研究結(jié)果如下：(1)轉(zhuǎn)基因植株有增加幼蟲(chóng)死亡率的作用。從校正死亡率上看，對(duì)舞毒蛾，TT1作用強(qiáng)于TT3，第20～24d作用明顯；對(duì)天幕毛蟲(chóng)，TT3作用強(qiáng)于TT1，第12～18d作用明顯；對(duì)楊扇舟蛾，TT3作用也強(qiáng)于TT1，第1～15d作用明顯。 (2)轉(zhuǎn)基

3、因植株能抑制幼蟲(chóng)蛻皮并表現(xiàn)一定的毒力。對(duì)于舞毒蛾，在第18d之前TT3的毒力大于TT1，第24d時(shí)TT1毒力大于TT3；對(duì)于天幕毛蟲(chóng)和楊扇舟蛾，TT3的毒力均大于TT1；TT1和TT3對(duì)三種幼蟲(chóng)的毒力隨時(shí)間有較大起伏，無(wú)明顯規(guī)律性。 (3)轉(zhuǎn)基因植株能延緩幼蟲(chóng)發(fā)育，從總的發(fā)育歷期看，TT3的延緩作用大于TT1。對(duì)于舞毒蛾的各齡幼蟲(chóng)，TT1與TT3的延緩作用隨齡級(jí)變化而波動(dòng)，對(duì)天幕毛蟲(chóng)、楊扇舟蛾的各齡幼蟲(chóng)，TT3的延緩作用大于TT

4、1。 (4)轉(zhuǎn)基因植株能抑制幼蟲(chóng)體重增長(zhǎng)，從總體上講，隨時(shí)間延長(zhǎng)其作用更明顯。在平均體重上，對(duì)舞毒蛾的影響TT1和TT3差別不大，對(duì)天幕毛蟲(chóng)，TT3的抑制程度明顯大于TT1；在體重增加量和增加速率上，TT1和TT3對(duì)舞毒蛾、天幕毛蟲(chóng)的抑制均前期TT3效果好，后期TT1效果好。 (5)轉(zhuǎn)基因植株能降低幼蟲(chóng)取食量和排糞量，TT3的作用大于TT1。 (6)轉(zhuǎn)基因植株具有一定的影響幼蟲(chóng)取食行為的作用，并使死亡幼蟲(chóng)表現(xiàn)一定

5、的癥狀。取食轉(zhuǎn)基因植株的天幕毛蟲(chóng)和楊扇舟蛾幼蟲(chóng)死亡后多體色發(fā)暗，蟲(chóng)體直而腫脹。 (7)轉(zhuǎn)基因植株具有降低蛹重、致蛹畸形的作用。取食轉(zhuǎn)基因植株的幼蟲(chóng)所化的蛹明顯小于對(duì)照的蛹，蛹的均重明顯低于對(duì)照蛹，取食TT3的幼蟲(chóng)還出現(xiàn)了畸形蛹。 (8)轉(zhuǎn)基因植株具有破壞幼蟲(chóng)中腸的作用。隨時(shí)間的延長(zhǎng)，取食同一轉(zhuǎn)基因無(wú)性系植株的幼蟲(chóng)中腸細(xì)胞排列的緊密程度、細(xì)胞形狀的規(guī)則性下降，細(xì)胞逐漸變形、解體，幼蟲(chóng)腸腔內(nèi)容物含量減少，整個(gè)中腸最后甚至完全