外源開花素基因FT對安祖花遺傳轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、在花卉的基因工程育種中，花期調(diào)控是重要的一個(gè)研究方向。
　　 本研究的主要目標(biāo)是利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)化方法，采用熱激誘導(dǎo)的組成型表達(dá)載體，將大豆熱激蛋白啟動子連接擬南芥或楊樹的FT基因?qū)Π沧婊ㄟM(jìn)行轉(zhuǎn)化，獲得轉(zhuǎn)化植株，待轉(zhuǎn)化植株生長到一定階段后誘導(dǎo)FT基因的表達(dá)，從而對外源FT基因?qū)Π沧婊ㄩ_花的影響進(jìn)行研究，并探索利用FT基因控制花卉開花時(shí)間的方法。
　　 主要研究結(jié)果：建立了根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的安祖花遺傳轉(zhuǎn)化體系。以安祖花

2、葉柄為轉(zhuǎn)化受體，在OD600=0.6的菌液中浸染15min，再在黑暗條件下于含100μmol/L乙酰丁香酮的共培養(yǎng)基中培養(yǎng)3d可獲得最佳的T-DNA轉(zhuǎn)化效率。利用此優(yōu)化的轉(zhuǎn)化系統(tǒng)進(jìn)行農(nóng)桿菌的浸染，并在含卡那霉素100mg/L和頭孢霉素300mg/L的篩選培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，得到抗性愈傷組織，待其增殖到一定大小，分化成苗，再進(jìn)行生根壯苗培養(yǎng)，最后對這些抗性苗進(jìn)行PCR及GFP熒光檢測。本實(shí)驗(yàn)分別獲得了pJCGLOX-AtFT轉(zhuǎn)化植株8個(gè)細(xì)胞