大連地區(qū)海帶養(yǎng)殖群體與野生群體遺傳多樣性的AFLP分析.pdf

1、海帶是我國重要的經(jīng)濟(jì)藻類，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化工等方面。它不是我國固有的原產(chǎn)植物，三十年代從日本引來，在遼寧、山東等地人工養(yǎng)殖成功，并在海底自然繁生起來。我國養(yǎng)殖品種多數(shù)屬于種間雜交種，其種質(zhì)遺傳基礎(chǔ)1/2以上均來自我國原種群海帶(Laminaria japonica)，品種單一化存在遺傳脆弱性的巨大威脅。另外，在養(yǎng)殖生產(chǎn)中，采用多品種混合養(yǎng)殖、同期育苗等方法，經(jīng)過數(shù)代連續(xù)自交或近交，品種優(yōu)良性狀會(huì)產(chǎn)生明顯的衰退。而對(duì)海帶種質(zhì)的鑒定

2、仍然主要依靠技術(shù)人員的經(jīng)驗(yàn)判斷，就更進(jìn)一步加重了苗種混雜、品種退化等影響海帶養(yǎng)殖品種使用壽命的情況。隨著海帶養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展壯大，這些問題日益突出，已經(jīng)成為制約海帶養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素。所以，利用現(xiàn)代分子標(biāo)記技術(shù)研究海帶的遺傳多樣性，將有助于海帶種質(zhì)資源的開發(fā)利用。
　　 本研究利用AFLP標(biāo)記技術(shù)對(duì)遼寧大連地區(qū)海帶養(yǎng)殖群體和野生群體的遺傳多樣性進(jìn)行分析，旨在分子水平上探討?zhàn)B殖群體和野生群體的遺傳差異，為大連海帶種質(zhì)資源的保護(hù)和

3、可持續(xù)利用、有效地開展遺傳育種研究提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　 對(duì)分別用2×CTAB法、3×CTAB法和4×CTAB法三種方法提取的海帶孢子體基因組DNA，進(jìn)行紫外吸收檢測(cè)和電泳檢測(cè)。結(jié)果表明“海帶幼孢子體蠟葉干燥標(biāo)本--不研磨--2×CTAB法”這一組合最適合海帶孢子體DNA的提取，可獲得完整的海帶基因組DNA，AFLP擴(kuò)增譜帶清晰穩(wěn)定，滿足AFLP技術(shù)對(duì)DNA質(zhì)量的要求。因此本研究選擇這一組合提取海帶孢子體基因組DNA

4、。
　　 對(duì)大連地區(qū)海帶養(yǎng)殖群體和野生群體進(jìn)行了遺傳多樣性的AFLP分析，5個(gè)隨機(jī)引物組合從60個(gè)個(gè)體中共擴(kuò)增出232個(gè)位點(diǎn)，其中多態(tài)性位點(diǎn)達(dá)到了183個(gè)，平均每對(duì)引物組合能檢測(cè)到36.6個(gè)多態(tài)位點(diǎn)。野生群體和養(yǎng)殖群體的多態(tài)位點(diǎn)比例分別為71.98％和65.95％，平均雜合度分別為0.2623和0.2277，Shannon多樣性指數(shù)分別為0.3884和0.3426，說明大連地區(qū)海帶野生群體的遺傳變異水平高于養(yǎng)殖群體，但并沒有顯著

5、的差異。兩個(gè)群體總的遺傳分化值(Ht)為0.2821,其中來自它們內(nèi)部的分化系數(shù)Hs為0.2450，來自群體間的遺傳分化度Gst為0.1314，說明大部分的變異來自群體內(nèi)部。總體基因流Nm為3.4492,表現(xiàn)了一定的基因流動(dòng)性。另外，兩個(gè)群體的遺傳距離和遺傳相似度分別為0.0947和0.9096，證明養(yǎng)殖群體與野生群體的親緣關(guān)系較近。
　　 通過對(duì)大連海帶遺傳變異和遺傳結(jié)構(gòu)的分析，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)群體都具有較高的遺傳多樣性水平，但是與野