不同海參多糖的分離純化及生化性質(zhì)分析.pdf

1、海參(Sea Cucumber)是我國一種傳統(tǒng)的名貴滋補(bǔ)品，體內(nèi)富含多種生物活性物質(zhì)，具有較高的食用及藥用價(jià)值。在我國，人們對(duì)于海參及海參制品的需求隨生活水平的提高而日益增加。海參多糖是海參體內(nèi)最重要的生物活性物質(zhì)之一，具有抗凝血、抗血栓、降血脂和抑腫瘤等多種活性。海參多糖主要由海參硫酸軟骨素(SC-CHS)和海參巖藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)2種多糖組成。本論文以9種不同種類和不同生長海域的海參為研究對(duì)象，對(duì)其體壁中的SC-CHS和S

2、C-FUC進(jìn)行了系統(tǒng)的生化性質(zhì)分析，為海參種類的鑒別、海參品質(zhì)的評(píng)價(jià)以及海參制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立，提供了理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)，具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。主要內(nèi)容包括以下幾個(gè)部分： 1.采用溫和的酶提取法獲得了9種海參粗多糖，通過DEAE-52離子交換層析進(jìn)分級(jí)純化出SC-CHS和SC-FUC2種組分，由高效凝膠過濾色譜法和醋酸纖維薄膜電泳法進(jìn)行了純度鑒定。SC-CHS的分子量為12.49-21.53萬，SC-FUC分子量在70萬

3、以上。比較而言，溫帶海域海參富含SC-CHS，熱帶亞熱帶海域的海參富含SC-FUC，而寒帶海域海參2種組分的比值介于前兩者之間。 2.采用柱前衍生-HPLC法和離子色譜法分別對(duì)SC-CHS和SC-FUC進(jìn)行了單糖組成分析、硫酸基含量測(cè)定。建立了三氟乙酸水解-離子色譜(IC)測(cè)定海參多糖中硫酸根的方法。SC-CHS的組成單糖在種類上為類硫酸軟骨素的特征，主要由葡萄糖醛酸(GlcUA)、氨基半乳糖(GlaN)和巖藻糖(Fuc)構(gòu)成，

4、它們之間的摩爾比呈現(xiàn)一定的種間差異。SC-FUC的單糖組成則以巖藻糖為主。 海參粗多糖的硫酸基(SO42-)含量為23.61％-31.03％，SC-CHS和SC-FUC的SO42-含量分別為27.52％-32.66％、23.42％-29.31％。SC-CHS的硫酸基含量高于同種海參的SC-FUC。 單糖組成分析和硫酸基含量的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)于質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的建立、海參多糖的活性研究具有重要意義。 3.以SC-CHS為重點(diǎn)

5、研究對(duì)象，對(duì)SC-CHS和SC-FUC進(jìn)行了IR和1H NMR分析。 由IR初步分析SC-CHS巖藻糖支鏈上硫酸基取代，不同SC-CHS的紅外吸收具有一定的特征差異。紅外光譜操作簡便、費(fèi)用低廉，可以作為海參SC-CHS初步分析鑒定的方法。 經(jīng)1H NMR分析，根據(jù)SC-CHS硫酸酯化巖藻糖支鏈上異頭氫信號(hào)和不同海參的生長海域特征，可以將巖藻糖支鏈上硫酸基取代歸納為4種類型：1)寒帶海域海參：以2，4-diOSO3、3，4

6、-di OSO3雙取代為主，含部分4-OSO3取代；2)溫帶海域海參：以2，4-di OSO3取代為主，含部分4-OSO3取代；3)熱帶亞熱帶海域海參：只含有2，4-di OSO3取代，或以2，4-di OSO3取代和4-OSO3取代為主，含部分非硫酸酯化的巖藻糖；4)亞熱帶熱帶海域的Sandfish的硫酸軟骨素巖藻糖上硫酸基取代類似于溫帶海域海參，但4-OSO3取代更多。 以1H NMR分析確定SC-CHS中硫酸酯化巖藻糖支鏈