雙低菜粕中單寧和植酸降解菌的篩選及固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、本論文通過(guò)對(duì)土壤中的微生物進(jìn)行分離篩選,獲得了能夠同時(shí)降解單寧和植酸的菌株,研究這些菌株在固態(tài)發(fā)酵的條件下對(duì)菜粕中單寧和植酸的降解情況,優(yōu)化菌株的發(fā)酵條件,并對(duì)菌株的分類學(xué)地位進(jìn)行鑒定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容如下:
　　1、對(duì)土壤中微生物進(jìn)行分離篩選獲得可同時(shí)降解單寧和植酸的微生物。采用微生物富集培養(yǎng)技術(shù),經(jīng)過(guò)分離純化,共獲得109個(gè)純菌落(其中細(xì)菌39株、酵母菌46株、霉菌24株)。分別用單寧和植酸篩選性培養(yǎng)基篩選分離到的109株菌株和購(gòu)

2、自中國(guó)科學(xué)院微生物的9株菌,獲得42株植酸降解菌(其中細(xì)菌13株、酵母菌22株、霉菌7株)和18株單寧降解菌(其中細(xì)菌6株、酵母菌1株、霉菌11株),其中5株霉菌(M-6、M-3、M-1、3.951、3.316)和1株酵母菌(2.120)共6株菌株可以同時(shí)分解單寧和植酸。
　　2、將篩選得到的6株菌株(M-6、M-3、M-1、3.951、3.316和2.120)分別接種到菜粕固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中,以相同處理不接菌種的菜粕培養(yǎng)基作為對(duì)照

3、,同時(shí)每個(gè)菌株設(shè)置不同發(fā)酵時(shí)間(1d、2d、4d和7d),每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù),進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵(30℃,水分含量100％,pH6.6～7.0)。檢測(cè)不同菌株、不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵前后雙低菜粕中單寧和植酸含量。結(jié)果表明,所用菌株均可以在固態(tài)發(fā)酵的條件下顯著降解雙低菜粕中的單寧和植酸(P<0.05)。綜合考慮發(fā)酵時(shí)間與發(fā)酵效果得到結(jié)論:最適發(fā)酵菌為M-6,最適發(fā)酵時(shí)間為1d。
　　3、為獲得霉菌M-6降解雙低菜粕單寧和植酸的最佳發(fā)酵條件,研

4、究了起始發(fā)酵溫度(10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃)、水分含量(50％、75％、100％、150％、200％、250％、300％)、pH(3、4、5、6、7、8、9、10)以及碳源(葡萄糖)、氮源(尿素)、金屬離子等營(yíng)養(yǎng)因子在發(fā)酵過(guò)程中對(duì)M-6降解雙低菜粕中的植酸和單寧能力的影響。結(jié)果表明,菌株M-6在起始溫度25℃、pH6、初始水分含量200％、加入葡萄糖、尿素和金屬離子混合溶液,經(jīng)24h發(fā)酵后,對(duì)雙低菜粕中的植酸和單寧

5、具有最佳降解效果,可以使雙低菜粕中的植酸含量由2.81％下降至0.63％,單寧含量由1.32％下降至0.28％,顯著低于對(duì)照組和其他實(shí)驗(yàn)組(P<0.05)。此外,在此發(fā)酵條件下,雙低菜粕中粗蛋白含量由37.16％提高至43.48％,粗蛋白的體外消化率由75.32％提高至79.15％。
　　4、通過(guò)菌落形態(tài)學(xué)、菌株切片和分子測(cè)序等方法,鑒定M-6為黑曲霉(Aspgrgullusniger)。比較了不同溫度(20℃、25℃、30℃、3