農(nóng)桿菌介導(dǎo)的Ac-Dc轉(zhuǎn)座系統(tǒng)轉(zhuǎn)化甘藍(lán)型油菜的研究.pdf

1、突變體是指某個(gè)基因發(fā)生變異或某個(gè)性狀發(fā)生可遺傳變異的材料，我們可以利用這些突變材料來(lái)分離和鑒定基因的功能油菜是世界上最重要的油料作物之一，長(zhǎng)期以來(lái)對(duì)其研究的主要目標(biāo)就是要闡明控制其重要農(nóng)藝性狀的遺傳基礎(chǔ)并克隆相關(guān)基因。但近年來(lái)有關(guān)構(gòu)建油菜突變體庫(kù)的研究卻鮮見(jiàn)報(bào)道，這無(wú)疑阻礙了油菜功能基因組學(xué)的發(fā)展。為開(kāi)展油菜功能基因組學(xué)研究使得大規(guī)模構(gòu)建油菜突變體庫(kù)顯得日益迫切。自玉米Ac/Ds轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)以來(lái)，已經(jīng)被成功應(yīng)用于水稻、擬南介、番茄、煙

2、草等多種異源植物進(jìn)行基因的分離與克隆。利用Ds因子可以在Ac轉(zhuǎn)座酶的作用下發(fā)生跳躍的特性，探索將此系統(tǒng)應(yīng)用在油菜中來(lái)構(gòu)建突變體庫(kù)，為研究油菜基因功能提供研究材料。近十年來(lái)，油菜在轉(zhuǎn)基因方面取得了重大進(jìn)展，油菜的轉(zhuǎn)基因研究和分子克隆取得了令人矚目的成就，使油菜的品質(zhì)和種質(zhì)資源得到改良。農(nóng)桿菌介導(dǎo)法是油菜遺傳轉(zhuǎn)化最常用的方法，它是一種純生物的天然轉(zhuǎn)基因方法，操作簡(jiǎn)單，成本低，使它成為目前應(yīng)用最廣泛的遺傳轉(zhuǎn)化方法之一。
　　 本研究利

3、用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將含有Ac元件的質(zhì)粒pUbiAc及含有Ds元件的質(zhì)粒pDsBar1300分別轉(zhuǎn)化甘藍(lán)型油菜中雙6號(hào)的子葉柄與下胚軸，經(jīng)過(guò)篩選、生根、馴化、移栽，分別獲得了10株轉(zhuǎn)化Ac的卡那霉素抗性植株和28株轉(zhuǎn)化Ds的潮霉素抗性植株。PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在10株Ac轉(zhuǎn)化植株中有1株為陽(yáng)性苗，陽(yáng)性率為10％；在28株Ds轉(zhuǎn)化植株中有21株陽(yáng)性苗，陽(yáng)性率為75％。該結(jié)果為我們下一步構(gòu)建油菜突變體群體及開(kāi)展油菜功能基因組學(xué)研究將可能開(kāi)辟一個(gè)新的途