海南特有種華石斛共生真菌篩選及生物學特性研究.pdf

1、蘭科(Orchidaceae)植物是被子植物中的一個大家族,不少種類具有極高觀賞和藥用價值。但由于多種原因,包括華石斛(Dendrobium sinense)在內的一些野生蘭科植物資源日益枯竭,是植物保護中的“旗艦”類群。而蘭科植物是典型的菌根植物,具有伴菌萌發(fā)和菌根營養(yǎng)的習性,共生真菌對其生長發(fā)育具有極其重要的作用。因此,從共生真菌的角度研究和保護瀕危野生蘭科植物具有非常重要的意義。
　　 為探索共生真菌在華石斛繁殖、栽培和保

2、育中的應用,本研究從野生華石斛原球莖中分離獲得內生真菌,將真菌回接華石斛,篩選華石斛有益共生真菌,并探討了華石斛共生真菌的生物學特性。其主要研究結果如下:
　　 [1)以植物生物生長指標、葉綠素含量為篩選指標,篩選出S3、S7、S9、S10、S125株促進華石斛生長,并不同程度提高了植株葉綠素的有益共生真菌。不同菌株對華石斛的促生作用不同,同種菌株對華石斛不同生長階段作用效果亦不同。
　　 [2)初步建立了華石斛與共生真

3、菌的共生培養(yǎng)體系。華石斛組培苗與真菌共生培養(yǎng)基為:1/2MS+蔗糖7.5g/L+瓊脂12g/L,pH5.8。添加了真菌誘導子的MS和1/2MS培養(yǎng)基有利于華石斛原球莖生長,200ml/L真菌誘導子促生效果較好。華石斛盆苗根部施液體菌劑可明顯促進植株生長發(fā)育,此方法操作簡單、成本低,可應用于華石斛人工栽培。
　　 [3)華石斛共生真菌最適生長溫度為25℃,生長溫度范圍為5～40℃之間,最低生長溫度為5～15℃,最高生長溫度為30～

4、40℃,不同菌株生長適宜溫度范圍不同,當溫度≦5℃或≧40℃時,真菌無法生長。
　　 華石斛共生真菌在含有機營養(yǎng)成分豐富的PDA和OMA培養(yǎng)基上生長較好;
　　 華石斛共生真利用碳源范圍較廣,可利用單糖、雙糖、多聚碳水化合物的多種碳源,對麥芽糖、可溶性淀粉、羧甲基纖維素、蔗糖利用效果較好:對山梨糖醇利用效果較差,缺乏碳源對菌株生長無明顯抑制作用;
　　 華石斛共生真菌對酵母膏、蛋白胨、甘氨酸、硝酸鈉利用效果較好,