公豬精液稀釋劑開發(fā)過程中一些問題的研究.pdf

1、本試驗(yàn)的目的是對(duì)現(xiàn)有的且在實(shí)際應(yīng)用中效果較好的公豬精液稀釋液的組成成分加以改進(jìn)，探討了公豬精液稀釋劑加工和保存過程中各原料試劑配伍后可能產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)及對(duì)稀釋劑質(zhì)量的影響、各原料試劑最適宜的消毒滅菌方法、公豬精液中常見病原微生物的種類，在不影響精液于16-18℃保存效果的前提下盡可能降低稀釋劑的成本，使之能在生產(chǎn)中大規(guī)模廣泛應(yīng)用。試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1.不同稀釋液配方對(duì)公豬精液保存效果的影響：在5個(gè)稀釋液配方中，以配方5的保存

2、效果最好。配方4和配方5在多數(shù)時(shí)間內(nèi)對(duì)活精子數(shù)、頂體不完整率、VAP、VSL和VCL的影響差異不顯著(P＞0.05)，但配方4和配方5對(duì)上述指標(biāo)的影響顯著好于配方1、配方2和3(P＜0.05)。
　　 2.公豬精液中細(xì)菌的分離培養(yǎng)、生化鑒定和藥敏試驗(yàn)：本次試驗(yàn)共鑒定出五種病原菌，主要有大腸桿菌、克雷伯菌、變形桿菌、棒狀桿菌以及沙門氏菌。五種病原菌對(duì)環(huán)丙沙星、氧氟沙星和恩諾沙星等喹諾酮類藥物極度敏感，在所選抗生素中喹諾酮類藥物效果

3、最好。
　　 3.原料混合消毒后的結(jié)果及保存半年后對(duì)公豬精液保存效果的影響：結(jié)果表明，原料經(jīng)過混合消毒后，發(fā)現(xiàn)不能混合保存的原料有L-半光氨酸、Tris、檸檬酸。對(duì)照組與干熱消毒、臭氧消毒和未消毒組的稀釋粉在保存半年后配成稀釋液在16-18℃保存精液的結(jié)果：干熱消毒的保存效果最好，但是差異不顯著(P＞0.05)。經(jīng)過不同方法消毒稀釋劑保存半年后配制成稀釋液后，用于保存公豬精液時(shí)對(duì)精液中細(xì)菌生長菌落數(shù)的影響中，干熱消毒原料配置成稀

4、釋液對(duì)精液中細(xì)菌數(shù)的生長顯著低于其他組(P＜0.05)。
　　 4.稀釋液中L-半胱氨酸及其類似物的替代對(duì)公豬精液保存效果的影響：在對(duì)照組、L-半胱氨酸鹽酸鹽、N-乙酰半胱氨酸和L-半胱氨酸對(duì)公豬精液的保存中，對(duì)照組保存效果最差，L-半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸的保存效果最好，兩者之間差異不顯著(P＞0.05)。在稀釋劑中使用BR級(jí)與AR級(jí)Tris和添加BSA與不添加的兩組比較中，兩組各在活精子數(shù)、活力、VAP、VSL、VCL和H

5、OST等指標(biāo)上差異不顯著(P＞0.05)。
　　 5.公豬精液在16-18℃環(huán)境下，在0-3天的保存中且活力在0.5以上時(shí)，在IVF試驗(yàn)中對(duì)卵母細(xì)胞的卵裂率、16細(xì)胞發(fā)育率和囊胚率等指標(biāo)差異不顯著(P＞0.05)，但結(jié)果也表明隨著保存時(shí)間延長而囊胚率下降，可能是保存時(shí)間延長使精子的衰老程度增加以致雖然早期可受精但隨后繼續(xù)發(fā)育會(huì)受影響。
　　 6.日本稀釋劑、改進(jìn)稀釋劑對(duì)公豬精液在16-18℃保存的效果表明，對(duì)精子活力的影