西寧地區(qū)番茄內(nèi)生芽孢桿菌定殖規(guī)律及促生效應(yīng)的研究.pdf

1、在西寧不同地區(qū)采集健康的番茄植株，用稀釋分離法共分離出24株菌株，通過回接驗證試驗得出，菌株TG-1等20株菌株為內(nèi)生菌。番茄的根、莖、葉和種子中都存在著內(nèi)生菌。用金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），大腸桿菌（Escherichia coli）作為指示菌，將分離到的內(nèi)生菌進(jìn)行抑菌能力的測定，篩選出了三株具有較強(qiáng)拮抗作用的菌株，TG-1，TG-2，S-2。通過觀察內(nèi)生菌在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的特征和生理生化特性，

2、初步鑒定出菌株TG-1為堅強(qiáng)芽孢桿菌，菌株TG-2為枯草芽孢桿菌，菌株S-2為多粘芽孢桿菌。
　　 通過單因素試驗，測定了三株菌株的生長曲線以及所需要的最佳溫度、pH值、轉(zhuǎn)速、裝液量、接種量，得出三株菌株的生長曲線大致相同，0～12h，處于生長的延滯期；在12～22 h，是對數(shù)生長期；在22～48h，處于生長的穩(wěn)定期；從48h開始，開始進(jìn)入生長的衰亡期。當(dāng)滅菌后的pH值為6.7時，菌株TG-1和菌株S-2生長最好，當(dāng)滅菌后的pH

3、值為7.3時，菌株TG-2生長最好；菌株TG-1和S-2的最適生長溫度為28℃，菌株TG-2的最適生長溫度為30℃，三株菌株的最佳接種量為1％，最佳轉(zhuǎn)速為150r/min；菌株TG-1和S-2的裝液量為50ml/200ml時，生長量最大，菌株TG-2的裝液量為50ml/250ml時，生長量最大。通過單因素試驗和正交設(shè)計對三菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化，得出菌株TG-1優(yōu)化培養(yǎng)基配方為：玉米粉20g，麩皮1.5g，磷酸氫二鉀0.6g，酵母膏1

4、.5g，水1000ml。菌株TG-2優(yōu)化培養(yǎng)基配方為：玉米粉20g，蛋白胨2g，磷酸氫二鉀0.2g，硫酸鎂0.2g，酵母膏1.5g，水1000ml。菌株S-2優(yōu)化培養(yǎng)基配方為：紅糖20g，牛肉膏1.5g，磷酸氫二鉀+硫酸鎂（1:1）0.6g，酵母膏1.5g，水1000ml。
　　 以抗利福平和硫酸鏈霉素雙抗性為標(biāo)記，用不同的接種方法測定菌株TG-1和TG-2在不同品種的番茄中的定殖動態(tài)，除了噴霧法之外其余的接種方法均可以回收到標(biāo)

5、記菌，并且灌根法和浸種法接種效果較好。用灌根法接種TG-1R菌株和TG-2R菌株至不同品種的番茄植株和辣椒、白菜等植株后，發(fā)現(xiàn)能在番茄體內(nèi)和其他作物中較好的定殖并傳導(dǎo)，其消長規(guī)律為先增加后降低。這表明這兩株菌株對番茄品種沒有選擇性，且有廣泛的寄主植物。
　　 用菌株TG-1和TG-2的發(fā)酵液原液、10倍稀釋液、100倍稀釋液、1000倍稀釋液浸泡番茄種子和處理幼苗后，發(fā)酵液原液對兩個品種的番茄的萌發(fā)、干重、根莖長、出苗率、鮮重均

6、有明顯的抑制作用，而稀釋液對其有不同程度的促進(jìn)作用。用發(fā)酵液稀釋液、上清液、菌體分別浸泡番茄種子后，對番茄幼苗均有一定的促生作用。對于菌株TG-1，菌體的促生效果最好，而對于菌株TG-2，上清液（胞外分泌物）的促生作用最強(qiáng)。灌根法、浸種法、注射法三種接種方式對番茄的株高、鮮重及干重都表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用：均可以提高番茄的單果重和單株產(chǎn)量；可以提高番茄中糖的含量、番茄紅素的含量、酸度比，明顯改善番茄的品質(zhì)。對白菜、辣椒和小麥三種作物的生長

7、較對照均有一定的促進(jìn)作用，說明該菌可以廣泛的應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。促生機(jī)制研究表明：菌株TG-1和TG-2能夠進(jìn)入植物體內(nèi)定殖并傳導(dǎo)，該菌在植物體內(nèi)定殖量的多少與其促生作用呈正相關(guān)；起促生作用的并不單單是菌體或其外分泌物，而是這兩者共同起作用的結(jié)果：并且可通過提高植物體內(nèi)葉綠素的含量，提高植物葉片的光合速率、蒸騰速率等，從而促進(jìn)植物的光合作用而達(dá)到促進(jìn)其生長；能降低植株體內(nèi)丙二醛的含量，從而保護(hù)細(xì)胞膜促進(jìn)植物生長，促進(jìn)根的生長。以上多種因素