福建省柑橘根部1種根結(jié)線蟲新種的鑒定.pdf

1、在福建省順昌縣山區(qū)一柑橘園發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的柑橘根結(jié)線蟲病,本文對(duì)該根結(jié)線蟲病的癥狀特點(diǎn)進(jìn)行了詳細(xì)描述。通過形態(tài)學(xué)特征、酯酶和蘋果酸脫氫酶酶譜分析、寄主范圍測(cè)定、分子生物學(xué)等方法對(duì)根結(jié)線蟲種進(jìn)行了鑒定,發(fā)現(xiàn)該線蟲與已描述的根結(jié)線蟲種存在明顯差異,定為根結(jié)線蟲新種,并根據(jù)采集地,暫定名為順昌根結(jié)線蟲(Meloidogyne shunchangensis n.sp.),同時(shí)對(duì)柑橘根部其他寄生線蟲種類進(jìn)行了鑒定。
　　 順昌根結(jié)線蟲能侵染枳(

2、Poncirus trifoliata),產(chǎn)生根結(jié),根結(jié)特點(diǎn)為形成根系中軸為中心,在根系及營養(yǎng)根根尖上形成大小不等的念珠狀根結(jié)；根結(jié)處直接產(chǎn)生側(cè)根,側(cè)根受侵染,產(chǎn)生次生根結(jié)。在寄主范圍中,順昌根結(jié)線蟲不能寄生大豆、花生和煙草,對(duì)豇豆、黃瓜、番茄、西瓜、辣椒輕微侵染。在這些寄主上,侵染根系根結(jié)小,以根系中軸為中心隆起,表現(xiàn)為串珠狀,根結(jié)上可長(zhǎng)出細(xì)根特點(diǎn)。
　　 雌蟲會(huì)陰花紋特征為為圓形或卵圓形,背弓中等或偏高,線紋細(xì)密；線紋以尾端

3、為中心,線紋包至陰肛兩側(cè),陰肛間大多無線紋或少數(shù)線紋通過,肛門下方常有一角質(zhì)膜加厚隆起成脊?fàn)?；?cè)尾腺口大且明顯,圓形；側(cè)尾腺口距離略寬于陰門寬度；側(cè)區(qū)有變異,無側(cè)線,或在一側(cè)或兩側(cè)形成較明顯單側(cè)線或內(nèi)雙側(cè)線。雌蟲唇盤隆起,背、腹部的中唇中間分開形成2個(gè)明顯分開的次唇片,側(cè)唇大,近方形。雌蟲排泄孔開口距口針基部球遠(yuǎn),EP／ST平均為2.7。雄蟲頭部唇盤與中唇融合,唇盤與中唇形成啞鈴狀結(jié)構(gòu)；頭區(qū)無環(huán)紋,口針粗直,平均長(zhǎng)度為17.8μm,體中

4、部具有4條明顯側(cè)線,中間脊間有1條淺側(cè)線,靠外側(cè)2條側(cè)帶有網(wǎng)紋通過；二齡幼蟲體長(zhǎng)相對(duì)短,平均值為332.7μm,有一個(gè)相當(dāng)長(zhǎng)的口針,均值達(dá)13.4μm,直腸膨大,尾部短,平均為24.2μm,尾端鈍圓,透明區(qū)短,平均為4.3μm。
　　 通過同工酶分析發(fā)現(xiàn),順昌根結(jié)線蟲的蘋果酸脫氫酶(Mdh)譜帶有2條,1條為Rm值為37.9％的強(qiáng)條帶,1條為Rm值為23.7％的弱條帶；酯酶譜帶Rm值為55.7％,屬于新的譜型。
　　 對(duì)

5、順昌根結(jié)線蟲rDNA ITS區(qū)及28S D2-D3區(qū)序列進(jìn)行了PCR擴(kuò)增、克隆與測(cè)序,通過與GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對(duì),順昌根結(jié)線蟲可與其他根結(jié)線蟲明顯區(qū)分開?；贗TS1-5.8S-ITS2序列比對(duì)分析,與其他根結(jié)線蟲的同源性為75％-81％；基于D2-D3序列比對(duì)分析,與其他根結(jié)線蟲的同源性為79％-84％?；贗TS1-5.8S—ITS2或D2-D3序列,用NJ法構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹表明順昌根結(jié)線蟲可與其他線蟲明顯分開。
　　

6、 對(duì)柑橘根結(jié)線蟲病發(fā)生地柑橘根部其他寄生線蟲進(jìn)行了鑒定,其中鑒定出10屬5種,這5個(gè)種分別為假強(qiáng)壯螺旋線蟲(Helicotylenchus pseudorobustus)、小型擬鞘線蟲(Hemicriconemoides minor)、布科維納針線蟲(Paratylenchusbukowinensis)、美洲劍線蟲(Xiphinema americanum group)、湖南劍線蟲(Xiphinema hunaniense),同時(shí)對(duì)柑