兩種昆蟲(chóng)病原真菌防治大棚蔬菜根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的應(yīng)用研究.pdf

1、隨著北方蔬菜大棚面積擴(kuò)大，大棚中的根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害大肆流行，嚴(yán)重影響大棚蔬菜的產(chǎn)量。目前，菜農(nóng)采用的防治方法是在定植前用化學(xué)農(nóng)藥對(duì)土壤進(jìn)行處理或者在蔬菜生長(zhǎng)季節(jié)連續(xù)使用化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行灌根。這樣的方法不僅會(huì)造成土壤的嚴(yán)重污染，并且化學(xué)農(nóng)藥的有毒物質(zhì)可被蔬菜直接吸收，形成有毒蔬菜，威脅人們的食品安全和健康。因此，非常需要開(kāi)發(fā)無(wú)公害的生物防治方法。本碩士論文利用兩種昆蟲(chóng)病原真菌：球孢白僵菌TST05菌株的菌粉和金龜子綠僵菌TSL06菌株的發(fā)酵液對(duì)蔬

2、菜大棚根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)進(jìn)行了防治研究，主要內(nèi)容有：綠僵菌發(fā)酵液對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)防治研究，包括致死率實(shí)驗(yàn)、室內(nèi)盆栽實(shí)驗(yàn)、大棚實(shí)驗(yàn)、真菌在大棚土壤中的宿存能力，及綠僵菌發(fā)酵液毒素成分氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定；白僵菌菌粉在大棚中對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的防治研究，包括冬季在西芹上的防治實(shí)驗(yàn)、春夏季在黃瓜上的防治實(shí)驗(yàn)，及白僵菌在大棚土壤中的宿存能力。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴用從實(shí)驗(yàn)大棚內(nèi)采集的新鮮的活線(xiàn)蟲(chóng)作為實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)分三個(gè)處理，綠僵菌發(fā)酵液的濾液處理組， S

3、DAY培養(yǎng)基處理組，蒸餾水處理組，處理24h后，發(fā)酵濾液處理組死亡率為100％，培養(yǎng)基處理組組死亡率為7.40％，蒸餾水處理組死亡率為0。⑵利用病土在實(shí)驗(yàn)室用花盆栽種西芹，分三個(gè)處理，綠僵菌發(fā)酵液原液處理組、發(fā)酵液濾液處理組、蒸餾水處理組，試驗(yàn)它們對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的防治效果。西芹生長(zhǎng)三個(gè)月后，結(jié)果顯示：西芹的平均株高，原液處理組比濾液組高3.1cm，比空白組高6.3cm；西芹單株平均鮮重，原液處理組比濾液組重13.4g，比空白組重6.58g；

4、根瘤數(shù)，原液處理組比空白組減少了100%，濾液組比空白組減少了83.88%。綠僵菌發(fā)酵液對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)具有明顯的防治效果，原液組比濾液組更好。⑶將綠僵菌TSL06菌株用發(fā)酵罐制備成發(fā)酵液。在大棚內(nèi)，蔬菜為黃瓜，二月底栽種，實(shí)驗(yàn)分三個(gè)處理，發(fā)酵液處理組，農(nóng)藥處理組，空白處理組，五個(gè)月后，統(tǒng)計(jì)黃瓜根上的根瘤數(shù)。根瘤按直徑大小分為四組，分別是直徑為0-3mm、4-6mm、7-9mm、≥10mm。結(jié)果顯示：施菌組平均根瘤數(shù)按直徑從小到大分別為56、

5、35、33、4個(gè)/株，農(nóng)藥組分別為45、9、8、1個(gè)/株，空白組分別為67、54、39、11個(gè)/株。施菌組與空白相比，有良好的防治效果，但是，稍微差于農(nóng)藥組。⑷用正己烷和乙酸乙酯作為溶劑，對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行提取，提取物經(jīng)氣相色譜-質(zhì)普聯(lián)用儀分析。得到20種可能有毒性的小分子有機(jī)物，如2,5-二叔丁基苯酚、鄰苯二甲酸-異丁基-2-戊基酯、1-亞乙基-1H-茚、2,4二叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基-7,7-二甲基-1,3,5-環(huán)庚三烯等。⑸將白僵

6、菌TST05菌株制成菌粉。在大棚內(nèi)，蔬菜為西芹，十月初栽種，栽種前將菌粉施予土壤中，實(shí)驗(yàn)分三個(gè)處理，施菌組，農(nóng)藥組，空白組，三個(gè)月后測(cè)量西芹的株高、根長(zhǎng)、鮮重、根瘤數(shù)、葉片的葉綠素含量及其凈光合速率。大棚-1的結(jié)果顯示：芹菜平均株高，施菌組比施用農(nóng)藥組高10.42cm，比空白組高10.00cm;芹菜單株平均鮮重，施菌組比施用農(nóng)藥組重48g，比空白組重93g；根瘤數(shù)，施菌組比空白組減少了54.9%，農(nóng)藥組比空白組減少了50.0%；葉綠素總

7、量，施菌組比施用農(nóng)藥組高0.05mg/g，比空白組高0.277mg/g；凈光合速率，施菌組比施用農(nóng)藥組高0.4 mg CO2/克鮮重*小時(shí)，比空白組高0.367mg CO2/克鮮重*小時(shí)。⑹大棚-2的結(jié)果顯示：芹菜平均株高，施菌組比施用農(nóng)藥組高2.8cm，比空白組高12.7cm；平均鮮重，施菌組比施用農(nóng)藥組輕41g，比空白組重51g；根瘤數(shù)，施菌組比空白組減少了45.6%，施用農(nóng)藥組比空白組減少了41.7%；葉綠素總量，施菌組比施用農(nóng)藥

8、組高0.036mg/g，施菌組比空白組高0.133mg/g；凈光合速率，施菌組比施用農(nóng)藥組高1.675 mg CO2/克鮮重*小時(shí)，比空白組高1.725mg CO2/克鮮重*小時(shí)。⑺將白僵菌TST05菌株制成菌粉。在大棚內(nèi)，蔬菜為黃瓜，二月底栽種，栽種前將菌粉施予土壤中，實(shí)驗(yàn)分三個(gè)處理，白僵菌處理組，農(nóng)藥處理組，空白處理組，五個(gè)月后統(tǒng)計(jì)黃瓜根上的根瘤數(shù)。根瘤按直徑大小分為四組，分別是直徑為0-3mm、4-6mm、7-9mm、≥10mm。

9、結(jié)果顯示：施菌組平均根瘤數(shù)按直徑從小到大分別為63、30、22、5個(gè)/株，農(nóng)藥組分別為45、9、8、1個(gè)/株，空白組分別為67、54、39、11個(gè)/株。結(jié)論：白僵菌在春季到夏季期間，對(duì)根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的防治具有明顯效果。但是，效果稍差于農(nóng)藥組。⑻實(shí)驗(yàn)制備的綠僵菌發(fā)酵液孢子濃度為1×108孢子/mL，白僵菌菌粉孢子含量為1×108孢子/g，施予大棚后，冬季每半月取施菌土樣一次，春夏季每一個(gè)月取土樣一次，測(cè)量土壤中的孢子含量。結(jié)果顯示：冬季，白僵菌

10、在土壤中的濃度依次為2.44×105、3.78×105、3.56×105、3.44×105、1.44×105、1.43×105孢子/g土壤。春夏季，綠僵菌在土壤中的濃度依次為5.00×105、4.22×105、7.11×105、1.44×105、0.11×105孢子/g土壤，白僵菌在土壤中的濃度依次為1.56×105、10.67×105、7.12×105、2.00×105、1.11×105、0.78×105孢子/g土壤。白僵菌和綠僵菌在