版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、稻瘟病是由子囊菌Magnaporthe grisea(Hebert)Barr[無性世代為Pyriculariagrisea(Cooke)Sacc]引起的世界性水稻病害,對(duì)水稻生產(chǎn)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。以各種抗病性的種質(zhì)資源為基礎(chǔ),通過分子標(biāo)記輔助(MAS)育種和基因工程(轉(zhuǎn)基因)的手段,可以有效地將多個(gè)?;剐曰蜣D(zhuǎn)育到優(yōu)良農(nóng)藝性狀已有品種中,從而加快育種進(jìn)程,提高品種對(duì)稻瘟病的抗性,增強(qiáng)穩(wěn)產(chǎn)性。
黑殼子粳是一個(gè)來自于太湖流域?qū)Φ?/p>
2、瘟病菌表現(xiàn)廣譜高抗的地方水稻品種。按照?qǐng)D位克隆的技術(shù)路線,前期的研究工作將黑殼子粳上的抗稻瘟病基因定位到第11染色體RM7654和In5之間,命名為Pihk1(t)。
為克隆到抗稻瘟病基因Pihk(t),本文以黑殼子粳為材料構(gòu)建基因組BAC文庫。在Danial G.Peterson BAC文庫構(gòu)建方法的基礎(chǔ)上,對(duì)實(shí)驗(yàn)步驟做了一些改進(jìn),建立了構(gòu)建水稻基因組BAC文庫的一套比較完整的體系。該文庫以plndigo BAC5為載體
3、,包含有39936個(gè)克隆。經(jīng)酶切、電泳檢測(cè),平均插入片段為70 Kb,按照水稻430 Mb的基因組大小來估算,文庫覆蓋水稻基因組的6.5倍。
以黑殼子粳基因組文庫為基礎(chǔ),構(gòu)建了便于PCR篩選的混合池。最初的文庫為初級(jí)池,由104個(gè)384孔板組成,復(fù)制一份作為永久保存。將初級(jí)庫的縱行合并為二級(jí)池,二級(jí)池橫行合并為三級(jí)池。對(duì)三級(jí)池的所有混樣菌液提取質(zhì)粒,用Pihk1(t)緊密連鎖的標(biāo)記RM7654和In5通過PCR的方法,根據(jù)
4、三維篩選體系篩選陽性克隆,獲得4個(gè)該位點(diǎn)的陽性單克隆。陽性克隆經(jīng)末端測(cè)序,根據(jù)測(cè)序結(jié)果設(shè)計(jì)引物進(jìn)行染色體步移篩選鄰近克隆,共獲得6個(gè)陽性單克隆,重疊群覆蓋基因組區(qū)間將近140 Kb。
挑選覆蓋Pihk1(t)定位區(qū)間及其上游的克隆BAC No.242和BAC No.66P14進(jìn)行基因組測(cè)序,以日本晴序列為參照,發(fā)現(xiàn)RM7654和In5之間黑殼子粳存在5 Kb的插入,其中包含一個(gè)類似反轉(zhuǎn)座子的序列,其對(duì)黑殼子粳的抗病效果可能
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 黑殼子粳抗稻瘟病基因Pi-hkl候選基因的克隆和初步功能驗(yàn)證.pdf
- 水稻稻瘟病抗性的全基因組關(guān)聯(lián)分析和品種抗瘟性改良.pdf
- 水稻抗病基因同源序列分析及抗稻瘟病候選基因克隆.pdf
- 玉米全基因組抗病侯選基因的克隆和定位.pdf
- 水稻抗白葉枯病基因Xa23的分子標(biāo)記定位及基因組文庫構(gòu)建.pdf
- 松粳9號(hào)對(duì)稻瘟病抗性及抗病基因定位.pdf
- 水稻抗褐飛虱和抗稻瘟病數(shù)量基因位點(diǎn)定位分析.pdf
- 水稻非整倍體T1和T11基因組表達(dá)特征解析.pdf
- 水稻廣譜抗稻瘟病基因的遺傳分析與定位.pdf
- 水稻抗稻瘟病基因Pi-ta多態(tài)性研究和Ptr(t)基因的精細(xì)定位.pdf
- 水稻抗白葉枯病和抗稻瘟病相關(guān)基因的表達(dá)分析和定位.pdf
- 利用物理圖譜對(duì)水稻基因組部分區(qū)段的初步分析.pdf
- 稻瘟病菌的致病性分析及水稻抗稻瘟病基因的定位.pdf
- 水稻抗稻瘟病遺傳改良以及基因定位研究.pdf
- 水稻抗稻瘟病和抗蟲基因育種研究.pdf
- 水稻分蘗角度基因精細(xì)定位及抗稻瘟病新基因的鑒定與定位.pdf
- 水稻不育系系譜抗稻瘟病遺傳及抗病基因同源序列分析.pdf
- 山羊基因組文庫構(gòu)建.pdf
- db21∕t 2396-2015 水稻品種抗稻瘟病基因檢測(cè) pcr法
- 水稻抗稻瘟病基因的遺傳定位及抗稻瘟病褐飛虱改良.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論