EMS處理誘發(fā)大白菜變異的研究.pdf

1、作物種質(zhì)資源是品種改良的物質(zhì)基礎(chǔ)。種質(zhì)資源匱乏是目前大白菜品種改良中面臨的最大問(wèn)題,創(chuàng)造具有豐富遺傳基礎(chǔ)的育種材料是大白菜育種工作者研究的重點(diǎn)之一。人工誘變可使自然突變率提高千倍以上,從而使人們定向地創(chuàng)造和篩選變異成為可能。但人工誘變存在著方向不確定性和多為隱性突變,將人工誘變與小孢子培養(yǎng)相結(jié)合,可達(dá)到基因迅速純合和縮短突變鑒定時(shí)間的目的。
　　 本研究以6份不同基因型大白菜為試驗(yàn)材料,采用EMS為誘變劑,分別進(jìn)行了種子誘變、花

2、蕾誘變結(jié)合游離小孢子培養(yǎng)、游離小孢子誘變與培養(yǎng)以及花粉誘變處理方法的研究,確定了不同處理方法適宜的EMS濃度和處理時(shí)間,探討了種子處理后種子和幼苗防御系統(tǒng)相關(guān)生理生化指標(biāo)的變化,并對(duì)蕾期授粉自交后代和游離小孢子培養(yǎng)后代進(jìn)行了田間形態(tài)學(xué)鑒定及分子輔助鑒定,初步獲得了一定類型的變異材料。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.以‘99-2’和‘津育80’大白菜種子為材料,研究了不同EMS濃度浸泡種子誘變4h后種子的萌發(fā)情況、電導(dǎo)率變化及種子與

3、幼苗的SOD、POD活性和MDA的含量變化。結(jié)果表明,EMS濃度范圍為0～1.0％,隨著EMS濃度的增大,種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率逐漸降低,幼苗根尖和葉緣出現(xiàn)褐化并逐漸加劇,成活率下降；種子浸出液電導(dǎo)率及種子和幼苗的MDA含量均逐漸增大；EMS對(duì)種子及幼苗SOD、POD活性影響表現(xiàn)為低濃度促進(jìn)、高濃度抑制。初步確定大白菜種子誘變處理的適宜EMS濃度為0.4％～0.6％。
　　 2.以大白菜‘85-1’的花蕾為處理對(duì)象,研究了不同濃度

4、的EMS浸泡花蕾不同時(shí)間小孢子膨大以及產(chǎn)胚成苗情況的影響,結(jié)果表明隨著EMS濃度增大或處理時(shí)間延長(zhǎng),小孢子膨大率和產(chǎn)胚率逐漸降低,畸形胚率增加；以0.1％的EMS處理花蕾15min和30min可得到一定數(shù)量的活性胚并能夠正常發(fā)育成植株,變異率較高,1％濃度處理15min也可以得到少量的活性胚胎但是再生植株能力差,未發(fā)育成苗。
　　 3.對(duì)大白菜‘85-1’‘A01’‘A06’3個(gè)自交系的小孢子進(jìn)行了EMS誘變處理并培養(yǎng),對(duì)小孢子

5、培養(yǎng)過(guò)程的細(xì)胞學(xué)觀察結(jié)果表明,隨著培養(yǎng)基中EMS含量的增加和誘變培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),小孢子膨大率出現(xiàn)了明顯的下降,各濃度時(shí)間下均未形成成熟的胚狀體。
　　 4.用EMS-石蠟油處理‘85-1’‘A12’的花粉,研究花粉離體萌發(fā)半致死的EMS濃度和處理時(shí)間。結(jié)果表明:常溫下存于液體石蠟油中的大白菜花粉在1h內(nèi)萌發(fā)率不受影響,之后隨儲(chǔ)存時(shí)間延長(zhǎng)而降低；隨著EMS濃度的增大或時(shí)間的延長(zhǎng),花粉萌發(fā)率降低；適宜大白菜花粉誘變的EMS誘變劑量為