gb 18006.2-1999 一次性可降解餐飲具降解性能試驗(yàn)方法

1、<p>　　GB/T 18006.2－1999</p><p><b>　　前言</b></p><p>　　本標(biāo)準(zhǔn)參考采用了ISO 846－1997，《塑料微生物的作用評(píng)價(jià)》、ASTM D 5272－1992《光降解塑料野外曝露試驗(yàn)方法》、 ASTM D 5247－1992《測(cè)定降解塑料在特定微生物條件下需氧生物降解性能的試驗(yàn)方法 》、ASTM D 5

2、338－1992 《測(cè)定塑料材料在可控堆肥條件下需氧生物降解性能的試驗(yàn)方法》，并補(bǔ)充 了“纖維素酶侵蝕試驗(yàn)”內(nèi)容。</p><p>　　本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B是標(biāo)準(zhǔn)的附錄，附錄C、附錄D是提示的附錄。</p><p>　　本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家經(jīng)濟(jì)貿(mào)易委員會(huì)、科學(xué)技術(shù)部、衛(wèi)生部聯(lián)合提出。</p><p>　　本標(biāo)準(zhǔn)由鐵道部衛(wèi)生研究所起草。</p><p&g

3、t;　　本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：陳佐、孔憲會(huì)、陳哲京、胡寶泉。</p><p>　　中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)</p><p>　　一次性可降解餐飲具降解性能試驗(yàn)方法</p><p>　　GB/T 18006.2－1999</p><p>　　Test method for determining the degradability of single

4、 use and </p><p>　　degradable lunch container and drinking set</p><p><b>　　1、范圍</b></p><p>　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一次性可降解餐飲具光－生物降解性能及生物降解性能試驗(yàn)的\基本原理、適用范圍、試驗(yàn)條件、方法步驟、試驗(yàn)報(bào)告及技術(shù)要點(diǎn)。</p>

5、<p>　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于光－生物降解及生物降解性材料制作的一次性餐飲具降解性能檢驗(yàn)。</p><p><b>　　2、引用標(biāo)準(zhǔn)</b></p><p>　　下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過(guò)在本標(biāo)準(zhǔn)中引用 而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂，適用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討適用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。</p><p&

6、gt;　　GB 2423.16－1999 電工電子產(chǎn)品基本環(huán)境試驗(yàn)規(guī)程 試驗(yàn)J：長(zhǎng)霉試驗(yàn)方法</p><p>　　GB/T9344－1988 塑料氙燈光源曝露 試驗(yàn)方法</p><p>　　GB/T16422.1－1996 塑料試驗(yàn)室光源曝露試驗(yàn)方法</p><p>　　GB/T17603－1998 光降解塑料戶(hù)外曝露試驗(yàn)方法<

7、;/p><p>　　GB18006.1－1999 一次性可降解餐飲具通用技術(shù)條件</p><p><b>　　3、定義</b></p><p>　　本標(biāo)準(zhǔn)采用GB 18006.1的定義及下列定義：</p><p>　　3.1、光降解誘導(dǎo)期 photodegradable induction period</p&g

8、t;<p>　　塑料經(jīng)日光照射（和氙弧光、紫外光加速），感官脆性增加，外觀出現(xiàn)0.5~1cm裂口和裂紋的時(shí)期。</p><p>　　4、光－生物降解性能試驗(yàn)</p><p><b>　　4.1、 基本原理</b></p><p>　　光－生物降解塑料在戶(hù)外日光和人工模擬陽(yáng)光\紫外線(xiàn)、溫度濕度等氣候條件的作用下，引起從外觀到內(nèi)在質(zhì)量

9、的變化（物理性能降低，分子量下降，新生含氧基團(tuán)等），外觀碎化、粉化后，其低分子量成分及以羰基為代表的新生含氧基團(tuán)可為微生物提供碳源而繼續(xù)被生物降解。</p><p>　　4.2、野外曝曬架曝露試驗(yàn)</p><p>　　4.2.1、適用范圍</p><p>　　適用于光－生物降解性材料制品光降解性能和降解程度的型式檢驗(yàn)和評(píng)價(jià)。</p><p>

10、　　4.2.2、試驗(yàn)場(chǎng)地</p><p>　　4.2.2.1、按以下要求選擇在氣候類(lèi)型有代表性的試驗(yàn)場(chǎng)地：</p><p>　　a）場(chǎng)地平坦空曠、不積水，東、南、西方向沒(méi)有仰角大于20度、北方向沒(méi)有仰角大于45度的障礙物；</p><p>　　b）試驗(yàn)場(chǎng)地的大氣質(zhì)量達(dá)到該區(qū)域平均水平，地面宜保持自然植被，但草高不宜超過(guò)15cm。</p><p&g

11、t;　　4.2.2.2、場(chǎng)地四周應(yīng)采取圍鐵絲網(wǎng)和木柵等防止樣品丟失的安全措施。</p><p>　　4.2.3、試驗(yàn)裝置</p><p>　　4.2.3.1、曝曬架應(yīng)符合以下要求：</p><p>　　4.2.3.2、如試驗(yàn)場(chǎng)地離氣象臺(tái)、站較遠(yuǎn)應(yīng)有同步觀測(cè)累積日照時(shí)數(shù)、累積日照輻射量、氣溫（最高、最低、平均）、相對(duì)濕度（最高、最低、平均）、風(fēng)力、降水量的設(shè)備。所用日

12、光總輻射儀，應(yīng)按GB/T 17603要求定期以標(biāo)準(zhǔn)輻射進(jìn)行校準(zhǔn)。</p><p>　　4.2.4、試樣及數(shù)量</p><p>　　4.2.4.1、應(yīng)包括待檢樣、 標(biāo)準(zhǔn)光－生物降解對(duì)照樣及與待檢樣同材質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)非降解對(duì)照樣。</p><p>　　4.2.4.2、標(biāo)準(zhǔn)光－生物降解對(duì)照樣所用的光－生物降解母粒，必須是經(jīng)國(guó)家授權(quán)的質(zhì)檢單位考核符合本標(biāo)準(zhǔn)使用要求的合格產(chǎn)品，并應(yīng)

13、在有效期內(nèi)使用。</p><p>　　4.2.4.3、光－生物降解標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照樣及標(biāo)準(zhǔn)非降解對(duì)照樣應(yīng)符合以下要求：</p><p>　　a）以半年內(nèi)生產(chǎn)，光－生物降解母粒含量為3%的光－生物降解聚丙烯餐飲具為標(biāo)準(zhǔn)降解對(duì)照樣；</p><p>　　b）以半年內(nèi)制作，不含光－生物降解母粒，與檢樣同材質(zhì)塑料餐飲具為標(biāo)準(zhǔn)非降解對(duì)照樣。</p><p>　

14、　4.2.4.4、完整試樣的數(shù)量，應(yīng)能滿(mǎn)足降解性能評(píng)價(jià)指標(biāo)本底值、定期觀測(cè)及結(jié)果觀測(cè)值的測(cè)量和留樣的需要。</p><p>　　4.2.4.5、破壞性測(cè)試所需的試樣數(shù)量，等于該測(cè)試平行樣及留樣復(fù)測(cè)所需的數(shù)量。非破壞檢測(cè)所需的試樣數(shù)量等于該測(cè)試所需平行樣的數(shù)量?？蓞⒄帐剑?）計(jì)算所需完整試樣的最低個(gè)數(shù)。</p><p>　　……………………（1）</p><p>　　

15、式中：N——試驗(yàn)所需樣盒數(shù)，個(gè)；</p><p>　　Q——采樣周期，周；</p><p>　　M——曝露試驗(yàn)期限，周。</p><p>　　4.2.5、試驗(yàn)條件</p><p>　　4.2.5.1、將曝曬架固定在試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)，要經(jīng)得起當(dāng)?shù)刈畲箫L(fēng)力的吹刮。</p><p>　　4.2.5.2、架面的方位朝正南，曝曬角度應(yīng)

16、等于場(chǎng)地的地理緯度。</p><p>　　4.2.5.3、如需設(shè)置多臺(tái)曝曬架，其行距應(yīng)以曝曬架高度的1.5倍為宜。</p><p>　　4.2.5.4、將標(biāo)記好的樣盒扣放在架面上（間距以不互相遮擋陽(yáng)光為宜），用耐老化的細(xì)尼龍絲拉網(wǎng)或用細(xì)尼龍絲網(wǎng)固定。</p><p>　　4.2.6、試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)間和期限</p><p>　　以避開(kāi)雨季的春末夏

17、初開(kāi)始為宜，試驗(yàn)期限應(yīng)能滿(mǎn)足試驗(yàn)?zāi)康募耙?guī)定的累計(jì)日照輻射量需要，在6月~9月常態(tài)奇形怪狀條件下累計(jì)日照輻射量達(dá)到300MJ/m2約需2周~3周，達(dá)到600MJ/m2約需5周~6周。</p><p>　　4.2.7、觀測(cè)指標(biāo)</p><p>　　4.2.7.1、感官指標(biāo)應(yīng)包括以下內(nèi)容：</p><p>　　a）顏色及表面光潔度或透明度的變化；</p>&

18、lt;p>　　b）有無(wú)變形，有無(wú)霉變（按0、I、II、III、IV、V級(jí)判定）；</p><p>　　c）挺括度、韌性變化，有無(wú)龜裂（按0、I、II、III、IV級(jí)判定）、脆化；</p><p>　　d）是否碎化（失去完整盒形，碎塊大于2cm×2cm）、粉化（碎塊小于或等于2cm×2cm）。</p><p>　　4.2.7.2、微觀指標(biāo)可包

19、括以下內(nèi)容：</p><p>　　a）重均、數(shù)均分子量及多分散性系數(shù)；</p><p>　　b）重均<10000的低分子百分含量；</p><p>　　c）紅外光譜分析及羰基指數(shù)；</p><p>　　4.2.7.3、比較試驗(yàn)前后感官指標(biāo)及微觀指標(biāo)的變化，計(jì)算分子量下降率及低分子的百分含量、羰基指數(shù)的動(dòng)態(tài)變化。</p>&

20、lt;p>　　4.2.8、觀測(cè)方法</p><p>　　4.2.8.1、應(yīng)按以下要求對(duì)感官指標(biāo)用目測(cè)和觸摸法檢查，同時(shí)可輔以量具測(cè)量。</p><p>　　4.2.8.2、霉變分級(jí)方法應(yīng)符合5.1.10.5的要求。裂損程度應(yīng)按以下方法分級(jí)：</p><p>　　0級(jí)：無(wú)裂損（或裂紋）；</p><p>　　I級(jí)：裂損（或裂紋）范圍小于或

21、等于外表面積的10%；</p><p>　　II級(jí)：裂損（或裂紋）范圍小于或等于外表面積的30%；</p><p>　　III級(jí)：裂損（或裂紋）范圍小于或等于外表面積的60%；</p><p>　　IV級(jí)：裂損（或裂紋）范圍占外表面積的60%以上。</p><p>　　4.2.8.3、用高溫凝膠色譜法檢測(cè)重均和數(shù)均分子量及低分子百分含量，用傅

22、立葉變換紅外光譜儀對(duì)金剛石池制樣作紅外光譜分析。</p><p>　　4.2.9、試驗(yàn)步驟</p><p>　　4.2.9.1、試驗(yàn)前應(yīng)擬定檢驗(yàn)大綱，內(nèi)容應(yīng)包括：</p><p>　　4.2.9.2、記錄各組試樣的感官指標(biāo)本底描述，測(cè)試微觀指標(biāo)本底值。</p><p>　　4.2.9.3、將待檢試樣及標(biāo)準(zhǔn)降解、標(biāo)準(zhǔn)非降解對(duì)照樣按標(biāo)好的位置分別

23、扣放在架面上。用直徑小于0.2mm的細(xì)尼龍線(xiàn)拉網(wǎng)或用直徑小于0.2mm的細(xì)尼龍絲網(wǎng)將試樣固定，并作本底情況拍照。</p><p>　　4.2.9.4、在試驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)同時(shí)進(jìn)行氣象資料觀測(cè)，逐日記錄日照時(shí)數(shù)、累計(jì)總輻射量、氣溫（最高、最低、平均）、相對(duì)濕度（最高、最低、平均）、風(fēng)力、降水量等。如試驗(yàn)場(chǎng)地在氣象臺(tái)、站附近，也可直接利用氣象臺(tái)、站的觀測(cè)資料。</p><p>　　4.2.9.5、除按規(guī)

24、定周期觀察記錄試驗(yàn)樣品及對(duì)照樣品的感官變化并進(jìn)行拍照外，出現(xiàn)典型變化隨時(shí)拍照，遇有大風(fēng)、雷雨等異常天氣要隨時(shí)觀察和維護(hù)，發(fā)現(xiàn)丟失要及時(shí)補(bǔ)齊。</p><p>　　4.2.9.6、按規(guī)定周期和以下要求采樣、送樣做分子量測(cè)試。</p><p>　　a）分子量檢樣及紅外光譜分析樣按蓋、底中心及兩外邊共四點(diǎn)法采取。分子量取平行樣的均值，紅外光譜分析可取四點(diǎn)的平均值；</p><

25、p>　　b）每份檢樣分別裝紙袋作好標(biāo)記（品名、測(cè)試項(xiàng)目、采樣及送檢日期等）送檢；在裝袋、送檢過(guò)程中要嚴(yán)防人為擠壓、碰撞。</p><p>　　4.2.9.7、按GB 18006.1要求對(duì)經(jīng)表3B條件曝露后的碎片作霉菌浸蝕試驗(yàn)，或采集粉化樣作二氧化碳生成試驗(yàn)。</p><p>　　4.2.10、試驗(yàn)結(jié)果</p><p>　　將被檢樣與標(biāo)準(zhǔn)降解對(duì)照樣、標(biāo)準(zhǔn)非降解對(duì)

26、照樣綜合分析后，對(duì)照GB 18006.1規(guī)定進(jìn)行綜合判定。</p><p>　　4.2.11、試驗(yàn)報(bào)告</p><p>　　試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：</p><p>　　a）試樣品名及生成單位；</p><p>　　b）試驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?lt;/p><p>　　c）試驗(yàn)場(chǎng)地、緯度及曝露期間的氣象資料；</p>

27、<p>　　d）試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)間和期限；</p><p>　　e）觀測(cè)指標(biāo)、周期和方法標(biāo)準(zhǔn)；</p><p>　　f）試驗(yàn)結(jié)果及依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)；</p><p>　　g）報(bào)告單位、報(bào)告人及日期。</p><p>　　4.2.12、技術(shù)要點(diǎn)</p><p>　　a）試驗(yàn)場(chǎng)地必須做好試驗(yàn)期間的日常安全維護(hù)；</p&

28、gt;<p>　　b）試驗(yàn)樣及對(duì)照樣要盡量同期、同批生產(chǎn)；</p><p>　　c）試驗(yàn)期應(yīng)盡量避開(kāi)多雨季節(jié)，日照、氣溫等氣象條件應(yīng)具有本地區(qū)的代表性；</p><p>　　d）感官指標(biāo)宜兩人以上同時(shí)觀察，共同判定；微觀指標(biāo)必須按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法操作，專(zhuān)人、專(zhuān)用儀器檢測(cè)；</p><p>　　e）分子量測(cè)試所用凝膠柱料的分子量下限分離范圍，應(yīng)包括5000及

29、以下；</p><p>　　f）標(biāo)準(zhǔn)降解對(duì)照樣及非降解對(duì)照樣應(yīng)避光存放，半年內(nèi)使用；</p><p>　　g）不得用一般圖釘或金屬絲網(wǎng)固定樣品。</p><p>　　4.3、氙燈光源曝露試驗(yàn)</p><p>　　4.3.1、適用范圍</p><p>　　適用于光－生物降解性塑料制品光降解性能的型式檢驗(yàn)和監(jiān)督檢驗(yàn)。<

30、;/p><p>　　4.3.2、儀器設(shè)備</p><p>　　4.3.2.1、氙燈光源曝露試驗(yàn)箱</p><p>　　應(yīng)滿(mǎn)足以下技術(shù)條件：</p><p>　　a）氙燈濾光罩的濾光范圍應(yīng)能限定濾過(guò)光為290nm~400nm的紫外光范圍；</p><p>　　b）試驗(yàn)箱內(nèi)應(yīng)有固定試樣架的轉(zhuǎn)鼓，并設(shè)有氙燈功率、累計(jì)輻射量、溫度

31、、相對(duì)濕度及計(jì)時(shí)器等自動(dòng)控制、指示設(shè)定裝置；</p><p>　　c）模擬氣象條件可控范圍：相對(duì)濕度：10%~80%，黑板溫度：53℃~130℃；</p><p>　　d）其他應(yīng)符合GB 9344及GB/T 16422.1要求。</p><p>　　4.3.2.2、試樣架、黑板溫度計(jì)及輻射量測(cè)定儀應(yīng)符合GB/T 16422.1要求。</p><p

32、>　　4.3.3、試驗(yàn)條件</p><p>　　試驗(yàn)條件應(yīng)符合以下要求：</p><p>　　a）光源波長(zhǎng)：290nm~400nm；</p><p>　　b）累計(jì)輻射量：最小不小于14000kJ/m2，最大不應(yīng)超過(guò)67200kJ/m2；檢驗(yàn)產(chǎn)品的光降解性能時(shí)，累計(jì)輻射量可統(tǒng)一限定在16800kJ/m2；</p><p>　　c）黑板溫度

33、設(shè)定控制在儀器所允許的最小溫度上（不大于55℃），用自動(dòng)加濕系統(tǒng)將試驗(yàn)箱內(nèi)的相對(duì)濕度控制在（65±5）%（嚴(yán)禁噴水控濕）。</p><p>　　4.3.4、試驗(yàn)樣品</p><p>　　a）試驗(yàn)樣品應(yīng)符合4.2.4要求；</p><p>　　b）將各組試樣的平整部分，各剪制成50mm100mm寬的樣片，用細(xì)尼龍絲固定在試樣架面上，并在架背面編號(hào)標(biāo)注；<

34、;/p><p>　　c）各種試樣片數(shù)應(yīng)不少于3片。</p><p>　　4.3.5、方法步驟</p><p>　　4.3.5.1、將待檢樣片、標(biāo)準(zhǔn)降解對(duì)照樣片及非降解對(duì)照樣片分別按本底樣、試驗(yàn)樣及留樣分別編號(hào)，并將本底樣及留樣避光保存。</p><p>　　4.3.5.2、用細(xì)尼龍絲線(xiàn)將三種試驗(yàn)樣片固定在試樣架上，并將樣片種類(lèi)及編號(hào)記在試樣架的背

35、面。其他本底樣及留樣片避光保存。</p><p>　　4.3.5.3、接通主機(jī)電源，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案設(shè)定主要技術(shù)參數(shù)，打開(kāi)氙燈，直至樣片受到的總輻射量達(dá)到預(yù)定值，曝露試驗(yàn)箱自動(dòng)關(guān)機(jī)。</p><p>　　4.3.5.4、小心取出達(dá)到預(yù)定輻射量值的樣片，分別記錄試驗(yàn)樣片、本底樣片及對(duì)照樣片的感官變化后，按樣片種類(lèi)分別裝入樣片袋內(nèi)送檢分子量及紅外光譜分析。</p><p>

36、;　　4.3.5.5、需檢驗(yàn)試驗(yàn)的生物降解性能時(shí)，輻射量值需使樣片碎化、粉化后再作霉菌浸蝕試驗(yàn)或二氧化碳生成量試驗(yàn)。</p><p>　　4.3.6、結(jié)果分析與判斷</p><p>　　4.3.6.1、與試驗(yàn)前相比，觀察記錄有無(wú)光降解誘導(dǎo)期的感官變化（細(xì)紋理樣變或裂變）。</p><p>　　4.3.6.2、用以下參數(shù)，按照GB 18006.1標(biāo)準(zhǔn)要求，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照

37、樣片變化對(duì)比綜合判斷。</p><p>　　a）重均分子量下降率；</p><p>　　b）紅外光譜圖及羰基指數(shù)。</p><p>　　4.3.6.3、檢驗(yàn)結(jié)果判定，應(yīng)符合GB 18006.1規(guī)定的原則。</p><p>　　4.3.7、試驗(yàn)報(bào)告</p><p><b>　　應(yīng)包括以下內(nèi)容：</b>

38、;</p><p>　　a）試樣品名、生產(chǎn)單位及送檢日期；</p><p>　　b）試驗(yàn)?zāi)康?、要求?lt;/p><p><b>　　c）試樣分類(lèi)；</b></p><p>　　d）試驗(yàn)條件參數(shù)（曝露箱主要技術(shù)參數(shù)，樣片尺寸，累計(jì)曝露總輻射量）；</p><p>　　e）觀察、檢驗(yàn)指標(biāo)及依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)；&l

39、t;/p><p>　　f）試驗(yàn)結(jié)果及對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)值；</p><p>　　g）報(bào)告單位、報(bào)告人及日期。</p><p>　　4.3.8、技術(shù)要點(diǎn)</p><p>　　a）必須在樣盒平整部位剪制樣片；</p><p>　　b）用細(xì)尼龍線(xiàn)固定樣片，以使樣片在試驗(yàn)過(guò)程中不移位為宜；</p><p>　　c）試

40、驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)禁采用定期噴水法控制箱內(nèi)的相對(duì)濕度；</p><p>　　d）取樣動(dòng)作要輕柔，避免人為損壞樣片，送檢微觀指標(biāo)前要及時(shí)記錄感官變化。</p><p>　　5、生物降解性能試驗(yàn)</p><p>　　5.1、霉菌浸蝕試驗(yàn)</p><p><b>　　5.1.1、原理</b></p><p>　

41、　模擬清潔環(huán)境下樣品被微生物分解的情況，將待檢試樣和對(duì)照試樣作為唯一的碳源供微生物生長(zhǎng)利用。</p><p>　　5.1.2、適用范圍</p><p>　　適用于各種材質(zhì)的一次性可降解餐飲具。</p><p>　　5.1.3、試驗(yàn)設(shè)備</p><p>　　a）玻璃器皿：錐形瓶，平皿（9cm），量筒，無(wú)菌試管，無(wú)菌刻度吸管（1.0、5.0、10

42、.0mL）；</p><p>　　b）精密pH 試紙；</p><p>　　c）恒溫恒濕培養(yǎng)箱（28℃~30℃，相對(duì)濕度不低于85%）；</p><p><b>　　d）美術(shù)噴槍?zhuān)?lt;/b></p><p>　　e）電動(dòng)低壓噴泵（流量：3L/min，空氣壓力：0.4kg/cm2）；</p><p>

43、<b>　　f）體視顯微鏡；</b></p><p><b>　　g）血球計(jì)數(shù)板；</b></p><p><b>　　h）酒精燈；</b></p><p><b>　　i）冰箱；</b></p><p><b>　　j）微波爐；</b&g

44、t;</p><p><b>　　k）生物安全柜。</b></p><p>　　5.1.4、試劑和材料</p><p>　　5.1.4.1、凡未說(shuō)明規(guī)格的試劑均為分析純（AR），所用水均為去離子水。</p><p>　　5.1.4.2、將各類(lèi)試樣剪成20mm40mm的試驗(yàn)樣片，經(jīng)滅菌處理后備用。</p>&

45、lt;p>　　5.1.4.3、光－生物降解塑料試樣必須是經(jīng)過(guò)光降解預(yù)處理后達(dá)到碎化的樣片，其非降解對(duì)照樣也必須經(jīng)過(guò)相同光降解預(yù)處理輻射量值的同步曝露。經(jīng)確認(rèn)無(wú)霉變，再用水清洗干凈后制樣。</p><p><b>　　5.1.5、培養(yǎng)基</b></p><p>　　按附錄A要求制備以下培養(yǎng)基：</p><p><b>　　a）查氏

46、培養(yǎng)基；</b></p><p>　　b）馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基；</p><p>　　c）基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)液；</p><p>　　d）基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)基。</p><p>　　5.1.6、試驗(yàn)菌種</p><p>　　a）黑曲霉（AS 3.3928）；</p><p>　　b）土曲霉（AS

47、 3.3935）；</p><p>　　c）球毛殼（AS 3.4254）；</p><p>　　d）綠色木霉（AS 3.4005）；</p><p>　　e）出芽短梗霉（AS 3.3984）；</p><p>　　f）繩狀青霉（AS 3.3875）。</p><p>　　將以上菌種保存在查氏培養(yǎng)基上，4℃存放，6個(gè)月轉(zhuǎn)

48、種一次。使用時(shí)，分別接種于馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基斜面上，28℃~30℃培養(yǎng)7~14天，制備混合孢子懸液。</p><p>　　5.1.7、試驗(yàn)樣及分組</p><p>　　5.1.7.1、試驗(yàn)樣應(yīng)包括光降解處理后的待檢樣及處理前的對(duì)照樣、陽(yáng)性對(duì)照樣片和陰性對(duì)照樣片。各試驗(yàn)樣片按以下要求分成三組：</p><p>　　a）第一組為零對(duì)照組，在實(shí)驗(yàn)室自然放置；</p&g

49、t;<p>　　b）第二組為不染菌組，樣片不接種菌液；</p><p>　　c）第三組為染菌浸蝕試驗(yàn)組。</p><p>　　5.1.7.2、可用濾紙片作各組的生物降解陽(yáng)性對(duì)照樣片，用非降解聚丙烯片作陰性對(duì)照樣。第三組的陽(yáng)性對(duì)照樣片表面應(yīng)有大量真菌生長(zhǎng)，否則試驗(yàn)需重作。</p><p>　　5.1.8、試驗(yàn)樣片預(yù)處理</p><p&

50、gt;　　將制成的各組樣片浸入75%乙醇中，消毒30min取出，室溫下自然干燥過(guò)夜后，移入干燥器中半小時(shí)，稱(chēng)重直至恒重，記錄初始質(zhì)量。</p><p>　　5.1.9、霉菌混合孢子懸液的制備</p><p>　　按附錄B要求制備霉菌混合孢子懸液。</p><p>　　5.1.10、試驗(yàn)步驟</p><p>　　5.1.10.1、倒板：將基礎(chǔ)無(wú)

51、碳源瓊脂培養(yǎng)基加熱熔化后倒進(jìn)平皿，每平皿培養(yǎng)基深度8mm ~ 10mm。</p><p>　　5.1.10.2、接種：在生物安全柜內(nèi)將第三組的各樣片分別置于無(wú)菌平皿內(nèi)，再用美術(shù)噴槍分別將0.2mL霉菌孢子懸液噴于各樣片表面。</p><p>　　5.1.10.3、加試驗(yàn)樣片：將染菌的各樣片靜置1min后以無(wú)菌程序?qū)⑵渲糜陬A(yù)先制備好的平皿培養(yǎng)基表面，同時(shí)作不染菌對(duì)照組和零對(duì)照組。每組三皿，每

52、皿兩片。要避免樣片之間、樣片與平皿之間接觸。</p><p>　　5.1.10.4、培養(yǎng)：將接種好的第三組及不接種的第二組平皿用膠帶封好，置霉菌培養(yǎng)箱中，30℃，相對(duì)濕度大于90%，培養(yǎng)28天。培養(yǎng)箱每周換氣一次。零對(duì)照平皿在實(shí)驗(yàn)室自然放置。定期觀察上述平皿中各樣片表面霉菌生長(zhǎng)情況。取三皿霉菌平均覆蓋面積的百分比按表1要求作分級(jí)記錄。</p><p>　　5.1.10.5、結(jié)果觀察：以肉眼

53、觀察為主，觀察不清時(shí)應(yīng)輔以體現(xiàn)顯微鏡觀察。</p><p>　　5.1.11、結(jié)果判定</p><p>　　對(duì)照GB 18006.1要求，符合該指標(biāo)要求時(shí)為合格，反之為不合格。</p><p>　　5.1.12、計(jì)數(shù)要點(diǎn)</p><p>　　a）不適用于小于20mm40mm的試樣；</p><p>　　b）如培養(yǎng)后的樣

54、片上污物較多，可用脫脂棉沾水輕拭，但不得造成人為失重；</p><p>　　c）配制查氏培養(yǎng)基，每種鹽要依次溶解，磷酸氫二鉀（K2HPO4）要單溶；</p><p>　　d）美術(shù)噴槍嘴孔徑應(yīng)不大于0.5mm，要使噴出的孢子懸液呈細(xì)霧狀，不得出現(xiàn)小水滴；</p><p>　　e）接種噴菌操作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行，要嚴(yán)格放置霉菌孢子彌散，操作人員的安全防護(hù)措施應(yīng)符合GB

55、 2423. 16要求；</p><p>　　f）無(wú)碳源瓊脂培養(yǎng)基所用瓊脂應(yīng)具高純度。</p><p>　　表1、霉菌生長(zhǎng)分級(jí)方法</p><p>　　5.2、纖維素酶浸蝕試驗(yàn)</p><p><b>　　5.2.1、原理</b></p><p>　　纖維素酶從纖維素中分解出還原糖，還原糖又同2－

56、羥基－3,5－二硝基苯甲酸反應(yīng)產(chǎn)生一種黃－橙混合物，用肉眼或分光光度計(jì)法比色測(cè)定。</p><p>　　5.2.2、適用范圍</p><p>　　本法適用于紙制及食用粉制作的一次性可生物降解餐飲具。</p><p>　　5.2.3、試驗(yàn)器材</p><p>　　a）25mL刻度比色管；</p><p><b>

57、;　　b）1cm比色皿；</b></p><p><b>　　c）分光光度計(jì)；</b></p><p>　　d）食品粉碎機(jī)（12000轉(zhuǎn)/min）；</p><p>　　e）100mL、1000mL容量瓶。</p><p><b>　　5.2.4、試劑</b></p>&l

58、t;p>　　5.2.4.1、指示劑溶液：用少許去離子水同1.0g2－羥基－3,5－二硝基苯甲酸拌和，然后邊搖動(dòng)邊滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液20mL，至2－羥基－3,5－二硝基苯甲酸溶解。用50mL去離子水稀釋?zhuān)偌?0g四個(gè)結(jié)晶水的酒石酸鉀，溶解后再用去離子水定容至100mL。在4℃下密封保存。</p><p>　　5.2.4.2、乙酸鹽緩沖液（pH4.6）：取50mL2mol/L乙酸與50mL2mol

59、/L乙酸鈉溶液混合，并用去離子水定容至1000mL。</p><p>　　5.2.4.3、常規(guī)配制2mol/L氫氧化鈉溶液。</p><p>　　5.2.4.4、纖維素酶溶液：將成品纖維素酶用醋酸鹽緩沖液溶解，使酶活力為30U/mL。</p><p>　　5.2.5、試樣預(yù)處理及分組</p><p>　　5.2.5.1、稱(chēng)取5g試樣加300m

60、L醋酸緩沖液，用食品粉碎機(jī)粉碎打漿，取漿液試驗(yàn)。</p><p>　　5.2.5.2、取三只25mL刻度比色管，按以下順序編號(hào)：</p><p>　　a）試樣空白管——1號(hào)；</p><p>　　b）試劑空白管——2號(hào)；</p><p>　　c）浸蝕試驗(yàn)主值管——3號(hào)。</p><p>　　5.2.6、試驗(yàn)步驟<

61、/p><p>　　5.2.6.1、按表2要求，各稱(chēng)取0.5g試樣漿液放入1號(hào)、3號(hào)管內(nèi)；再將1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)管置于40℃恒溫水浴中，各加入1.5mL已預(yù)熱的醋酸鹽緩沖液后，再向2號(hào)及3號(hào)管各加入2.0mL的酶溶液，混合后保溫30min。</p><p>　　表2、試劑用量及步驟一</p><p>　　5.2.6.2、按表3要求向1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)管各加入1.0mL氫氧化鈉

62、溶液和2.0mL指示劑4溶液，使反應(yīng)終止，再向1號(hào)管加入2.0mL酶溶液。</p><p>　　表2、試劑用量及步驟一</p><p>　　5.2.6.3、將上述1、2、3號(hào)管置于沸水浴中5min，流水冷卻后用去離子水定容至20mL。目測(cè)色深是否為黃橙色。</p><p>　　5.2.6.4、目測(cè)不易與空白對(duì)照分辨時(shí)，將試液用濾紙過(guò)濾后用分光光度計(jì)作常規(guī)比色，于49

63、0nm處以空白值3為參比測(cè)定吸光度判斷色深。</p><p><b>　　附錄A</b></p><p><b>　?。?biāo)準(zhǔn)的附錄）</b></p><p><b>　　培養(yǎng)基的制備方法</b></p><p><b>　　A1、查氏培養(yǎng)基</b><

64、/p><p><b>　　A1.1、成分</b></p><p>　　a）NaNO31.5g</p><p>　　b）KCl0.25g</p><p>　　c）MgSO47H2O0.25g</p><p>　　d）K2HPO40.5g</p><

65、p>　　e）FeSO40.005g</p><p>　　f）蔗糖15g</p><p>　　g）瓊脂粉8~10g</p><p>　　h）去離子水500mL</p><p><b>　　A1.2、制法</b></p><p>　　每種鹽依次和瓊脂粉加熱溶

66、解于1000mL三角瓶?jī)?nèi)（磷酸氫二鉀單溶后再加入溶液中），調(diào)pH值至6.0，分裝試管，121℃滅菌20min，制成斜面?zhèn)溆谩?lt;/p><p>　　A2、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基</p><p>　　取新鮮馬鈴薯去皮洗凈切片，稱(chēng)取200g放入盛有1000mL去離子水的大燒杯中，煮沸30min后用紗布濾去渣滓，將濾液移入500mL錐形瓶中，加入2%蔗糖、2%瓊脂，分裝試管，121℃滅菌20min，制成

67、斜面?zhèn)溆谩?lt;/p><p>　　A3、基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)液</p><p><b>　　A3.1、成分</b></p><p>　　a）K2HPO40.7g</p><p>　　b）KH2PO40.7g</p><p>　　c）MgSO47H2O0.7g</p>

68、<p>　　d）NH4NO31.0g</p><p>　　e）NaCl0.005g</p><p>　　f）FeSO4·7H2O0.002g</p><p>　　g）ZnSO4·7H2O0.002g</p><p>　　h）MnSO4·H2O0.001g<

69、;/p><p>　　i）去離子水1000mL</p><p><b>　　A3.2、制法</b></p><p>　　將上述成分依次溶解于裝有1000mL去離子水的三角瓶中，調(diào)pH至6.0，將培養(yǎng)液在121℃高溫滅菌20min。</p><p>　　A4、基礎(chǔ)無(wú)碳源瓊脂培養(yǎng)基</p><p>

70、　　在基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)液中按2%加入瓊脂粉，加熱溶解，121℃高溫滅菌。試驗(yàn)前倒10mm深的平板備用。</p><p><b>　　附錄B</b></p><p><b>　?。?biāo)準(zhǔn)的附錄）</b></p><p>　　混合霉菌孢子懸液的制備方法</p><p>　　B1、用無(wú)菌用無(wú)菌吸管吸取10mL

71、吸取含濕潤(rùn)劑（0.05%吐溫80）的無(wú)菌水10mL，輕輕加至培養(yǎng)7~14天的成熟菌管中。</p><p>　　B2、用接種環(huán)輕輕刮出孢子，移入裝有30mL無(wú)菌水的三角瓶中（內(nèi)含玻璃珠），劇烈振蕩，使孢子團(tuán)分散。</p><p>　　B3、用雙層紗布過(guò)濾除去菌絲碎片，將濾液移至離心管中，以3000轉(zhuǎn)/min離心10min，去掉上清液，用50mL滅菌去離子水使沉淀再懸浮，再離心，如此清洗孢子三

72、次。</p><p>　　B4、用50mL基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)液稀釋最終沉淀物。用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)上述懸液，使孢子數(shù)為107個(gè)/mL。如低于上述值，向孢子液中再移入孢子，反之應(yīng)將孢子液稀釋。</p><p>　　B5、每種菌都單獨(dú)制成孢子懸液。將五種制備好的單一孢子懸液按等體積混合，即為混合孢子懸液，并應(yīng)在當(dāng)天使用！</p><p>　　B6、操作全過(guò)程均應(yīng)由受過(guò)專(zhuān)門(mén)訓(xùn)練的

73、微生物檢驗(yàn)人員在生物安全柜中進(jìn)行。</p><p><b>　　附錄C</b></p><p><b>　　（提示的附錄）</b></p><p>　　光－生物降解性材料在規(guī)定菌種和周期內(nèi)需氧生物降解二氧化碳生成試驗(yàn)方法</p><p><b>　　C1、原理</b></

74、p><p>　　可生物降解材料在降解中，其碳元素被氧化成二氧化碳，可用氫氧化鋇溶液吸收形成碳酸鋇沉淀，剩余的氫氧化鋇溶液可用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)所消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，計(jì)算二氧化碳生成量。</p><p><b>　　C2、適用范圍</b></p><p>　　適用于經(jīng)光降解達(dá)碎化、粉化的小于20mm40mm的光－生物降解聚丙烯樣渣。</p&

75、gt;<p><b>　　C3、儀器設(shè)備</b></p><p>　　a）500mL錐形瓶；</p><p>　　b）橡膠塞及導(dǎo)氣軟管（不滲透二氧化碳）；</p><p>　　c）100mL酸式滴定管；</p><p>　　d）氣泵（1L/min）；</p><p>　　e）空氣瓶及

76、流量控制閥；</p><p><b>　　f）振蕩培養(yǎng)箱；</b></p><p>　　g）測(cè)定氧和二氧化碳?xì)怏w含量的設(shè)備（可選氣相色譜儀）。</p><p><b>　　C4、試劑</b></p><p>　　a）羧甲基纖維素鈉；</p><p>　　b）c（HCl）=0.

77、05mol/L鹽酸溶液；</p><p>　　c）0.0125mol/L的氫氧化鋇溶液：標(biāo)定后用濾紙過(guò)濾后密封保存。</p><p><b>　　C5、培養(yǎng)液</b></p><p>　　按附錄A要求配制基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)液。</p><p><b>　　C6、試驗(yàn)菌種</b></p>&

78、lt;p>　　試驗(yàn)菌種同5.1.6，并按附錄B要求制備成高活力霉菌孢子混懸液。</p><p>　　C7、試樣制備及預(yù)處理</p><p>　　C7.1、應(yīng)包括以下試樣：</p><p>　　a）光降解處理后待檢樣；</p><p>　　b）陰性對(duì)照樣（非降解聚丙烯試樣）；</p><p>　　c）陽(yáng)性對(duì)照樣（羧

79、甲基纖維素鈉）。</p><p>　　C7.2、將非降解對(duì)照樣剪碎，將光降解處理后待檢樣研碎后備用。</p><p><b>　　C8、試驗(yàn)分組</b></p><p>　　按以下要求分組，每組至少設(shè)三個(gè)平行樣。</p><p>　　a）第一組：陽(yáng)性對(duì)照組；</p><p>　　b）第二組：陰性對(duì)

80、照組；</p><p>　　c）第三組：空白對(duì)照組（基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)液）；</p><p>　　d）第四組：光降解處理后被檢試驗(yàn)組。</p><p><b>　　C9、操作程序</b></p><p>　　C9.1、取12個(gè)500mL錐形瓶分成四組，每個(gè)錐形瓶各加入250mL~300mL基礎(chǔ)無(wú)碳源培養(yǎng)液。依次向第一組各加入

81、2g羧甲基纖維素鈉，向第二組各加入30g聚丙烯碎渣，向第四組各加入30g光降解處理后被檢樣碎渣。</p><p>　　C9.2、向各組錐形瓶分別接種新制成的高活力霉菌孢子混懸液0.1mL。</p><p>　　C9.3、在每個(gè)錐形瓶口上用橡膠塞導(dǎo)氣管依次連接三個(gè)裝有0.0125mol/L氫氧化鋇溶液300mL的二氧化碳吸收瓶。</p><p>　　C9.4、將上述錐

82、形瓶置于振蕩培養(yǎng)箱中于30℃培養(yǎng)。</p><p>　　C9.5、用氣泵以50~100mL/min的流速向錐形瓶?jī)?nèi)吹入無(wú)二氧化碳的空氣，使每個(gè)錐形瓶中產(chǎn)生的二氧化碳隨時(shí)與氫氧化鋇\吸收液反應(yīng)，并生成碳酸鋇沉淀。</p><p>　　C9.6、每天檢測(cè)進(jìn)氣和排出氣的空氣流量，以保證試驗(yàn)系統(tǒng)不漏氣。每天至少測(cè)定兩次排氣中的氧含量，使其不低于6%。</p><p>　　C

83、9.7、培養(yǎng)7天后再以酚酞作指示劑，用0.05mol/L鹽酸分別對(duì)各吸收瓶?jī)?nèi)剩余氫氧化鋇進(jìn)行滴定，并分別記錄消耗鹽酸的毫升數(shù)，并換算成摩爾數(shù)。其反應(yīng)如下：</p><p>　　a）Ba(OH)2+CO2=BaCO3+H2O………………（C1）</p><p>　　b）Ba(OH)2+2HCl=BaCl2+2H2O………………（C2）</p><p><b>

84、;　　C9.8、計(jì)算</b></p><p>　　a）按試驗(yàn)材料的化學(xué)成分計(jì)算出各材料的初始總碳含量。</p><p>　　b）按下式計(jì)算各瓶的二氧化碳釋放量。</p><p>　　………………（C3）</p><p>　　………………（C4）</p><p>　　………………（C5）</p>

85、<p>　　式中：Q——二氧化碳釋放量，mol；</p><p>　　B——?dú)溲趸^起始量，mol；</p><p>　　V——滴定剩余氫氧化鋇所消耗鹽酸的毫升數(shù)，mL；</p><p>　　H——滴定剩余氫氧化鋇所消耗鹽酸的摩爾數(shù)，mol。</p><p>　　c）如用氣相色譜儀，應(yīng)根據(jù)流率和氣體成分，換算成標(biāo)準(zhǔn)條件（溫度和壓力

86、）后，再確定二氧化碳累計(jì)生成量。</p><p>　　d）用光降解處理后被檢樣產(chǎn)生的平均二氧化碳累計(jì)量及陰性對(duì)照的平均二氧化碳累計(jì)量分別減去空白對(duì)照的平均二氧化碳偏差量為被檢樣及陰性對(duì)照樣各自的二氧化碳純生成量。</p><p>　　e）對(duì)被檢樣二氧化碳純生成量和陰性對(duì)照進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)測(cè)驗(yàn)，如二者間有顯著差異，則被檢樣有生物降解性。</p><p><b>　

87、　C10、計(jì)數(shù)要點(diǎn)</b></p><p>　　a）配制試劑用水必須是新煮沸的去離子水。吹入的空氣必須是無(wú)二氧化碳的空氣；</p><p>　　b）培養(yǎng)時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，否則吸收瓶中的氫氧化鋇全部被二氧化碳消耗掉使溶液呈酸性，而無(wú)法再用鹽酸溶液滴定；</p><p>　　c）吸取剩余氫氧化鋇上清液時(shí)，且勿將溶液搞混，否則影響滴定結(jié)果的準(zhǔn)確性；</p&g

88、t;<p>　　d）所用試劑不得與空氣接觸，容器需經(jīng)氮?dú)庵脫Q空氣后方可開(kāi)始試驗(yàn)。</p><p><b>　　附錄D</b></p><p><b>　?。ㄌ崾镜母戒洠?lt;/b></p><p>　　生物降解性材料可堆肥性試驗(yàn)方法</p><p><b>　　D1、原理<

89、/b></p><p>　　生物降解性材料含有微生物生長(zhǎng)利用的碳源，在接種活性有機(jī)肥后，在嗜常溫和嗜高溫微生物作用下，其碳元素轉(zhuǎn)化為氣態(tài)碳，可用氫氧化鋇溶液吸收形成碳酸鋇沉淀，剩余的氫氧化鋇溶液可用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)所消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，計(jì)算出二氧化碳生成量及氣態(tài)碳生成量。</p><p><b>　　D2、范圍</b></p><p&g

90、t;　　本法規(guī)定了以樣品碳元素轉(zhuǎn)變?yōu)闅鈶B(tài)碳的百分率為生物降解率，并作為生物降解材料降解性能和可堆肥性的評(píng)價(jià)指標(biāo)。</p><p>　　本法適用于生物降解性材料及其降解程度和可堆肥性的最終判定。</p><p><b>　　D3、設(shè)備</b></p><p>　　D3.1、堆肥裝置（見(jiàn)圖1）：</p><p>　　D3.1

91、.1、12個(gè)2L~5L的廣口瓶作為堆肥容器，分成三組，每組四瓶，分別作為樣品材料、空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照瓶。</p><p>　　D3.1.2、可使堆肥容器溫度維持在35℃、50℃和58℃（±2℃）的水浴或其他溫控裝置。</p><p>　　D3.1.3、可向每個(gè)堆肥容器以準(zhǔn)確通風(fēng)量輸送無(wú)二氧化碳的飽和水空氣壓縮空氣系統(tǒng)。</p><p>　　D3.

92、1.4、測(cè)定堆肥容器排出氣體中氧、二氧化碳含量的設(shè)備，如特定探測(cè)儀或氣相色譜儀。</p><p>　　D3.2、用于每個(gè)堆肥容器的二氧化碳吸收裝置：</p><p>　　D3.2.1、5000mL的瓶子至少3只，每瓶?jī)?nèi)裝氫氧化鋇[Ba(OH)2]二氧化碳吸收液，并安有通氣裝置。</p><p>　　D3.2.2、不滲漏二氧化碳的彈性軟管。</p>&l

93、t;p>　　D3.2.3、裝有采氣部件的塞子。</p><p>　　D3.2.4、稱(chēng)量試樣用的分析天平（±0.1mg）。</p><p>　　D3.2.5、100mL滴定管。</p><p>　　D3.2.6、pH計(jì)。</p><p>　　D3.2.7、測(cè)定干固體（105℃）、揮發(fā)性固體、揮發(fā)性脂肪酸的設(shè)備和分析儀器，凱氏測(cè)定

94、總氮和測(cè)定元素碳含量的裝置或分析儀器。</p><p>　　D3.3、可選設(shè)備：</p><p><b>　　D4、試劑和材料</b></p><p>　　D4.1、0.005mol/L的氫氧化鋇溶液：每升蒸餾水溶解4.0g的氫氧化鋇[Ba(OH)2]，標(biāo)定并用濾紙過(guò)濾后密封保存，以防吸收空氣中的二氧化碳。</p><p&g

95、t;　　D4.2、0.05mol/L鹽酸。</p><p>　　D4.3、陽(yáng)性對(duì)照用分析純纖維素。選用色譜分析法時(shí)，其粒徑要小于20m。</p><p>　　D4.4、陰性對(duì)照用聚丙烯，其形狀必須與試樣相同。</p><p>　　D5、堆肥接種物及堆肥條件</p><p>　　D5.1、接種物應(yīng)符合以下要求</p><p&

96、gt;　　a）取自城市固體垃圾有機(jī)成分，并經(jīng)2~4個(gè)月充分曝氣的混合肥；</p><p>　　b）不含較大雜志（玻璃、石頭、金屬等），并經(jīng)過(guò)孔徑小于10mm的篩子篩分；</p><p>　　c）其活性應(yīng)在試驗(yàn)前10天中每克揮發(fā)性固體可產(chǎn)生50mg~150mg二氧化碳；</p><p>　　d）灰分量小于70%，pH值為7~8。</p><p>

97、;　　D5.2、接種物與試樣混合物的C/N比應(yīng)在10~40之間，堆肥容器中的氧含量應(yīng)保持不少于6%，且不能有游離水存在，原料不得結(jié)團(tuán)。</p><p><b>　　D6、操作步驟</b></p><p>　　D6.1、樣品的準(zhǔn)備</p><p>　　D6.1.1、按國(guó)家現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)方法，測(cè)定接種物的揮發(fā)性固體、干固體及氮含量。</p>

98、<p>　　D6.1.2、按國(guó)家現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)方法，測(cè)定所有試樣的揮發(fā)性固體、干固體及碳含量。</p><p>　　D6.1.3、稱(chēng)取約600g的干燥固體接種物，與大約100g的干燥固體試樣混合，再用蒸餾水將容器內(nèi)混合物的干固體含量調(diào)整到約為50%。如C/N比超過(guò)40，可添加氯化氨。堆肥處理前要立即稱(chēng)量容器同所有內(nèi)容物的總重。</p><p>　　D6.1.4、用大約600g干燥固體

99、接種物作空白對(duì)照，用分析純纖維素作陽(yáng)性對(duì)照，用聚丙烯作陰性對(duì)照</p><p><b>　　D6.2、開(kāi)始步驟</b></p><p>　　先向堆肥容器輸送無(wú)二氧化碳空氣，其流量要保證排出氣體的氧含量不低于6%。第一周每天至少測(cè)定2次氧含量，按需要調(diào)整空氣流量。</p><p><b>　　D6.3、操作步驟</b><

100、;/p><p>　　D6.3.1、先將堆肥容器在35℃（±2℃）培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)一天，接著升高溫度至58℃（±2℃）維持4天，再將溫度降至50℃（±2℃）作為最佳堆肥條件保持28天。然后將溫度降至35℃（±2℃），共需暗培養(yǎng)45天。如二氧化碳仍明顯產(chǎn)生，可延長(zhǎng)一周，直到剩余接種物不明顯產(chǎn)生二氧化碳為止。</p><p>　　D6.3.2、溫度降至35℃第一

101、周后，至少每隔6h測(cè)定一次排氣中的二氧化碳和氧含量。</p><p>　　D6.3.3、試驗(yàn)期內(nèi)每天要檢測(cè)堆肥容器進(jìn)、排氣的空氣流量，防止堆肥系統(tǒng)漏氣，要及時(shí)調(diào)整氣流使二氧化碳體積濃度至少維持在2%。</p><p>　　D6.3.4、每周要將堆肥容器振蕩一次，以防止堆肥中出現(xiàn)大量的空隙，保證試樣受到均一的侵蝕，并使堆肥濕度分布均勻。如濕度過(guò)高，例如容器內(nèi)出現(xiàn)游離水或因高濕而結(jié)塊，可通過(guò)注

102、入干燥空氣或通過(guò)進(jìn)氣排水裝置將水除去；如堆肥條件過(guò)于干燥，要及時(shí)增加濕度。在整個(gè)試驗(yàn)期間，要反復(fù)調(diào)節(jié)以保證合適的堆肥條件。在完成調(diào)節(jié)后的72h內(nèi)必須嚴(yán)密監(jiān)測(cè)二氧化碳和氧的濃度，每天至少測(cè)定兩次，間隔要在6h以上。</p><p><b>　　D6.4、試驗(yàn)結(jié)束</b></p><p>　　D6.4.1、培養(yǎng)結(jié)束后，稱(chēng)量容器同內(nèi)容物的重量，并測(cè)定堆肥料中剩余的干固體含量

103、。</p><p>　　D6.4.2、測(cè)定堆肥料的pH值（要用蒸餾水按5：1重量比將樣品稀釋?zhuān)檬謸u勻立即檢測(cè)）。</p><p>　　D6.4.3、如pH小于7，表示堆肥容器內(nèi)容物已酸化，立即測(cè)定干料的揮發(fā)性脂肪酸。如每公斤堆肥容器中干料的揮發(fā)性脂肪酸含量超過(guò)2g，則本次試驗(yàn)無(wú)效。</p><p><b>　　D7、計(jì)算</b></p&

104、gt;<p>　　D7.1、如果試驗(yàn)材料的化學(xué)成分已知，也可用元素分析或通過(guò)計(jì)算確定總碳量。二氧化碳理論生成量可用式（D1）和（D2）計(jì)算：</p><p>　　……………………（D1）</p><p>　　式中：——裝入堆肥容器中的原始碳量，g；</p><p>　　——每100g試驗(yàn)材料的含碳量，g；</p><p>　　—

105、—裝入堆肥容器中的試驗(yàn)材料量。</p><p><b>　　C+O2CO2</b></p><p>　　12g碳生成44gCO2</p><p>　　……………………（D2）</p><p>　　式中：——二氧化碳理論生成量，g；</p><p>　　——裝入堆肥容器中的原始碳量，g。</p

106、><p>　　D7.2、測(cè)定試驗(yàn)物質(zhì)累計(jì)二氧化碳生成量（g）</p><p>　　D7.2.1、用0.05mol/L鹽酸分別對(duì)試驗(yàn)物質(zhì)和空白對(duì)照的Ba(OH)2吸收液進(jìn)行滴定，用二者滴定的不同毫升數(shù)確定CO2生成量。</p><p>　　D7.2.1.1、CO2浸入吸收瓶后的反應(yīng)詳見(jiàn)附錄C。</p><p>　　D7.2.1.2、BaCO3不溶于

107、水而沉淀。用酚酞作指示劑，以鹽酸滴定終點(diǎn)來(lái)確定吸收液中的Ba(OH)2殘留量（反應(yīng)式見(jiàn)附錄C）。</p><p>　　D7.2.1.3、按式（D3）計(jì)算出生成CO2的摩爾數(shù)。</p><p>　　……………………（D3）</p><p>　　式中：——生成CO2的摩爾數(shù)；</p><p>　　——Ba(OH)2初始摩爾數(shù)；</p>

108、<p><b>　　——鹽酸摩爾數(shù)。</b></p><p>　　D7.2.2、若選用氣相色譜 法，則根據(jù)氣流速率和氣體組成測(cè)定CO2累計(jì)生成量，再換算成ATP（標(biāo)準(zhǔn)溫度和壓力）條件下的CO2 量（g）。</p><p>　　D7.2.3、計(jì)算每個(gè)堆肥器產(chǎn)生氣態(tài)碳的累計(jì)量。</p><p>　　D7.2.4、用堆肥試驗(yàn)材料三組平行

109、樣產(chǎn)生的氣態(tài) 碳平均量，減去只含接種物的三組平行空白對(duì)照產(chǎn)生氣態(tài)碳的平均量，求出試驗(yàn)材料的氣態(tài)碳凈生成平均量。</p><p>　　D7.3、用試驗(yàn)材料氣態(tài)碳凈生成量除以試驗(yàn)材料初始碳元素含量，再乘 100得出試驗(yàn)材料的生物降解百分率，見(jiàn)式（D4）。</p><p>　　……………………（D4）</p><p>　　式中 ：——生物降解率，%；</p>

110、<p>　　——試驗(yàn)材料氣態(tài)碳平均生成量，g；</p><p>　　——空白對(duì)照氣態(tài)碳平均生成量，g；</p><p>　　——試驗(yàn)材料初始碳元素含量，g。</p><p>　　D7.4、按式（D5）計(jì)算生物降解百分率的標(biāo)準(zhǔn)誤：</p><p>　　……………………（D5）</p><p>　　式中：——生

111、物降解率標(biāo)準(zhǔn)誤；</p><p>　　——試驗(yàn)材料氣態(tài)碳平均生成量標(biāo)準(zhǔn)差；</p><p>　　——空白對(duì)照氣態(tài)碳平均生成量標(biāo)準(zhǔn)差；</p><p>　　——試驗(yàn)材料平行樣數(shù)；</p><p>　　——空白對(duì)照平行樣數(shù)。</p><p>　　D7.5、按式（D6）計(jì)算95%可信限：</p><p&g

112、t;　　95%可信限=……………………（D6）</p><p>　　式中：t——自由度n 95%概率分布值；</p><p>　　R——生物降解率，%；</p><p><b>　　——標(biāo)準(zhǔn)誤。</b></p><p>　　注：本式中自由度，為試驗(yàn)材料平行樣數(shù)，為空白對(duì)照平行樣數(shù)。</p><p>

113、;<b>　　D8、結(jié)果判定</b></p><p>　　D8.1、試驗(yàn)結(jié)果與陰性對(duì)照有顯著差異時(shí)為生物降解陽(yáng)性，反之為陰性。</p><p>　　D8.2、生物降解率低于60%，為堆肥試驗(yàn)陰性；生物降解率等于或大于60%，為堆肥試驗(yàn)陽(yáng)性。</p><p>　　D8.3、堆肥試驗(yàn)陽(yáng)性者，在實(shí)施堆肥前還應(yīng)進(jìn)行其降解殘留物的植物萌芽及生態(tài)毒性試驗(yàn)檢

114、定。</p><p>　　D8.4、如果出現(xiàn)抑菌現(xiàn)象應(yīng)進(jìn)一步檢查試驗(yàn)材料的毒性數(shù)據(jù)。若陽(yáng)性對(duì)照也未充分降解 （纖維素45天內(nèi)的生物降解率最少應(yīng)為70%），則試驗(yàn)無(wú)效，必須用新的接種物重作。</p><p><b>　　D9、報(bào)告</b></p><p>　　D9.1、報(bào)告以下數(shù)據(jù)和資料</p><p>　　D9.1.1、

115、有關(guān)接種物的資料，包括接種物來(lái)源、干燥固體的百分比、揮發(fā)性固體的百分比、克氏總氮量、接種物的活性（試驗(yàn)頭10天的二氧化碳生成量）以及收集、存貯、手工整理的數(shù)據(jù)。</p><p>　　D9.1.2、試驗(yàn)材料的碳含量，陽(yáng)性和陰性對(duì)照以及二氧化碳最大生成 的理論計(jì)算值。</p><p>　　D9.1.3、試驗(yàn)前及試驗(yàn)結(jié)束，堆肥容器同內(nèi)容物的重量。</p><p>　　D9

116、.1.4、用圖表顯示整個(gè)試驗(yàn)期的累計(jì)二氧化碳測(cè)定 值及氧流量，報(bào)告本試驗(yàn)方法所用的儀器設(shè)備。</p><p>　　D9.1.5、試驗(yàn)材料及對(duì)照物的需氧生物降解 率，百分率標(biāo)準(zhǔn)差和95%可信限范圍。</p><p>　　D9.1.6、與陽(yáng)性對(duì)照生物降解率的百分比（纖維素=100%）。</p><p>　　D9.1.7、試驗(yàn)的溫度范圍。</p><p