Bacillus subtilis SQR9的黃瓜促生和枯萎病生防效果及其作用機(jī)制研究.pdf

1、黃瓜是世界重要蔬菜之一,具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,但是由于長期連作,黃瓜產(chǎn)生嚴(yán)重的連作障礙問題。特別是黃瓜枯萎病,已嚴(yán)重威脅到黃瓜生產(chǎn).然而,對(duì)黃瓜枯萎病的防治目前尚無理想的化學(xué)藥劑和抗病品種,一些栽培管理措施也只能起到局部的控制作用,因此加強(qiáng)該病的防治迫在眉睫,生物防治作為綜合防治黃瓜枯萎病的措施之一,對(duì)生態(tài)平衡和可持續(xù)農(nóng)業(yè)的發(fā)展具有特別重要的意義.
　　 基于本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)篩選出的2株高效拮抗菌株,哈茨木霉T37和枯草芽孢桿菌SQR

2、9,將其接種于合適的有機(jī)肥(organic fertilizer,OF)載體中進(jìn)行二次固體發(fā)酵,獲得新型微生物有機(jī)肥(bio-organic ferrtilizef,BIO).本試驗(yàn)研究結(jié)果如下:
　　 (1)盆栽試驗(yàn)研究了以這兩株拮抗茵制成的三種BIO對(duì)黃瓜生長以及對(duì)枯萎病防治的影響.結(jié)果表明:施用BIO處理均不同程度地降低了黃瓜枯萎病的發(fā)病率,施用BIOⅢ后發(fā)病率降至13.73％,而對(duì)照發(fā)病率為100%。BIOⅠ、BIOⅡ和

3、BIOⅢ處理均能顯著提高黃瓜生物量,分別是對(duì)照的2.55、2.46和2.58倍.熒光定量PCR(real-time PCR)測定黃瓜根際尖孢鐮刀菌數(shù)量的結(jié)果表明,施用BIOⅡ和BIOⅢ能夠?qū)⒉≡鷶?shù)量控制在103 copies g-1土,而對(duì)照土壤高達(dá)108 copies g-1土.定殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示菌株SQR9和T37均能在黃瓜根系表面很好定殖,搶占生態(tài)位點(diǎn),保證其拮抗功能的實(shí)現(xiàn).
　　 (2)通過促生盆栽試驗(yàn),研究了SQR9

4、對(duì)植株生長情況的影響.試驗(yàn)結(jié)果表明:加入SQR9菌液能夠有效地促進(jìn)黃瓜生長;處理1、2、3的地上部株高分別為CK的1.46、2.21和2.30倍,根系長度分別比CK增加了26%、54%、77%.
　　 (3)菌株sQR9發(fā)酵液經(jīng)過酸沉淀、甲醇浸提等步驟得到脂肽化合物的粗提物,通過平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)粗提物對(duì)病原茵茵落生長的抑制率為68.2%;用高效液相色譜(HPLC)從粗提物中分離出五種脂肽類物質(zhì),發(fā)現(xiàn)這五種物質(zhì)都有拮抗活性;利用液

5、質(zhì)聯(lián)用儀測定菌株SQR9部分抗茵物質(zhì)的分子量,推測SOR9的抗茵物質(zhì)中含有Fengycin和BadllomycJin D這兩種脂肽類物質(zhì);通過PCR檢測發(fā)現(xiàn)SQR9基因組中含有Fengycin和Bacillomycin D這兩種物質(zhì)的部分基因片段.用高效液相色譜從SQR9發(fā)酵液中分離到植物激素IAA和赤霉素,其中IAA的產(chǎn)量為52.03 mg/L;通過分隔平板培養(yǎng)法,發(fā)現(xiàn)SQR9能產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì),促進(jìn)擬南芥生長.
　　 綜上所述