日本鰻鱺人工繁殖技術(shù)優(yōu)化及雌鰻卵巢發(fā)育相關(guān)生理生化因子的變化.pdf

1、日本鰻鱺(Anguilla japonica)是亞洲最重要的洄游性魚(yú)類之一,也是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類。由于鰻鱺生活史的特殊性,鰻鱺養(yǎng)殖所需的苗種全部依靠天然捕撈來(lái)供給,其人工繁殖成為世界難題。近年來(lái),掠奪式的捕撈方式導(dǎo)致了自然界鰻苗資源的嚴(yán)重衰退,因此開(kāi)展日本鰻鱺人工繁殖相關(guān)的研究顯得越來(lái)越有必要。
　　本文就目前國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀,結(jié)合近來(lái)年最新生活史調(diào)查,對(duì)日本鰻鱺的人工催熟催產(chǎn)和人工育苗技術(shù)的最新進(jìn)展進(jìn)行了綜述,并探討了日本鰻鱺人

2、工催熟和催產(chǎn)中的一些關(guān)鍵點(diǎn)。通過(guò)設(shè)置不同激素類別,不同注射劑量,不同處理針距條件,在人工催熟日本鰻鱺過(guò)程中,分別在室內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)及基地水泥池養(yǎng)殖環(huán)境下,比較分析了各種條件下的催熟和催產(chǎn)應(yīng)用。觀察催熟過(guò)程中雌鰻外形特點(diǎn)以及解剖后卵巢形態(tài)的變化,通過(guò)卵巢組織切片的方法,對(duì)日本鰻鱺卵巢發(fā)育成熟的全過(guò)程進(jìn)行了組織學(xué)研究。用臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)方法,測(cè)定分析了雌性日本鰻鱺卵巢發(fā)育過(guò)程中,血清總蛋白(TP)、血清甘油三脂(TG)、血清膽固醇(TC)、血糖(G

3、lu)、血鈣(Ca)和血清無(wú)機(jī)磷(P)6項(xiàng)生化指標(biāo)的水平及變化趨勢(shì),并與對(duì)應(yīng)的不同卵巢發(fā)育階段的性腺成熟系數(shù)(GSI)進(jìn)行比較分析。測(cè)定了不同時(shí)期鰻鱺卵巢中氨基酸的組成,比較分析了不同卵巢發(fā)育階段的氨基酸含量及其變化。并對(duì)日本鰻鱺胚胎和仔魚(yú)的發(fā)育以及形態(tài)進(jìn)行了觀察及描述。
　　研究結(jié)果如下:(1)分別注射激素a(0.4mgPT+0.35mgDOM+150IUHCG)/500g BW和激素b(0.75mgPT+150IUHCG)/5

4、00g BW,在56-80d時(shí)成熟,解剖發(fā)現(xiàn)卵巢發(fā)育均達(dá)第Ⅴ期。恒量注射組和梯度注射組在發(fā)育過(guò)程中,GSI表現(xiàn)出差異性;但總劑量相同時(shí),在同等時(shí)間下能達(dá)到同步成熟:在70天時(shí),GSI分別為25.0％和24.8%,沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。每周注射組比每?jī)芍茏⑸浣M成熟更早,可以通過(guò)調(diào)節(jié)針距控制最后催產(chǎn)時(shí)間。在100-130d期間,雌鰻暫停注射,利用雌體自身內(nèi)分泌機(jī)制,能達(dá)到水合作用。相同條件下,雄鰻每周注射激素b,于雌鰻注射后4針時(shí)

5、開(kāi)始,經(jīng)80-100天后能得到大量精子,能和雌鰻達(dá)到同步成熟。(2)84d的注射過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)組的性腺逐漸成熟,GSI顯著升高,第12針時(shí)達(dá)到(46.32±1.75)%;而對(duì)照組性腺GSI一直在(2.42±0.18)%。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血清TP水平相對(duì)平穩(wěn),各組變化無(wú)顯著差異(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血脂在56d前差異顯著(P<0.05):實(shí)驗(yàn)組血清TG,TC一直維持較高水平,平均分別為(12.67±2.83)mmol/L和(15.5

6、4±3.01)mmol/L;對(duì)照組TG和TC一直下降且水平較低,平均分別為(6.33±4.14)mmol/L和(8.53±3.30) mmol/L。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血清 Glu均在實(shí)驗(yàn)初的較低水平基礎(chǔ)上持續(xù)上升。相關(guān)分析表明,實(shí)驗(yàn)組血清TG與GSI水平極顯著負(fù)相關(guān)(r=﹣0.732,n=6,P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組血清Ca與GSI(r=0.961,n=6,P<0.01),血清P與GSI(r=0.775,n=6,P<0.01)都呈現(xiàn)出極顯著的

7、相關(guān)性:血清Ca和P在28d后持續(xù)上升，GSI逐漸增大。對(duì)照組中的血清Ca和P水平則一直維持在一個(gè)較低的水平。(3)卵巢中?；撬嶙兓町愋燥@著(P<0.05):實(shí)驗(yàn)組?；撬釢舛炔粩嘞陆?由Ⅰ、Ⅱ期0.217±0.040mg/100g到Ⅳ、Ⅴ期的0.102±0.045mg/100g;對(duì)照組含量基本維持均衡0.204±0.057mg/100g。實(shí)驗(yàn)組總氨基酸的含量在Ⅲ期開(kāi)始上升,在Ⅳ、Ⅴ期時(shí)維持同等水平;總必需氨基酸含量的變化情況與總氨基酸

8、含量保持一致,其比例平均為(48.633±0.913)%。Ⅰ、Ⅱ期卵巢中氨基酸含量高依次為Glu>Asp>Lys>Leu>Arg>Gly>Pro;Ⅲ期為Glu>Asp>Leu>Lys>Pro>Arg>Gly;Ⅳ、Ⅴ期卵巢中氨基酸中含量高依次為Glu>Asp>Leu>Lys>Arg>Gly>Val,其組成隨性腺發(fā)育階段的不同而有顯著差異。對(duì)照組停留在Ⅰ、Ⅱ期含量在變化后最后穩(wěn)定依次為Glu>Asp>Lys>Leu>Arg>Gly>Pro。

9、(4)用半干法獲取的受精卵在顯微下作了連續(xù)的胚胎發(fā)育活體觀察,發(fā)現(xiàn):在水溫(21±0.5)℃條件下,日本鰻鱺從受精卵到仔魚(yú)出膜時(shí)間需約38h30min。日本鰻鱺早期仔魚(yú)觀察顯示與一般硬骨魚(yú)類的仔魚(yú)存在較大差異:無(wú)色透明的血細(xì)胞和“S”形心管、開(kāi)放型的口腔、一定時(shí)間存在的感覺(jué)丘等結(jié)構(gòu)以及早期腸道有纖毛運(yùn)動(dòng)及存在食物等現(xiàn)象等生物學(xué)特性。
　　以上結(jié)果表明,日本鰻鱺在人工催熟和催產(chǎn)過(guò)程中有一定的特點(diǎn):激素總劑量相同時(shí),在同等時(shí)間下能達(dá)到