液相色譜-飛行時間質(zhì)譜法(LC-Q-TOF)對多種獸殘同時檢測方法探究.pdf

1、本論文建立了磺胺類、三苯甲烷類、氟喹諾酮類、林可胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、雌激素類和酰胺醇類共7類45種獸藥殘留的液相色譜-四級桿-飛行時間質(zhì)譜LC-Q-TOF(LiquidChromatography-Quadrupole-Time of Flight Mass Spectrometer Detector)同時篩查分析檢測方法。并對魚、蝦、貝類養(yǎng)殖水體中獸藥殘留情況進(jìn)行了實(shí)際檢測。具體內(nèi)容如下:
　　7類45種獸藥標(biāo)準(zhǔn)品的液相色譜-四級

2、桿-飛行時間質(zhì)譜LC-Q-TOF同時檢測方法的建立。確定了最佳液相色譜分離條件，在ESI+電離模式和ESI-電離模式下，7類45種獸藥經(jīng)Agilent ExtendC18色譜柱分離，分別以含0.1％甲酸的5mmol/L乙酸銨-乙腈為流動相進(jìn)行ESI+正離子采集和5mmol/L乙酸銨-乙腈為流動相進(jìn)行ESI-負(fù)離子采集。確定了最佳質(zhì)譜檢測條件，在MS Scan模式下對7類45種獸藥進(jìn)行一級質(zhì)譜全掃描，確定了每種獸藥的保留時間和精確質(zhì)量數(shù);

3、在TargetMS/MS模式下對7類45種獸藥進(jìn)行二級碎片離子全掃描，確定了每種獸藥的最優(yōu)碰撞能量及碎片離子信息，每種獸藥的定性標(biāo)準(zhǔn)為至少有兩個碎片離子且同分異構(gòu)體間至少有一個碎片離子不同。結(jié)果顯示，7類45種獸藥的質(zhì)量偏差均在5ppm以內(nèi)，在1～500μg/L的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，保留時間RT偏差均小于0.2％，儀器檢測限LOD為0.5～20μg/L，定量限LOQ為1～50μg/L;整個分析過程在40min

4、內(nèi)完成，且檢測靈敏度、分離度和重現(xiàn)性均達(dá)到檢測要求，為多種獸藥殘留的同時檢測提供有力的技術(shù)支持和參考。
　　建立7類45種獸藥的質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫，確定最佳篩查參數(shù)。7類45種獸藥的質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫包括英文名稱、簡稱、CAS號、分子式、電離類型、保留時間、母離子、不同碰撞能量下的高分辨二級質(zhì)譜圖等信息。確立了一級和二級全掃描的最優(yōu)篩查參數(shù)，并以低濃度標(biāo)準(zhǔn)品為確證參考，驗(yàn)證了篩查條件的實(shí)際可行性。質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫的建立為獸藥多殘留的高通量篩查檢測奠定基

5、礎(chǔ)，為食品中未知物的篩查研究提供參考。
　　建立魚、蝦、貝實(shí)際養(yǎng)殖水體樣品前處理方法和多種獸藥殘留同時檢測方法。在樣品前處理過程中采用甲醇和超純水對其進(jìn)行萃取柱活化，經(jīng)Agela BAP-SPE固相萃取柱富集凈化，甲醇、1％甲酸乙腈和10％甲醇乙酸乙酯依次洗脫，吹干后純水-乙腈(V/V,9∶1)定容，完成前處理過程;目標(biāo)物經(jīng)Agilent Extend C18色譜柱分離后，分別以含0.1％甲酸的5mmol/L乙酸銨-乙腈為流動相進(jìn)

6、行ESI+正離子采集和5mmol/L乙酸銨-乙腈為流動相進(jìn)行ESI-負(fù)離子采集。結(jié)果顯示7類45種獸藥在1～500μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，方法檢測限均在0.25μg/L以下，除磺胺胍回收率為58.85％外，其余目標(biāo)物回收率均在70.22％～120.69％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.18％～22.03％。該方法靈敏度高、準(zhǔn)確性好，滿足多獸藥殘留的篩查檢測要求。應(yīng)用此方法對對淡水（鯉魚、南北白對蝦、泥鰍）和海水（鮑