江蘇部分地區(qū)致初生、斷奶仔豬腹瀉-水腫病大腸桿菌的O血清型、毒素型和黏附素型的流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、致病性大腸桿菌是引起仔豬腹瀉的重要病原，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了弄清我省部分養(yǎng)豬地區(qū)致仔豬腹瀉大腸桿菌的生物學(xué)特性，我們于2011-2013年在江蘇省部分養(yǎng)豬地區(qū)及周邊地區(qū)，從臨診上疑似仔初生仔豬腹瀉（黃、白?。┘皵嗄套胸i腹瀉和/或水腫病病豬的直腸棉拭及病死豬的十二指腸共分離鑒定出576株大腸桿菌，并對其相關(guān)生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。
　　1、江蘇部分地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的O血清型、毒素型和黏附素型
　　共分離出

2、致初生仔豬腹瀉大腸桿菌348株，除93株未定型，4株自凝外，共測定出251株大腸桿菌血清型，定型株共覆蓋了44種O血清型，其中以O(shè)6、O9、O20、O24、O101、O105和O149為主，共174株，占本次定型菌株的69.32％(174/251)，為本次致初生仔豬腹瀉大腸桿菌調(diào)查的主要流行血清型。主要流行的血清型與以往報道的致初生仔豬腹瀉大腸桿菌常見血清型間存在一定差異，如O24、O105很少報道，也證實了江蘇地區(qū)致仔豬腹瀉大腸桿菌O

3、血清型呈多樣性的趨勢。
　　利用多重PCR，對分離的348株大腸桿菌進(jìn)行毒素基因(sta、stb、lt、stx2e、eaeA)的檢測。結(jié)果表明:共202株大腸桿菌檢出毒素基因，檢出率達(dá)58.05％(202/348)?？煞譃?3種毒素類型，以lt+、stb+、sta+、sta+礦4種為主要毒素類型，分別為69、55、23和20株。根據(jù)毒素特征可將這些分離株分成五種類型:ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、ETEC/AE

4、EC。其中ETEC共168株，占毒素基因陽性菌株的83.17％(168/202)，表明ETEC仍是導(dǎo)致初生仔豬腹瀉的最重要的病原大腸桿菌。
　　應(yīng)用玻板凝集試驗，對分離的348株大腸桿菌菌株進(jìn)行4種黏附素(F4、F5、F6、F41)的鑒定，結(jié)果表明:有50株大腸桿菌表達(dá)一種或多種黏附素，檢出率為14.37％(50/348)。本次調(diào)查共檢測出六種黏附素類型，其中以F4+F5+、F41+和F4+3種黏附素類型為主，分別檢出23、11和

5、9株。另外有3株F5+F41+，3株F4+F5+F41+以及1株F5+。
　　對大腸桿菌O血清型、毒素類型及黏附素類型檢測結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果顯示:202株攜帶毒素基因的菌株主要血清型為O20、O24、O26、O78、O101、O105和O149，分別有23、33、5、6、5、5和38株。O149大腸桿菌毒素基因型主要為stb+及stb+eaeA+，分別占其毒素基因陽性株的65.79％(25/38)和23.68％(9/38); O2

6、4毒素基因型主要為stb+、sta+lt+及l(fā)t+，分別占其菌毒素基因陽性株的39.39％(13/33)、30.30％(10/33)和24.24％(8/33)。49個黏附素和毒素基因均呈陽性的分離株，可表現(xiàn)出10種組合形式，其中O149共38株，毒力因子組合形式為stb+/F41+(11株)、stb+eaeA+/F4+F5+（9株）、stb+/F4+(7株)、stb+/F4+F5+（7株）、lt+/F4+F5+F41+(3株)及l(fā)t+e

7、aeA+/F4+F5+（1株），而O24共的毒力因子組合形式以stb+/F4+F5+（5株）為主。
　　2、致斷奶仔豬腹瀉和/或水腫病大腸桿菌的O血清型、毒素型和黏附素型
　　共分離出斷奶仔豬源大腸桿菌228株，除61株未定型，4株自凝外，測定出共163株大腸桿菌血清型，定型株共覆蓋了28種O血清型，其中以O(shè)9、O14、O24、O44、O65、O101為主，共128株，占定型株的78.52％(128/163)，為本次致仔豬腹

8、瀉和/或水腫病大腸桿菌調(diào)查的主要血清型。主要流行血清型與以往報道的斷奶仔豬源大腸桿菌常見血清型存在一定的差異，如O24、O44很少報道，證實了我省部分地區(qū)致斷奶仔豬腹瀉和/或水腫病大腸桿菌O血清型呈多樣化的趨勢。
　　對這些分離株進(jìn)行五種毒素基因(sta、stb、lt、stx2e、eaeA)檢測，共有110株大腸桿菌檢出毒素基因，陽性率達(dá)48.25％(110/228)?？煞譃?3種毒素類型，以eaeA+、sta+、stx2e+ea

9、eA+為主要類型，分別占毒素基因陽性株的35.45％(39/110)、18.18％(20/110)、11.81％(13/110)。根據(jù)毒素特征，可將這些分離株為七類:ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、STEC/AEEC、ETEC/AEEC和ETEC/STEC/AEEC，分別占陽性株的30.91％(34/110)、5.45％(6/110)、35.45％(39/110)、0.91％(1/110)、11.82％(13/110)

10、、13.64％(15/110)和1.82％(2/110)。
　　對上述228株大腸桿菌分離株進(jìn)行5種黏附素(F4、F5、F6、F18、F41)的鑒定，結(jié)果表明:有54株大腸桿菌表達(dá)一種或多種黏附素，檢出率為23.68％(54/228)。本次調(diào)查共檢測出9種黏附素類型，其中以F18+、F5+F41+和F5+類型為主，分別檢出21、17和7株，分別占黏附素陽性株的38.89％(21/54)、31.48％(17/54)和12.93％(7

11、/54)。
　　對大腸桿菌O血清型、毒素類型及黏附素類型檢測結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果顯示:110個攜帶毒素基因的菌株主要血清型為O14、O24、O44、O65和O101，分別有8、29、7、7和5株，其中O24主要見于stx2e+eaeA+和eaeA+陽性的大腸桿菌。54個黏附素陽性的菌株覆蓋了12個血清型，以O(shè)24為主要血清型，共25株。其中有11株O24大腸桿菌表達(dá)F5F41，9株表達(dá)F18。32個黏附素和毒素基因均呈陽性的菌株，可