高產(chǎn)絮凝劑克雷伯氏菌紫外誘變株的篩選及其特性研究.pdf

1、微生物絮凝劑是一類由微生物產(chǎn)生的代謝物,具有生物分解性,可成為安全高效、無毒、無二次污染的水處理劑。然而,微生物絮凝劑因產(chǎn)量低、成本高而未得到廣泛應(yīng)用。因此,篩選高效微生物絮凝劑產(chǎn)生菌,提高絮凝活性和產(chǎn)量,降低生產(chǎn)成本,對于是實(shí)現(xiàn)微生物絮凝劑大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用有實(shí)際意義。
　　本論文在課題組前期大量研究工作基礎(chǔ)上,對一株產(chǎn)絮凝劑的克雷伯氏菌進(jìn)行紫外誘變,在獲得產(chǎn)絮凝劑正突變菌種的基礎(chǔ)上,優(yōu)化了誘變菌株產(chǎn)微生物絮凝劑的培養(yǎng)組成和

2、發(fā)酵條件,研究了絮凝劑的結(jié)構(gòu)特性和分子量分布的特征。獲得以下研究成果:
　　(1)以克雷伯氏野生菌NIII2為出發(fā)菌,通過紫外誘變獲得一株遺傳性能穩(wěn)定,且高產(chǎn)絮凝劑的誘變株NIII2-I。
　　(2)在影響誘變菌株NIII2-I產(chǎn)絮凝劑的因素中,影響作用大小順序?yàn)閜H>磷酸鹽>硝酸鈉>Mg>接種量。誘變株NIII2-I發(fā)酵產(chǎn)絮凝劑的培養(yǎng)基優(yōu)化組成:蔗糖20g/L,硝酸鈉2.4g/L,MgSO4溶液16.8mg/L(以Mg2+

3、計(jì)),磷酸鹽緩沖液27g/L(以PO43+計(jì))。初始培養(yǎng)基最佳pH為8,最佳溫度30℃,過夜生長種子液最佳接種2ml,發(fā)酵72h可收獲絮凝劑,產(chǎn)量最高可達(dá)12.11g/L。
　　(3)野生菌NIII2和誘變菌NIII2-I所產(chǎn)微生物絮凝劑的官能團(tuán)幾乎一樣,均含有-OH,-COOH,-NH,C-O-C等蛋白和糖的特征吸收峰。
　　(4)培養(yǎng)溫度、氮源等對微生物絮凝劑中的總糖和蛋白的含量有影響,且絮凝劑中蛋白含量越高,絮凝效果則

4、較好,與野生菌相比,誘變菌NIII2-I所產(chǎn)絮凝劑蛋白的含量高。
　　(5)野生菌NIII2和誘變菌NIII2-I所產(chǎn)微生物絮凝劑的顆粒粒徑分布不同,野生菌NIII2所產(chǎn)絮凝劑的粒徑分布在0.4-3.0um和3.0-100um范圍內(nèi),且0.4-3.0um范圍內(nèi)絮凝劑所占比例較大;誘變菌株所產(chǎn)絮凝劑的粒徑分布在0.4-2.5um和3.5-60um范圍內(nèi),從統(tǒng)計(jì)結(jié)果看0.4-2.5um范圍內(nèi)的絮凝劑所占比例較大,3.5-60um范圍內(nèi)