牛皰疹病毒5型編碼的miR-10對(duì)其靶基因Us3的調(diào)控作用.pdf

1、分類號(hào) 密級(jí)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文牛皰疹病毒5 型編碼的m i R - l O 對(duì)其靶基因U s 3 的調(diào)控作用T h e r e g u l a t i o no f B o v i n e h e r p e s v i r u s 5e n c o d e dm i R - l O o n i t st a r g e t g e n eU s 3研究生：周清學(xué) 號(hào)：2 0 1 1 3 0 2 1 1 0 1 8 5指導(dǎo)教師：劉

2、正飛教授指導(dǎo)小組：陳煥春院士傅振芳教授何啟蓋教授趙凌教授宋云峰副教授專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)獲得學(xué)位名稱：農(nóng)學(xué)碩士研究方向：動(dòng)物傳染病獲得學(xué)位時(shí)間：2 0 1 4 年6 月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院二。一四年六月牛皰疹病毒5 型編碼的m i R o l 0 對(duì)其靶基因U s 3 的調(diào)控作用目 錄摘 要???????????????????????????????????????????．iA b s t r a c t ??????????．????

3、????????????????????????．???．．i i i縮略語(yǔ)表( A b b r e v i a t i o n ) ????????????????????????v第1 章文獻(xiàn)綜述???????????????????????????．1引言???????????????????????????????一l1 ．1 B o H V 5 流行病學(xué)及其致病性????????????????????11 ．2B o H V

4、 - 5 的分子生物學(xué)特征????????????????????一21 ．3m i R N A 的生物合成及作用機(jī)制???????????????????41 ．4 病毒的m i R N A ??????????????????????????51 ．4 ．1 皰疹病毒與m i R N A ?????????????????????．61 ．5B o H V - 1 和B o H V - 5 編碼的m i R N A ????????

5、?????????．61 ．6 本研究的目的和意義???????????????????????8第2 章材料與方法???????????????????????????．92 ．1 實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????????92 ．1 ．1 病毒、菌種、質(zhì)粒與細(xì)胞??????????????????一92 ．1 ．2 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材??????????????????????一92 ．1 ．3 酶及主要事試劑??

6、????????????????????一92 ．1 ．4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制??????????????????1 02 ．1 ．5 本研究中所用的寡核苷酸??????????????????1 22 ．1 ．6 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物?????????????????????????l 32 ．2 試驗(yàn)方法???????????????????????????．1 32 ．2 ．1 雙熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒的構(gòu)建?????????????????1

7、 32 ．2 ．2 雙熒光報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)????????????????????1 72 ．2 ．3R e a l —t i m e 檢測(cè)在R N A 水平的調(diào)節(jié)??????????????l 82 ．2 ．4U s 3 多抗的制備??????????????????????．1 92 ．2 ．5 對(duì)U s 3 蛋白表達(dá)情況的檢測(cè)?????????????????2 12 ．2 ．6 一步法生長(zhǎng)曲線的測(cè)定?????????????????

8、??2 l2 ．2 ．6 凋亡蛋白的檢測(cè)??????????????????????2 22 ．2 ．6 流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)???????????????????????2 22 ．2 ．7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法????????????????????????2 2第3 章結(jié)果和分析??????????????????????????2 33 ．1 B o H V - 5 m i R - 1 0 靶基因的預(yù)測(cè)???????????????????2 3