基于蠟梅屬植物花化學(xué)成分的種間差異性研究.pdf

1、蠟梅屬Chimonanthus Lindl.植物屬于蠟梅科Calycanthaceae，是中國(guó)的特有屬，主要分布在中國(guó)的東南部，在民間用途廣泛，可用作園林綠化，部分植物的葉及花還可作茶葉或藥用。蠟梅屬植物主要包括蠟梅Ch.praecox(L)Link、山蠟梅Ch.nitens Oliv、柳葉蠟梅Ch.salicifolius S.Y.Hu、浙江蠟梅Ch.Zhejiangensis M.C.Liu、突托蠟梅Ch.grammatus M.C

2、.Liu等。本文以蠟梅葉為材料摸索蠟梅屬植物的最佳提取工藝，通過測(cè)定蠟梅屬5種植物花不同萃取相的總黃酮含量、抗氧化活性，以及花的揮發(fā)性化學(xué)成分及醇溶性成分定性及定量分析研究，比較蠟梅屬植物種間差異，研究取得的結(jié)果如下：
　　1.以乙醇濃度、超聲時(shí)間以及超聲溫度為自變量，以總黃酮、總酚含量以及DPPH自由基清除率為響應(yīng)值，進(jìn)行響應(yīng)面分析(RSM)，確定蠟梅葉片的最佳提取工藝條件為：乙醇濃度的范圍為81.83％-84.83%，超聲時(shí)間

3、的范圍為33.31min-36.62min，超聲溫度的范圍42.55℃-49.15℃。最優(yōu)提取條件下測(cè)定的總黃酮、總酚及DPPH自由基清除率的實(shí)際值與模型預(yù)測(cè)的理論值基本一致，說明采用響應(yīng)面法得到的工藝參數(shù)可靠，具有一定的實(shí)際價(jià)值。
　　2.通過優(yōu)化樣品處理得出HS-SPME最佳的萃取條件為：樣品用量1.2g、加熱溫度70℃、吸附時(shí)間45min、解吸時(shí)間3min。通過GC-MS測(cè)定并定性分析，從蠟梅屬5種植物干花中共鑒定了46種揮

4、發(fā)性物質(zhì)，其中蠟梅37種、突托蠟梅41種、山蠟梅41種、浙江蠟梅36種和柳葉蠟梅43種，且5種植物花中的共有成分達(dá)到24種；蠟梅屬5種植物花的揮發(fā)性成分主要以萜類成分為主，且成分組成差異較大，其中柳葉蠟梅、浙江蠟梅及山蠟梅花的揮發(fā)性成分相似，具有相同的資源利用性；蠟梅及突托蠟梅花香氣各異，揮發(fā)性成分組成明顯不同于另外3種植物，在資源利用上可區(qū)別對(duì)待。本研究結(jié)果可為蠟梅屬植物的分類學(xué)研究提供基礎(chǔ)理論依據(jù)，也為蠟梅屬花資源的開發(fā)利用提供理論

5、參考。
　　3.蠟梅屬植物花的總黃酮含量存在顯著差異，在5種植物花中，蠟梅花的總黃酮含量最高(70%醇提物可達(dá)69.21mg/g)，其次是山蠟梅。在各萃取部位中，每種植物花的正丁醇相和乙酸乙酯相的總黃酮含量和清除自由基能力都相對(duì)較高，抗氧化能力與總黃酮含量存在正相關(guān)關(guān)系。
　　4．利用HPLC結(jié)合LC–UV–ESI-MS的方法鑒定并比較蠟梅屬5種植物花所含化合物的差異，其中9個(gè)化合物被分別鑒定為莨菪亭-7-O-β-D-葡萄糖

6、苷、莨菪亭、蘆丁、異槲皮苷、山奈酚-3-O-β-D-蕓香糖苷、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚、大黃素。通過HPLC已鑒定的的9個(gè)化合物進(jìn)行定量分析，其含量范圍(mg/g)分別為：0-2.16，0-0.23，1.94-59.74，0.14-0.97，0.59-8.13，0.11-0.68，0.23-1.92，0.07-0.97，0-0.33。蠟梅屬5種植物間所含化合物差異明顯，蘆丁在5種植物中普遍含量最高，在蠟梅花中未檢

7、測(cè)到莨菪亭-7-O-β-D-葡萄糖苷、莨菪亭和大黃素。五種植物花中，蠟梅花中的黃酮成分普遍高于其它植物，其它四種蠟梅花成分含量相差較小。
　　5、利用DPPH-HPLC方法，即通過比較加DPPH前后各峰面積的變化確定各化合物抗氧化性的大小，其中異槲皮苷峰基本消失，蘆丁、槲皮素、山奈酚峰面積下降明顯，說明這些化合物具有較強(qiáng)的抗氧化性。通過測(cè)定9種化合物的DPPH自由基清除率，槲皮素、山奈酚、蘆丁、異槲皮苷有較強(qiáng)的清除DPPH自由基能