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1、南京師范大學(xué)博士學(xué)位論文中國(guó)金線側(cè)褶蛙種組的系統(tǒng)地理學(xué)姓名:戴建華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):生物學(xué);動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師:周開(kāi)亞20090524摘要II線側(cè)褶蛙的13個(gè)有效的微衛(wèi)星位點(diǎn)。在30只個(gè)體中,位點(diǎn)的等位基因數(shù)為513,平均8.38。觀測(cè)雜合度(observedheterozygositiesHO)在0.5330.890之間,平均值為0.686;期望雜合度(expectedheterozygositiesHE)在0.6200.897之間
2、,平均值為0.751。為了檢測(cè)金線側(cè)褶蛙SSR引物的通用性,對(duì)蛙科其它5個(gè)種(每種8只)進(jìn)行了擴(kuò)增。結(jié)果表明,13個(gè)位點(diǎn)可在側(cè)褶蛙屬3個(gè)種(Pelophylaxhubeiensis,Pelophylaxfukienensis,Pelophylaxnigromaculata)中擴(kuò)增,其中的8個(gè)位點(diǎn)能在測(cè)試的所有物種中擴(kuò)出。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示這13對(duì)引物在側(cè)褶蛙屬中的通用性非常好,除適合用于種群內(nèi)的遺傳多樣性、遺傳結(jié)構(gòu)以及基因流分析外,也可用于同
3、屬物種以及其它蛙科近緣物種之間的系統(tǒng)發(fā)生研究。4中國(guó)金線側(cè)褶蛙種組的種群遺傳結(jié)構(gòu)和進(jìn)化歷史中國(guó)金線側(cè)褶蛙種組的種群遺傳結(jié)構(gòu)和進(jìn)化歷史測(cè)定了三種側(cè)褶蛙mtDNA控制區(qū)5’端和cytb全長(zhǎng)序列。3種側(cè)褶蛙的cytb基因全序列長(zhǎng)度均為1143bp,5’CR序列長(zhǎng)度在708772bp。比對(duì)后,在福建側(cè)褶蛙、湖北側(cè)褶蛙和金線側(cè)褶蛙cytb中分別發(fā)現(xiàn)了194個(gè)、120個(gè)和158個(gè)變異位點(diǎn),分別定義了28種、63種和87種單元型,其中4種、11種和1
4、2種單元型為地方種群間共享單元型,其余單元型為地方種群內(nèi)特有;在福建側(cè)褶蛙、湖北側(cè)褶蛙和金線側(cè)褶蛙5’CR中分別發(fā)現(xiàn)了423個(gè)、108個(gè)和139個(gè)變異位點(diǎn),分別定義了30種、79種和102種單元型,其中分別有5種、10種和14種單元型為地方種群間共享單元型,其余單元型為地方種群內(nèi)特有。將所有地方種群合并為一個(gè)大種群所做的分析表明,福建側(cè)褶蛙、湖北側(cè)褶蛙和金線側(cè)褶蛙的線粒體單元型多樣性相當(dāng)高(福建側(cè)褶蛙、湖北側(cè)褶蛙和金線側(cè)褶蛙cytb單元
5、型多樣性分別為0.8680.021,0.9550.010和0.9660.003;5’CR單元型多樣性分別為0.9220.010,0.9790.004和0.97310.0030),總體核苷酸多樣性也較高(福建側(cè)褶蛙、湖北側(cè)褶蛙和金線側(cè)褶蛙cytb核苷酸多樣性分別為0.041250.00514,0.018490.00093和0.019730.00060;5’CR核苷酸多樣性分別為0.051240.00507,0.028570.00117和0
6、.029390.00067)。應(yīng)用線粒體DNA的cytb基因全序列和控制區(qū)5’端部分序列探討了金線側(cè)褶蛙種組的系統(tǒng)地理格局和種群遺傳結(jié)構(gòu)?;诰€粒體cytb和5’CR序列構(gòu)建了單元型系統(tǒng)發(fā)生樹,進(jìn)行了種群遺傳變異分析及歧點(diǎn)分布分析。系統(tǒng)發(fā)生樹和單元型之間的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖都表明福建側(cè)褶蛙、湖北側(cè)褶蛙和金線側(cè)褶蛙種群都包括明顯的兩大支系?;赾ytb序列數(shù)據(jù),用MDIV軟件計(jì)算三種側(cè)褶蛙主要支系之間的分歧時(shí)間,結(jié)果顯示福建側(cè)褶蛙2個(gè)支系的分歧時(shí)
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