2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文粘質(zhì)沙雷氏菌脂肪酶在原核和真核系統(tǒng)中的克隆、表達(dá)及定性姓名：葉發(fā)香申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：范立強(qiáng)20091229第1I頁(yè)華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文SerratiamarcescensECUl010Lipase(1ipA)：Cloning，ExpressionandCharacterizationinProkaryoticandEukaryoticExpressionSystemAbst

2、ractSerratiamarcescensECU1010extracellularlipaseiSallimportantcatalystthatwidelyusedtocatalyzevariouschemicalreactionssuchasnonspecific，stereospecifichydrolysisandesterificationforindustrialbiocatalyticapplicationpurpose

3、Itsabliltyofe伍cientenantioselectivehydrolysisoftrans3(4methoxyphenyl)glycidicacidmethylester【()MPGM]，akeyintermediateinthesynthesisofvasodilatationdrugDiltiazem，hasattracteditsfurtherexploitationSerratiamarcescensECU1010

4、extracellularlipasehasbeenclonedandexpressedEscherichiacolimainlyasinactiveinclusionbodiesToincreaseitssolubleexpression，inthisstudyoptimizationWascarriedoutinbothprokaryoticandeucaryoticlevelsInprokaryotic1evelthreereco

5、mbinantexpressionvectorspET22blipase，pET40b—lipaseandPTⅣlNl—lipasewereconstructedHigherlipaseactivitypET22b—lipaseWaschoosenforfurtheroptimizationTheoptimalsolubleexpressionconditionWasinducedby01mMIPTGand10mMCaCl2inTBme

6、diumat15“Cfor24hoursAfteroptimizationlipaseacitivityWasincreasedfrom06U／mlto2U／mlculturemediumIneukaryoficlevelrecombinantexpressionvectorpPIC9KlipaseWasconstructedAfterelectroporationandactivityscreening，optimizationwas

7、carriedoutinshakeflasksByadjustingthepHbetween60and70，decreasingthetemperaturefrom37℃to23℃，recombinantlipaseactivityinculturemediaWasincreasedby2to3foldreaching4U／m1Recombinantlipasewaspurifiedbyultrafiltrationandanionex

8、changechromatographyItspropertieswerestudiedItsoptimalpHandtemperaturewere85and40℃respectivelyItWasrelativelystablebetweenpH60and10below50℃Thisrecombinantlipasewastoleranttodetergents10werconcentrationofdetergentsandCupi

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