致病性副溶血弧菌脂多糖對(duì)牙鲆的免疫效應(yīng)及其抗原性研究.pdf

1、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)是一種海水中常見的條件致病菌,可引起海水養(yǎng)殖魚類疾病.脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌外膜的主要成分,是細(xì)菌中毒最主要的內(nèi)毒素.鰻弧菌、溶藻弧菌脂多糖對(duì)魚類的致病致死作用已有諸多研究,但副溶血弧菌脂多糖的致病致死作用尚無研究.研究致病性副溶血弧菌脂多糖在牙鲆中的免疫效應(yīng),尋找防治副溶血弧菌病的方法,對(duì)牙鲆的健康生產(chǎn)具有重要的指導(dǎo)作用.

2、該研究利用酚水法提取副溶血弧菌脂多糖.進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)測(cè)定脂多糖在48h對(duì)牙鲆的半致死濃度(LC50),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明脂多糖注射量為0.2ml,48h的半致死濃度為126mg·ml<'-1>,注射劑量在40mg·kg<'-1>時(shí)不會(huì)對(duì)牙鲆造成傷害.用此濃度脂多糖做免疫原,采用加強(qiáng)腹腔注射法免疫牙鲆,利用免疫試管;凝集法測(cè)定牙鲆的血清凝集抗體效價(jià),研究牙鲆在脂多糖免疫后特異性的免疫應(yīng)答規(guī)律.結(jié)果表明,免疫后的牙鲆對(duì)副溶血弧菌的血清凝集抗體效

3、價(jià)有顯著提高,第3周抗體滴度達(dá)到最高值256.該研究測(cè)定了脂多糖免疫后牙鲆白細(xì)胞吞噬活性的變化和病原菌攻毒后牙鲆的存活率.結(jié)果表明,脂多糖免疫后在不同的時(shí)間,牙鲆白細(xì)胞的吞噬活性沒有明顯差別,但與對(duì)照組相比有明顯加強(qiáng)(P<0.05).用致病副溶血弧菌攻毒免疫脂多糖后的牙鲆的結(jié)果表明,脂多糖對(duì)牙鲆的保護(hù)率為62.5﹪.該研究又以聚丙烯酰胺凝膠電泳法分析了脂多糖中的蛋白質(zhì)成分,經(jīng)SDS-PAGE電泳及銀染色后表明副溶血弧菌脂多糖含有41.3