16026.若干樟科植物生斑痣盤菌目分類學(xué)與該目雙基因系統(tǒng)發(fā)育學(xué)初步研究

1、I摘要本研究主要分為三部分內(nèi)容。第一部分主要是采用傳統(tǒng)分類學(xué)方法，對(duì)樟科植物上的斑痣盤菌進(jìn)行了分類學(xué)系統(tǒng)研究。通過對(duì)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)森林菌物保藏室（AAUF）保存的真菌材料進(jìn)行初步檢查與整理，并選取相關(guān)標(biāo)本進(jìn)行深入研究，共鑒定出樟科植物生斑痣盤菌目3屬4種，其中2個(gè)為新種，分別是奇異皮下盤菌Hypodermamirabile和新木姜子齒裂菌Coccomycesneolitseae。通過顯微鏡外部觀察及冰凍切片內(nèi)部顯微檢查，對(duì)這二個(gè)新種的外部

2、形態(tài)學(xué)特征，內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征等進(jìn)行了研究，并作了詳細(xì)的中英文描述，且附有子囊果外表及生境、子囊、子囊孢子及側(cè)絲結(jié)構(gòu)等的點(diǎn)線合成圖。同時(shí)對(duì)這些種的地理分布、生態(tài)生境等進(jìn)行了調(diào)查研究；第二部分主要是對(duì)采自國(guó)內(nèi)的斑痣盤菌目部分成員進(jìn)行了分離培養(yǎng)，菌種轉(zhuǎn)接保藏，單點(diǎn)性狀培養(yǎng)，玻璃紙菌絲培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)，研究分析了其生物學(xué)性狀。結(jié)果顯示三種不同培養(yǎng)基上同一菌株的生長(zhǎng)情況不盡相同，同一物種不同菌株的培養(yǎng)性狀有的相似，有的則不同。一般來(lái)說(shuō)，在營(yíng)養(yǎng)匱乏的培養(yǎng)基上

3、，容易產(chǎn)生分生孢子器及線紋黑殼等，而營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上，則氣生菌絲等較為發(fā)達(dá)；有的菌株還會(huì)分泌紅色、黃色水溶性色素等。根據(jù)結(jié)果可以推測(cè)環(huán)境條件、寄主等都會(huì)對(duì)物種生長(zhǎng)產(chǎn)生影響，特別是物種所處的環(huán)境的營(yíng)養(yǎng)條件。第三部分主要是對(duì)來(lái)源于全國(guó)各地斑痣盤菌目成員進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育學(xué)初步研究，運(yùn)用分子生物學(xué)及生物信息學(xué)相結(jié)合的方法，利用DNA條形碼技術(shù)，基于rDNAITS和28SrDNA單獨(dú)序列，二基因聯(lián)合序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹來(lái)探討該目屬間、種間及種內(nèi)的親

4、緣關(guān)系。采用CTAB法提取供試菌株的DNA，通過PCR擴(kuò)增及測(cè)序，將所得的序列在GenBank上進(jìn)行比對(duì)（blast），選取合適的序列，以柔膜菌目的Leotialubrica為外群，分別構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)合形態(tài)學(xué)分類方法，確定物種分類地位。結(jié)果顯示，在斑痣盤菌目中，同一屬、種的菌株通常會(huì)優(yōu)先聚在一起，但一些表型性狀相似，卻分隸于兩個(gè)不同屬、種的也有可能聚在一起。本次研究表明，菌物的鑒定不能僅僅依靠單一方法，而需要將多種生物技術(shù)結(jié)合在一

5、起，即以形態(tài)學(xué)分類為基礎(chǔ)，綜合其個(gè)體發(fā)育、培養(yǎng)性狀、多基因綜合分析才能準(zhǔn)確地進(jìn)行菌物分類，確定其系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。分子生物學(xué)作為菌物分類研究的輔助手段，因其快速，準(zhǔn)確等特點(diǎn)，越來(lái)越凸顯其重要性，另外，為了使研究結(jié)果盡量準(zhǔn)確，需盡快完善真菌DNA條形碼技術(shù)，加快真菌DNA條形碼數(shù)據(jù)庫(kù)的建立與優(yōu)化。雖然分子生物學(xué)的方法在真菌分類上有著舉足輕重的作用，但是由于真菌的遺傳變異多樣性等特點(diǎn)，傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)分類還應(yīng)該是真菌分類的最主要依據(jù)與方法。關(guān)鍵詞：