菜蛾盤(pán)絨繭蜂寄生對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)神經(jīng)肽轉(zhuǎn)錄水平的影響.pdf

1、本論文首先在分析實(shí)驗(yàn)室已有的小菜蛾幼蟲(chóng)腦轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上，應(yīng)用表達(dá)序列標(biāo)簽(expressed sequence tag，EST)序列驗(yàn)證的方法鑒定出分屬于17個(gè)神經(jīng)肽家族的19個(gè)小菜蛾神經(jīng)肽基因，通過(guò)cDNA末端快速克?。╮apid-amplification of cDNA ends，RACE）方法獲得了其中13個(gè)基因的全長(zhǎng);其次應(yīng)用熒光定量PCR(qRT-PCR)的方法檢測(cè)了這些神經(jīng)肽基因在小菜蛾幼蟲(chóng)不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄規(guī)律以及菜蛾

2、盤(pán)絨繭蜂寄生/假寄生對(duì)這些神經(jīng)肽基因轉(zhuǎn)錄的影響?，F(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下:
　　1)小菜蛾幼蟲(chóng)腦神經(jīng)肽家族基因的鑒定
　　對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)腦轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行Blastx分析，篩選出能匹配到昆蟲(chóng)神經(jīng)肽基因的21個(gè)EST序列并逐一克隆驗(yàn)證，然后用RACE法獲得包括Adipokinetic hormoneⅠ、Adipokinetic hormoneⅡ、Allatostatin A、Allatostatin C、CCHamide、Bursicon

3、α、Bursiconβ、Crustacean cardioactivepeptide、 Ion transport peptide、 Neuroparsin、Neuropeptide F、Prothoracicotropic hormone和Allatotropin在內(nèi)的13個(gè)神經(jīng)肽基因的cDNA全長(zhǎng)，獲得Short neuropeptide F、Diuretic hormone、FMRFamid、Tachykinin、Neuropep

4、tide-likepeptide和Leucokinin在內(nèi)的6個(gè)基因的3'端序列。
　　2)小菜蛾幼蟲(chóng)神經(jīng)肽基因在小菜蛾幼蟲(chóng)不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄規(guī)律
　　通過(guò)qRT-PCR的方法對(duì)小菜蛾19個(gè)神經(jīng)肽基因在小菜蛾幼蟲(chóng)不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄模式進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明，小菜蛾19個(gè)神經(jīng)肽基因在不同發(fā)育歷期的總體轉(zhuǎn)錄規(guī)律是:在每個(gè)齡期的末期存在一個(gè)轉(zhuǎn)錄高峰。
　　3)菜蛾盤(pán)絨繭蜂寄生/假寄生對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)神經(jīng)肽基因轉(zhuǎn)錄的影響
　　

5、通過(guò)qRT-PCR的方法對(duì)菜蛾盤(pán)絨繭蜂寄生/假寄生后的小菜蛾幼蟲(chóng)神經(jīng)肽基因轉(zhuǎn)錄水平的影響進(jìn)行分析。結(jié)果表明在寄生后小菜蛾幼蟲(chóng)神經(jīng)肽基因的轉(zhuǎn)錄趨勢(shì)可以分成上調(diào)型和下降型，而假寄生后的轉(zhuǎn)錄趨勢(shì)可以分成平穩(wěn)型和波動(dòng)型。即在菜蛾盤(pán)絨繭蜂寄生后，Adipokinetic hormoneⅠ、Adipokinetic hormoneⅠ、Allatostatin A和AllatostatinC等15個(gè)小菜蛾神經(jīng)肽基因在幼蟲(chóng)腦部的轉(zhuǎn)錄趨勢(shì)屬于下降型，而N

6、europeptide-like peptide、Neuroparsin、Leucokinin和I0n transport peptide屬于上調(diào)型;菜蛾盤(pán)絨繭蜂假寄生后，Adipokinetic hormoneⅠ、Allatostatin A、CCHamide和Ion transport peptide等14個(gè)神經(jīng)肽基因在幼蟲(chóng)腦部的轉(zhuǎn)錄趨勢(shì)屬于平穩(wěn)型，而Leucokinin、Adipokinetic hormoneⅡ、Allatost