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1、——醉850‘6铘l⑧天洋大謦博士學(xué)位論文■_誓n●啊■■:塒習(xí)Ⅺ哪■■“I一級(jí)學(xué)科:化學(xué)工程學(xué)科專業(yè):生物化工作者姓名:陳宏文指導(dǎo)教師:胡宗定方柏山教授天津大學(xué)研究生院2005年6月ABSTRACT1,3Propanediol(13PD)asanimportantchemicalproductcallbeusedaschainextenderforthesynthesisof1ublicantsolventandprecursorin
2、thechemicalandpharmaceuticalindustries,inparticularasamonomerforpolycondensationstOproducepolyesters(PTT),polycthersandpolyurethanes1,3PDisproducedbytwomethods:chemicalsynthesisandmicrobialconversionBioconversionispartic
3、ularlyattractiveinthattheytypicallyuserenewablefeedstockanddonotgeneratetoxicbyproductsinthispaperpreparationofenzyme,processofenzymaticsynthesisanddesignofnonchargedultrafiItrationmembranereactorwerestudiedwiththeobject
4、ofdesigninganewbiosynthesismethodfor13PDproductionbyglyceroldehydrogenase(GDH)and1,3propanedioloxidoreductase(PDOR)fromKlebsieltapneumoniaeThemethodsofcelldisruptionanddeterminationofkeyenzymeactivityof1,3PDproductionwer
5、eestablishedunderaerobicconditionsAReroptimizationsofmediumbymethodsoftuffformdesign,artificialneuralnetworksandgeneticalgorithmsandfermentationconditions,theactivitiesofGDHandPDORwere3700and3840U/LGDHandPDORwerepurified
6、byionexchangeandaffinitychromatographytwo—stepsproceduresimultaneouslyunderaerobicconditionsWhencellsofKlebsiellapneumoniaewereculturedinbuffersupplementedsemicarbazideandglycerol,aerobicconversionofglyceroltO3hydroxypro
7、pionaldehyde(3HPA)realizedAmethodbasedonHPLCfortheanalysisofglycerol,3HPA,13一PDanddihydroxyacetone(DHA)simultaneouslywagestablishedStudiesontheinitialvelocityandproductinhibitionofGDHandPDORwereconsistentwithanorderedBiB
8、imechanismandthekineticmodelsofGDHandPDORwereestablishedrespectivelyUnderaerobicbatchoperationcondition,coupledreactionwithNAD(H)regenerationforproductionof1,3PDandDHAwaspossibleOptimumretentionofnativeNAD(H)innoncharged
9、ultrafiltrationmembranereactor“wasinvestigatedTheproductionof1,3PDbyKlebsieltapneumoniaeinNaCSPDMDAACmicrocapsuleswasstudiedTheencapsulatedcellswerefermentedsequentially10batchesinshakingflasks,themaximum1,3propanediolpr
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