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文檔簡介
1、背景:造影劑急性腎損傷(Contrast media-induced acute kidneyinjury,CIAKI)已成為當(dāng)前院內(nèi)發(fā)生急性腎損傷(Acute kidneyinjury,AKI)的第三位常見因?yàn)?研究表明氧化應(yīng)激在CIAKI中起重要作用,NADPH氧化酶是產(chǎn)生活性氧的主要來源;靶向線粒體肽能清除細(xì)胞內(nèi)活性氧,減少細(xì)胞線粒體ROS產(chǎn)生,抑制脂質(zhì)過氧化;然而NADPH氧化酶及靶向線粒體肽在CIAKI中的作用未見文獻(xiàn)報(bào)道。<
2、br> 目的:研究氧化應(yīng)激、NADPH氧化酶和線粒體能量代謝在高膽固醇血癥大鼠CIAKI中的作用;探討靶向線粒體肽(MTP131.SPI20)對高膽固醇血癥大鼠CIAKI的保護(hù)作用及機(jī)制。
方法:40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為先將大鼠隨機(jī)分為兩組:正常飲食組8只(NN組),高膽固醇飲食組32只(H組,4%膽固醇和1%膽酸鈉)。正常組大鼠因低體重死亡一只,高膽固醇飲食組死亡四只,繼續(xù)高膽固醇飲食的大鼠隨機(jī)分為4組,每組7只
3、,分別為高膽固醇飲食組(HN組)、高膽固醇飲食+造影劑組(HH組)、高膽固醇飲食+造影劑+MTP131(HM組)、高膽固醇飲食+造影劑+SPI20(HS組)。NN組和HN組大鼠分別從尾靜脈注射等量生理鹽水10ml/kg,HH組、HM組和HS組大鼠從尾靜脈注射(76%泛影葡胺)造影劑,注射劑量均為10ml/kg,建立高膽固醇血癥大鼠造影劑急性腎損傷模型。HM組和HS組大鼠在注射造影劑前24 h和30min及注射造影劑后24h分別經(jīng)腹腔注射
4、MTP131和SPI20(每次3 mg/kg)。注射造影劑前和后48 h收集尿標(biāo)本,經(jīng)眼球取血,檢測尿肌酐、尿鉀、尿鈉和血清肌酐、血鉀、血鈉、血膽固醇、血甘油三酯。注射造影劑后48 h,采用10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后處死大鼠,取左腎制備腎組織勻漿,分別用于測脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和ATP酶活性;取右腎下極組織采用10%福爾馬林固定,石蠟包埋、切片,HE染色,觀察腎臟的病理改變;其余部分
5、裝入凍存管中,保存于液氮中用于提取組織蛋白檢測腎組織NADPH氧化酶活性及Western blot檢測腎組織NOX4表達(dá)。
結(jié)果:注射造影劑前,與NN組比較各組大鼠血膽固醇水平顯著增高(P<0.01),各組大鼠體重、血清肌酐、血甘油三酯、內(nèi)生肌酐清除率、鉀鈉排泄分?jǐn)?shù)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。注射造影劑后48h,與NN組比較,HN組大鼠血清肌酐、腎小管損傷分?jǐn)?shù)和腎組織NADPH氧化酶活性增高(P值分別P<0.05,P<0.001,
6、P<0.001);HH組大鼠血清肌酐、鉀鈉排泄分?jǐn)?shù)、腎組織勻漿MDA含量明顯升高(P<0.01),腎小管損傷分?jǐn)?shù)和腎組織NADPH氧化酶活性顯著增高(P<0.001),內(nèi)生肌酐清除率、腎組織勻漿SOD和ATP酶活性顯著下降(P<0.01),腎組織NOX4蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05)。與HN組比較,HH組大鼠血清肌酐、鉀鈉排泄分?jǐn)?shù)、腎組織勻漿MDA含量、腎小管損傷分?jǐn)?shù)、腎組織NADPH氧化酶活性明顯升高(P<0.01),內(nèi)生肌酐清除率
7、、腎組織勻漿SOD和ATP酶活性下降(P<0.05),腎組織NOX4蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05)。與模型組比較,MTP131和SPI20干預(yù)組大鼠血清肌酐、鉀鈉排泄分?jǐn)?shù)、腎臟組織勻漿MDA含量顯著降低(P<0.05),腎組織勻漿SOD和ATP酶活性顯著升高(P<0.05),腎小管損傷分?jǐn)?shù)明顯減少(P<0.001),腎組織NADPH氧化酶活性及NOX4蛋白表達(dá)下調(diào)(P值分別P<0.001,P<0.05)。
結(jié)論:氧化應(yīng)激、N
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