四川省36個(gè)茶樹(shù)栽培品種親緣關(guān)系的RAPD分析.pdf

1、茶樹(shù)(Camelliasinensis(L.)O.Kuntze)是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物之一，不僅栽培歷史悠久，而且分布廣泛。已有研究表明，我國(guó)西南部是茶樹(shù)的起源中心，孕育了豐富的茶樹(shù)種質(zhì)資源，其遺傳多樣性為世人矚目。目前，我國(guó)已在浙江杭州、云南勐海建成兩個(gè)國(guó)家級(jí)茶樹(shù)種質(zhì)資源圃，保存了3300多份茶樹(shù)種質(zhì)材料，如此豐富的資源為我們進(jìn)行茶樹(shù)品種選育和生物技術(shù)研究提供了堅(jiān)實(shí)的物質(zhì)基礎(chǔ)。近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的RAPD標(biāo)記技術(shù)能夠直接從DNA水平反映材料

2、間的遺傳差異，方法簡(jiǎn)便快捷，是研究生物遺傳多樣性的有力工具。 本實(shí)驗(yàn)選用原產(chǎn)四川以及從福建、浙江、貴州、湖南、廣州、安徽、江蘇引進(jìn)四川茶區(qū)的36份茶樹(shù)栽培品種為材料，探討適合本試驗(yàn)供試材料基因組DNA提取的方法以及RAPD擴(kuò)增反應(yīng)體系和程序，根據(jù)RAPD擴(kuò)增圖譜，統(tǒng)計(jì)出所有二元數(shù)據(jù)，以此建立數(shù)據(jù)文件并統(tǒng)計(jì)出總帶數(shù)、共有帶數(shù)、特征帶，計(jì)算出多態(tài)性和供試茶樹(shù)品種間的遺傳距離，分析其遺傳多樣性，依據(jù)遺傳距離并結(jié)合類(lèi)平均法(UPGMA)

3、，構(gòu)建茶樹(shù)品種間親緣關(guān)系的分子系統(tǒng)樹(shù)狀圖。另外，利用RAPD引物產(chǎn)生的特殊標(biāo)記和特殊的譜帶類(lèi)型，進(jìn)行茶樹(shù)栽培品種的分子鑒別。結(jié)果如下： 1、從50條隨機(jī)引物中篩選出擴(kuò)增效果良好的16條，共擴(kuò)增出167條譜帶，其中158條為多態(tài)性帶，占94.61％，平均每條引物擴(kuò)增出的條帶為10.4條。最多的為15條，最少的也有7條。遺傳距離的變異范圍為0.149～0.679，平均為0.412。 2、對(duì)36份資源進(jìn)行親緣關(guān)系的UPGMA聚

4、類(lèi)分析，結(jié)果表明，當(dāng)以歐氏距離為0.385來(lái)劃分時(shí)，36份茶樹(shù)栽培品種聚為3個(gè)復(fù)合組和2個(gè)獨(dú)立組。第一類(lèi)包括原產(chǎn)四川的蜀永307、早白尖5號(hào)、南江4號(hào)、名山白毫、名山早、蒙山9號(hào)、蒙山¨號(hào)、蒙山23號(hào)和原產(chǎn)貴州的黔湄419；第二類(lèi)包括原產(chǎn)福建和浙江的福鼎大白茶、福選9號(hào)、福鼎大毫茶、梅占、政和、元宵茶、龍井43、龍井長(zhǎng)葉、浙農(nóng)¨7、平陽(yáng)特早、烏牛早、黃葉早、青峰、茂綠、碧云、迎霜、安吉白茶以及從福選9號(hào)變異的個(gè)體單株中選育出的名選213

5、；第三類(lèi)包括原產(chǎn)湖南、廣東、安徽、江蘇的東湖早、櫧葉齊、英紅1號(hào)、英紅2號(hào)、鳧早2號(hào)、錫茶5號(hào)、錫茶11號(hào)。南江3號(hào)、黔湄502則游離在這3大類(lèi)之外，分別單獨(dú)聚為一類(lèi)。 3、利用16條RAPD引物擴(kuò)增產(chǎn)生的40個(gè)特異標(biāo)記的存在和12個(gè)特異標(biāo)記的缺失，可以鑒定蜀永307、南江3號(hào)、名山白毫等共29份資源。引物S3擴(kuò)增的27種譜帶類(lèi)型中的24種特異譜帶類(lèi)型可以鑒定南江3號(hào)、南江4號(hào)、名山白毫等共24份資源；引物S10擴(kuò)增的21種譜帶