四川省36個茶樹栽培品種親緣關系的RAPD分析.pdf

1、茶樹(Camelliasinensis(L.)O.Kuntze)是我國重要的經(jīng)濟作物之一，不僅栽培歷史悠久，而且分布廣泛。已有研究表明，我國西南部是茶樹的起源中心，孕育了豐富的茶樹種質資源，其遺傳多樣性為世人矚目。目前，我國已在浙江杭州、云南勐海建成兩個國家級茶樹種質資源圃，保存了3300多份茶樹種質材料，如此豐富的資源為我們進行茶樹品種選育和生物技術研究提供了堅實的物質基礎。近年來發(fā)展起來的RAPD標記技術能夠直接從DNA水平反映材料

2、間的遺傳差異，方法簡便快捷，是研究生物遺傳多樣性的有力工具。 本實驗選用原產(chǎn)四川以及從福建、浙江、貴州、湖南、廣州、安徽、江蘇引進四川茶區(qū)的36份茶樹栽培品種為材料，探討適合本試驗供試材料基因組DNA提取的方法以及RAPD擴增反應體系和程序，根據(jù)RAPD擴增圖譜，統(tǒng)計出所有二元數(shù)據(jù)，以此建立數(shù)據(jù)文件并統(tǒng)計出總帶數(shù)、共有帶數(shù)、特征帶，計算出多態(tài)性和供試茶樹品種間的遺傳距離，分析其遺傳多樣性，依據(jù)遺傳距離并結合類平均法(UPGMA)

3、，構建茶樹品種間親緣關系的分子系統(tǒng)樹狀圖。另外，利用RAPD引物產(chǎn)生的特殊標記和特殊的譜帶類型，進行茶樹栽培品種的分子鑒別。結果如下： 1、從50條隨機引物中篩選出擴增效果良好的16條，共擴增出167條譜帶，其中158條為多態(tài)性帶，占94.61％，平均每條引物擴增出的條帶為10.4條。最多的為15條，最少的也有7條。遺傳距離的變異范圍為0.149～0.679，平均為0.412。 2、對36份資源進行親緣關系的UPGMA聚

4、類分析，結果表明，當以歐氏距離為0.385來劃分時，36份茶樹栽培品種聚為3個復合組和2個獨立組。第一類包括原產(chǎn)四川的蜀永307、早白尖5號、南江4號、名山白毫、名山早、蒙山9號、蒙山¨號、蒙山23號和原產(chǎn)貴州的黔湄419；第二類包括原產(chǎn)福建和浙江的福鼎大白茶、福選9號、福鼎大毫茶、梅占、政和、元宵茶、龍井43、龍井長葉、浙農(nóng)¨7、平陽特早、烏牛早、黃葉早、青峰、茂綠、碧云、迎霜、安吉白茶以及從福選9號變異的個體單株中選育出的名選213

5、；第三類包括原產(chǎn)湖南、廣東、安徽、江蘇的東湖早、櫧葉齊、英紅1號、英紅2號、鳧早2號、錫茶5號、錫茶11號。南江3號、黔湄502則游離在這3大類之外，分別單獨聚為一類。 3、利用16條RAPD引物擴增產(chǎn)生的40個特異標記的存在和12個特異標記的缺失，可以鑒定蜀永307、南江3號、名山白毫等共29份資源。引物S3擴增的27種譜帶類型中的24種特異譜帶類型可以鑒定南江3號、南江4號、名山白毫等共24份資源；引物S10擴增的21種譜帶