HIF-1α、VEGF和MVD與銀屑病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：銀屑病(psoriasis，PS)是一種常見(jiàn)的慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病。表皮增生和真皮乳頭層內(nèi)血管新生是PS的主要病理學(xué)特點(diǎn)。遺傳因素和環(huán)境刺激是其發(fā)病的兩大因素。最初的炎癥刺激原因不明確，但血管新生對(duì)于中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)是必不可少的。其中微血管生成異常與PS的發(fā)生、持續(xù)存在及復(fù)發(fā)有密切關(guān)系，在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。在促進(jìn)血管生成的各種調(diào)節(jié)因子中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth

2、 factor,VEGF)是主要的刺激因子，它能特異性引起血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖、通透性增加，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞遷移，誘導(dǎo)血管生成及炎細(xì)胞浸潤(rùn)。VEGF的上調(diào)是PS病理生理學(xué)早期和重要的一步，而影響VEGF的各種因子成為目前PS研究的熱點(diǎn)。低氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia-inducible factor-1，HIF-1)是細(xì)胞在缺氧條件下產(chǎn)生的具有轉(zhuǎn)錄活性的核蛋白，可以使細(xì)胞適應(yīng)低氧環(huán)境。在PS中細(xì)胞增殖增加了氧的消耗，表皮肥厚導(dǎo)致

3、了氧供應(yīng)的障礙。HIF-1α可很好反應(yīng)機(jī)體缺氧情況，它可促使VEGF的轉(zhuǎn)錄激活，從而誘導(dǎo)PS的血管生成。其很可能參與了PS的發(fā)病過(guò)程。目前HIF-1α在皮膚中的研究仍處于起步階段。為了解PS中HIF-1α與VEGF的表達(dá)及與血管生成的關(guān)系，我們利用免疫組化的方法檢測(cè)了HIF-1α與VEGF蛋白在PS患者及不同病期皮損中的表達(dá)，并用CD34標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞，計(jì)數(shù)微血管密度(microvessel density，MVD)值，從而探討它們?cè)?/p>

4、PS血管生成中的作用。 方法：PS患者皮損標(biāo)本來(lái)源于2004年10月～2007年3月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院皮膚科門(mén)診患者，共計(jì)32例。所有患者均經(jīng)臨床和組織病理確認(rèn)為銀屑病。其中男14例，女18例，年齡7～68歲，平均27.5歲。包括進(jìn)展期22例，靜止期10例。所有患者均無(wú)其他系統(tǒng)疾病，且近3個(gè)月內(nèi)未曾接受任何治療。取患者皮損組織用于常規(guī)病理分析，并用免疫組化法分別檢測(cè)皮損中HIF-1 α，VEGF，CD34蛋白的表達(dá)水平。選取河

5、北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院外科20例外傷患者的健康皮膚作為正常對(duì)照，且年齡、性別及取材部位與實(shí)驗(yàn)組患者相匹配。 組織病理采用石蠟切片HE染色觀察；免疫組化采用SP法。免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件中的Mann-whitney U檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)及Spearman等級(jí)相關(guān)分析。以P＜0.05作為顯著性界限。 結(jié)果： 1.HIF-1 α表達(dá)主要位于表皮角質(zhì)形成細(xì)胞與真皮淺層毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其周?chē)糠盅准?xì)胞胞漿。在

6、32例PS中，表皮層陽(yáng)性表達(dá)共25例，其中強(qiáng)陽(yáng)性7例，陽(yáng)性、弱陽(yáng)性各9例，陰性7例。正常對(duì)照組20例中，陰性14例，弱陽(yáng)性5例，陽(yáng)性1例，無(wú)強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，且表達(dá)主要在基底層；真皮層強(qiáng)陽(yáng)性1例，陽(yáng)性6例，弱陽(yáng)性15例，陰性10例，而20例正常對(duì)照組均為陰性表達(dá)。結(jié)果顯示，HIF-1 α在銀屑病中陽(yáng)性表達(dá)均比正常對(duì)照組增高，差異有非常顯著性(P＜0.01)，且在PS進(jìn)行期的表達(dá)高于靜止期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在不同性別、年齡及病

7、程之間均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 2.VEGF表達(dá)主要位于表皮全層的角質(zhì)形成細(xì)胞，真皮淺層血管內(nèi)皮細(xì)胞及其周?chē)糠盅准?xì)胞胞漿。在32例PS中，表皮層陽(yáng)性表達(dá)共26例，其中強(qiáng)陽(yáng)性5例，陽(yáng)性9例，弱陽(yáng)性12例，陰性6例；真皮層表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性2例，陽(yáng)性8例，弱陽(yáng)性15例，陰性7例。而對(duì)照組20例中，在基底層與棘層僅1例陽(yáng)性表達(dá)，8例弱陽(yáng)性表達(dá)，真皮血管內(nèi)皮細(xì)胞及炎細(xì)胞均無(wú)表達(dá)。結(jié)果顯示，VEGF在PS中的表達(dá)高于對(duì)照組，差異有非常顯

8、著性(P＜0.01)。進(jìn)行期的表達(dá)高于靜止期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，在不同性別、年齡及病程之間均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 3.CD34表達(dá)位于真皮淺層小血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿。PS患者M(jìn)VD值高于對(duì)照組，差異有非常顯著性(P＜0.01)；且進(jìn)行期皮損MVD值高于靜止期，差異有顯著性(P＜0.05)。 4 HIF-1 α和VEGF在PS患者同一皮損中的表達(dá)相關(guān)系數(shù)rs=0.791，有顯著性差異(P＜0.01)。

9、兩者呈正相關(guān)。 5我們以表皮層HIF-1 α明確表達(dá)陽(yáng)性的25例標(biāo)本為陽(yáng)性組，與另一組7例HIF-1 α明確表達(dá)陰性的標(biāo)本為陰性組進(jìn)行比較。HIF-1 α陽(yáng)性組MVD值高于HIF-1 α陰性組，兩者比較，差異有顯著性(P＜0.05)。 結(jié)論：根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出以下結(jié)論 1.HIF-1α在銀屑病主要表達(dá)于表皮細(xì)胞、真皮淺層毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其周?chē)糠盅准?xì)胞胞漿，并明顯高于對(duì)照組，且進(jìn)行期皮損明顯高于靜止期。提示銀屑病

10、存在缺氧與缺氧適應(yīng)性反應(yīng)；同時(shí)HIF-1 α與銀屑病的疾病進(jìn)展有關(guān)。 2.VEGF在銀屑病表達(dá)主要位于表皮細(xì)胞、真皮淺層血管內(nèi)皮細(xì)胞及其周?chē)糠盅准?xì)胞胞漿，并明顯高于對(duì)照組，且進(jìn)行期高于靜止期。提示VEGF在銀屑病血管生成中起重要作用，并與其疾病進(jìn)展有關(guān)。 3.銀屑病患者組MVD值明顯高于對(duì)照組，且進(jìn)行期高于靜止期，表明銀屑病的微血管生成較健康皮膚增高，提示MVD可作為判斷病情的指標(biāo)之一。 4 HIF-1α與VE