小麥抗條銹病基因YrV23的微衛(wèi)星標(biāo)記與定位.pdf

1、本研究以通過回交轉(zhuǎn)育方法將小麥條銹菌國際鑒別寄主Vilmorin23的抗條銹基因?qū)氲捷喕赜H本Taichung29中育成的抗條銹近等基因系Taichung29*6/Vilmorin23為目的基因供體材料。采用常規(guī)雜交分析方法，用2E16菌系，對輪回親本Taichung29、近等基因系Taichung29*6/Vilmorin23、基因供體Vilmorin23及其雜交、回交所獲的F1代、F2代和BC1代進行了抗性鑒定和統(tǒng)計分析，明確其抗條

2、銹病基因及遺傳特點。結(jié)果表明，近等基因系Taichung29*6/Vilmorin23及抗性基因供體Vilmorin23對2E16菌系表現(xiàn)高抗，侵染型為0；型，輪回親本Taichung29對2E16菌系表現(xiàn)高感，侵染型為4型。F1代侵染型均為0，與Taichung29*6/Vilmorin23表現(xiàn)一致，說明Taichung29*6/Vilmorin23對2E16菌系的抗性為顯性遺傳。在Taichung29*6/Vilmorin23與Ta

3、ichung29雜交所獲的F2代群體的125株抗、感單株中，有101株表現(xiàn)抗病，24株感病，經(jīng)x2檢驗，符合由1對顯性基因控制的3R：1S的分離比例(x2{3：1}=2.24，P＞0.05)。測交所獲BC1代的18株抗、感單株中，有11株抗病，6株感病，符合由1對顯性基因控制的1R：1S的分離比例(x2{1：1}=1.77，P＞0.05)。測交的分析結(jié)果與F2代相一致，說明近等基因系Taichung29*6/Vilmorin23對2E1

4、6菌系的抗性由1對顯性抗條銹病基因所控制?！　〔捎肧SR標(biāo)記定位技術(shù)，選用YrV23所在2B染色體上的55對SSR引物，對近等基因系Taichung29*6/Vilmorin23、輪回親本Taichung29和抗性基因供體Vilmorin23的基因組DNA進行PCR擴增和聚丙烯酰胺凝膠電泳分析。結(jié)果顯示，有2對引物Wmc356和Wms191在近等基因系及其輪回親本之間呈共顯性多態(tài)性擴增，且近等基因系擴增出與抗性基因供體Vilmorin

5、23相同的多態(tài)性片段。　　由F2代群體隨機取樣，檢測標(biāo)記位點與YrV23基因的遺傳連鎖性，并確定遺傳距離。用150株F2代單株檢測標(biāo)記位點Wmc356，發(fā)現(xiàn)其中137株的擴增帶型與抗性鑒定結(jié)果相符，即抗病單株擴增出與近等基因系相同的帶型或雜合帶型，感病單株擴增出與感病的輪回親本相同的帶型，但有13株擴增帶型與抗性鑒定結(jié)果不一致，即發(fā)生了交換，用MapMaker3.0軟件計算，確定該標(biāo)記位點與抗條銹基因YrV23緊密連鎖，遺傳距離為9.

6、4cM。用150株F2代單株檢測標(biāo)記位點Wms191,發(fā)現(xiàn)其中121株的擴增帶型與抗性鑒定結(jié)果相符，29株擴增帶型與抗性鑒定結(jié)果不符，用MapMaker3.0軟件計算，確定該標(biāo)記位點與抗條銹基因YrV23連鎖，遺傳距離為19.3cM。而選用Yr3所在1B染色體上69對引物對近等基因系Taichung29*6/Vilmorin23、輪回親本Taichung29和抗性基因供體Vilmorin23的基因組DNA進行PCR擴增和聚丙烯酰胺凝膠電