虹鱒(Oncorhynchus mykiss)染色體顯帶技術(shù)研究.pdf

1、虹鱒（Oncorhynchus mykiss）是世界上養(yǎng)殖范圍最廣的名貴魚類。為了更好地認識虹鱒的染色體特征，豐富冷水性魚類的細胞遺傳學內(nèi)容，為其遺傳、變異、分類、系統(tǒng)演化以及雜交育種提供科學依據(jù)，本文對虹鱒染色體多重顯帶技術(shù)進行了詳細的研究。
　　采用腎細胞體內(nèi)培養(yǎng)法或淋巴細胞培養(yǎng)法制備虹鱒的染色體。對其腎細胞染色體數(shù)目統(tǒng)計分析表明，虹鱒染色體組有60條染色體，核型公式為2n=34m+10sm+16t，染色體總臂數(shù)(NF)為10

2、4。最長染色體的相對長度為6.03，最短染色體的相對長度為2.15，長度比為2.80。采用流式細胞分析儀，測定了虹鱒的DNA含量，與雞血細胞標準對照相比為1.59±0.23，以雞紅細胞DNA含量2.3 pg.N-1計，則虹鱒體細胞絕對DNA含量為3.65pg.N-1。與鮭形目其他科的四倍體魚類比較，虹鱒的染色體數(shù)眉和DNA含量具有相似性，體現(xiàn)出四倍體特征。
　　經(jīng)過C顯帶處理，虹鱒染色體除呈現(xiàn)傳統(tǒng)的著絲粒區(qū)、近著絲粒粒區(qū)、中間區(qū)和

3、末端區(qū)外，還發(fā)現(xiàn)某些染色體全部出現(xiàn)C帶及部分染色體出現(xiàn)可變帶。在分析比較虹鱒不同的染色體C帶中期相時，發(fā)現(xiàn)有些部位的C帶會出現(xiàn)顯色的改變，有時呈陰性帶，有時呈陽性帶。同源染色體的C帶的大小、位置及著色強度基本相同，不同染色體的C帶有一定差異。中部著絲點染色體均在著絲粒部位處深染。虹鱒的染色體C帶類型多為著絲粒C帶，多數(shù)染色體的著絲點區(qū)均顯示出一個深淺不同的C帶。
　　用修改的G顯帶技術(shù)，進行GTG帶紋的顯示，虹鱒魚每條染色體上都能

4、清晰的顯出G帶，G陽性帶對應于AT含量豐富的區(qū)域，可見虹鱒染色體上AT序列比較密集，經(jīng)G顯帶技術(shù)處理后，87％的染色體區(qū)域呈現(xiàn)陽性染色。
　　用銀染技術(shù)處理后發(fā)現(xiàn)虹鱒的NORs位于第1號染色體和第13號染色體的長臂上，數(shù)目為4個。
　　在DNA復制的不同時期，復制帶隨之變化,在DNA復制的不同時期，同一條染色體的形態(tài)隨著DNA的復制不斷變化。染色體的形態(tài)是動態(tài)變化的。
　　應用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)，將虹鱒生長激

5、素基因準確定位在染色體上。目前檢測到生長激素基因位于2對頂端著絲粒類型的染色體上。本實驗將雜交信號和染色體同時顯示，并且在復染的同時結(jié)合染色體分帶技術(shù)，可以精確的進行基因定位。與經(jīng)濟效益密切相關(guān)的QTL基因的FISH定位是我們以后研究的重點。
　　虹鱒染色體被CMA3熒光染色后，用B（藍色激發(fā)光）激發(fā)時，發(fā)現(xiàn)NORs區(qū)呈現(xiàn)明亮的熒光。虹鱒魚長臂處具有4個大小約相等的Ag-NORs，經(jīng)CMA3染色，長臂處具有大小相差約3-4倍的4個