煙草西柏三烯二醇檢測方法及其積累動態(tài)、分布研究.pdf

1、西柏三烯二醇（CBT-二醇）是煙草腺毛分泌物中含量最豐富的化合物，CBT-二醇不僅是卷煙香氣的重要前體物質，還具有抗腫瘤、神經保護劑、抑菌、殺蟲等多種生物活性。本研究以建立高通量CBT-二醇檢測技術，尋找富含CBT-二醇的煙草資源為目標，優(yōu)化了鮮煙葉CBT-二醇提取方式，分別研究了煙草CBT-二醇的液相色譜檢測技術以及CBT-二醇與煙草其他活性成分（維生素E、植物甾醇）的同時提取、氣質聯用檢測技術，開展了CBT-二醇在煙草不同器官中分布

2、、積累動態(tài)及在煙草類型、品種間含量差異研究。主要結果如下：
　　1.采用半葉法研究了鮮煙葉干燥、粉碎后提取、測定CBT-二醇含量與傳統(tǒng)溶劑洗刷法的差異。結果顯示：鮮煙葉45-70℃條件下烘干或冷凍干燥后粉碎，然后用溶劑提取并測定CBT-二醇含量，與傳統(tǒng)的溶劑洗刷法相比，二者測定結果無顯著差異，且該方法更節(jié)約溶劑，方便批量操作。
　　2.超高效液相色譜檢測煙草α-CBT-二醇、β-CBT-二醇樣品前處理條件及步驟為：以乙酸乙酯

3、為萃取劑，料液比為1:50，超聲頻率為45KHz，室溫提取10min，離心后取1mL提取液，氮氣吹干，用2mL75％甲醇溶解獲得待測液；色譜條件為：以BEH C18（1.7um2.1*50mm）為分離色譜柱，以75%甲醇為流動相，流速0.3L/min，柱溫35℃，檢測波長200nm。方法加標回收率及精密度測試符合定量分析要求，且方法操作步驟簡單、溶劑用量少，檢測周期短。
　　3.在單因素試驗的基礎上，通過正交試驗建立了氣質聯用法同

4、時檢測煙草CBT-二醇與維生素E、植物甾醇的樣品前處理條件：稱取樣品0.1g，加入等量維生素C作為抗氧化劑，以2mol/L氫氧化鉀的95%乙醇溶液作為提取劑及皂化劑（料液比30:1），超聲條件下60℃提取、皂化40min，皂化完成后加入5mL正己烷及6倍皂化劑體積的水，使正己烷萃取的目標化合物與皂化劑及其他水溶性雜質分離；同時建立了氣質聯用測定目標化合物的儀器條件。該方法加標回收率及精密度測試符合定量分析要求，操作步驟簡單，適用于高通量

5、檢測。
　　4.NC89、CF87品種不同部位煙葉CBT-二醇含量均在開花期呈顯著降低趨勢，打頂后，中、上部葉CBT-二醇含量呈先升高后降低的趨勢。隨煙株生長，NC89、CF87品種煙株CBT-二醇積累量均呈先升高后降低的趨勢，在開花期或打頂后2周積累量達最大值。
　　5.CBT-二醇在煙草不同器官或組織中的含量順序為：花>葉>主脈>莖。其中，煙草花萼含量大于花瓣，煙花在蕾期含量最高，煙花開放后其含量降低，不同部位葉片 CB