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文檔簡介
1、目的:
建立穩(wěn)定的慢性非細菌性前列腺炎(CNP)SD大鼠模型。通過檢測假手術(shù)對照組及CNP大鼠模型探討腦鈉尿肽(BNP)及腦鈉尿肽受體(NPR-A)在慢性非細菌性前列腺炎(CNP)大鼠脊髓背角神經(jīng)節(jié)L6-S1(DRG)中的表達情況,觀察BNP及NPR-A的表達變化,以及CNP引起的慢性病理性疼痛與BNP、NPR-A之間的關(guān)系。
方法:
1.本實驗在南昌大學第一附屬醫(yī)院泌尿外科研究所內(nèi)完成。選擇清潔型 SD大
2、鼠100只(全部為雄性),適應性飼養(yǎng)1周后,隨機分為5組分別為:對照組,向前列腺內(nèi)注射生理鹽水0.1ml;實驗組:3d造模組、7d造模組、10d造模組,14d造模組,向前列腺內(nèi)注射完全弗氏佐劑(CFA)0.1ml構(gòu)建慢性非細菌性前列腺炎大鼠模型,以上每組均為20只。
2.根據(jù)不同的造模時間點分別提取對照組及各個實驗組SD大鼠的脊髓背角L6-S1段神經(jīng)節(jié)。
3.將其中各組10只的 L6-S1神經(jīng)節(jié)段組織中提取 RNA,
3、進行逆轉(zhuǎn)錄成cDNA、再行實時熒光定量 PCR,觀察和計算在對照組及造模后各個時間點中BNP及NPR-A表達及其差異,研究BNP、NPR-A在慢性非細菌性前列腺炎中的表達、意義及其相關(guān)性。
4.應用免疫組化SP方法檢測另外各組10只的L6-S1神經(jīng)節(jié)中BNP、NPR-A中的表達及其差異,研究BNP、NPR-A在慢性非細菌性前列腺炎中的表達、意義及其相關(guān)性。
結(jié)果:
1.熒光定量PCR所顯示的結(jié)果是BNP在實
4、驗造模組的表達量比較對照組均為上調(diào)。3d造模組、7d造模組、10d造模組,14d造模組比較對照組分別是1.53±0.28倍,2.10±0.32倍,1.85±0.26倍,1.77±0.35倍。熒光定量PCR所顯示的結(jié)果是 NPR-A在實驗造模組的表達量比較對照組均為上調(diào)。3d造模組、7d造模組、10d造模組,14d造模組比較對照組分別是1.47±0.21倍,2.05±0.26倍,1.98±0.31倍,1.67±0.23倍。其中7d造模組、
5、10d造模組和14d造模組與對照組比較差異,有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2.免疫組化方法所顯示的結(jié)果是BNP及NPR-A在神經(jīng)節(jié)中的神經(jīng)纖維上著色,染色呈紅色,并且在實驗造模組的染色強度高于對照組。BNP及NPR-A的平均光密度值(OD值)在實驗造模組的表達量比較對照組均為上調(diào)。其中7d、10d和14d造模組與對照組比較差異具有統(tǒng)計學意義(*P<0.05)。
結(jié)論:
利用完全弗氏佐劑(CFA)前列腺注射
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