應(yīng)用ISSR技術(shù)和觀賞性狀變異特性篩選蝴蝶蘭雜交親本.pdf

1、雜交育種是蝴蝶蘭主要的育種手段，但有關(guān)蝴蝶蘭雜交親本篩選依據(jù)的研究甚少。目前，蝴蝶蘭新品種的選育往往是憑經(jīng)驗(yàn)盲目的去選擇親本，缺乏科學(xué)有效的評(píng)價(jià)依據(jù)和手段，許多優(yōu)良組合漏選，雜交育種效率低。為此，開(kāi)展蝴蝶蘭雜交親本篩選依據(jù)研究，了解各觀賞性狀的變異特性和遺傳潛力，減少育種工作中親本選配的盲目性，以獲得具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的觀賞性狀或雜交組合，提高育種效率具有重要的意義。
　　本文通過(guò)調(diào)查福建地區(qū)蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀，總結(jié)了蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)面臨的危

2、機(jī)。同時(shí)，從ISSR分子標(biāo)記和觀賞性狀變異特性兩個(gè)方面研究了篩選蝴蝶蘭雜交親本的依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　1.通過(guò)實(shí)地調(diào)查和數(shù)據(jù)、文獻(xiàn)分析，總結(jié)出福建地區(qū)蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)面臨的危機(jī)，表現(xiàn)為：供需失衡，種苗產(chǎn)量過(guò)大；種苗市場(chǎng)混亂，缺乏品質(zhì)保障；缺乏良好的品種選育體系，品種結(jié)構(gòu)單一。
　　2.從DNA產(chǎn)量和質(zhì)量，以及經(jīng)濟(jì)性和操作性四個(gè)方面綜合對(duì)比分析了改良CTAB法、改良SDS法、高鹽低pH法和試劑盒法在提取蝴蝶蘭基因組DNA中的

3、優(yōu)勢(shì)和不足，得出最適宜的提取蝴蝶蘭基因組DNA的方法為改良CTAB法。
　　3.利用性狀差異較大的兩個(gè)蝴蝶蘭樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增的單因素試驗(yàn)，逐一篩選ISSR反應(yīng)條件，再通過(guò)正交試驗(yàn)，建立了蝴蝶蘭ISSR-PCR最優(yōu)反應(yīng)體系。挑選不同花色的蝴蝶蘭代表資源從100個(gè)ISSR引物中篩選出10個(gè)多態(tài)引物，并確定了最佳退火溫度。根據(jù)Jaccard相異系數(shù)，對(duì)82份蝴蝶蘭資源進(jìn)行聚類分析。結(jié)果表明，聚類情況與形態(tài)學(xué)特征有一定的關(guān)系，但遺傳聚類

4、組的劃分與花色等性狀并未見(jiàn)必然的聯(lián)系。
　　4.通過(guò)ISSR分子標(biāo)記技術(shù)，可以進(jìn)行蝴蝶蘭種質(zhì)資源親緣關(guān)系的分析，根據(jù)ISSR分析的結(jié)果指導(dǎo)雜交親本的選配工作。選擇親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的材料，有利于增加后代的遺傳變異，選育出雜交優(yōu)勢(shì)強(qiáng)、綜合性狀較好的優(yōu)良品種。本實(shí)驗(yàn)82份蝴蝶蘭種質(zhì)資源兩兩間的GS值在0.210~0.811之間，說(shuō)明品種間的遺傳距離較大，如果作為親本進(jìn)行雜交，能獲得更大的分離群體供選擇。例如本試驗(yàn)中蝴蝶蘭2096和2094都

5、為白色花瓣，其遺傳相似系數(shù)為0.411，可以嘗試進(jìn)行雜交，以期獲得優(yōu)良淺色系的品種。
　　5.對(duì)比2047×2058和2109×2084兩組蝴蝶蘭雜交組合可以看出，父母本之間性狀差異越大，子代發(fā)生變異的概率越高，變異的類型也更加豐富，有可能獲得新奇品種。F1代在葉形、花翼瓣排列方式、花序長(zhǎng)度等方面的變異系數(shù)較大，表明 F1代在葉形、花翼瓣排列方式、花序長(zhǎng)等觀賞性狀方面比雙親有更大的變異，是 F1代選擇優(yōu)良單株的重要依據(jù)。從雜種優(yōu)勢(shì)

6、和相對(duì)遺傳力分析來(lái)看，兩組雜交組合 F1代表現(xiàn)的優(yōu)勢(shì)性狀和相對(duì)遺傳力分析結(jié)果不同，表明雜種優(yōu)勢(shì)性狀和相對(duì)遺傳力分析較為復(fù)雜，需要進(jìn)一步研究。
　　6.分析雜交組合2047×2058，母本2047性狀分離情況可以發(fā)現(xiàn)：F1代翼瓣和萼瓣顏色主要受母本影響。結(jié)合臺(tái)灣糖業(yè)研究所的研究結(jié)果，推測(cè)蝴蝶蘭紅色花色對(duì)白色花色是顯性，紅花花瓣和萼瓣受同一對(duì)基因控制。另外，兩組雜交組合F1代中央裂片頂端形狀和翼瓣形狀都與父本保持一致，推測(cè)中央裂片頂端

7、形狀和翼瓣形狀兩個(gè)性狀主要受父本影響。
　　7.通過(guò)調(diào)查21個(gè)親本和用這些親本配制的203個(gè)F1代的主要觀賞性狀，并整理數(shù)據(jù)。本試驗(yàn)以F1代花朵數(shù)作為因變量為例，親本的冠幅、葉數(shù)、葉長(zhǎng)寬、花序長(zhǎng)度、花梗長(zhǎng)、花縱徑、花橫徑、翼瓣花色類型等性狀作為自變量，利用SAS統(tǒng)計(jì)軟件做逐步回歸分析，建立了F1代花朵數(shù)和親本主要性狀的線性回歸預(yù)測(cè)模型：
　　B7_1=12.885+0.267*B13_2+1.047*B14_2+1.187*