三葉因子1mRNA在胃癌組織中的表達(dá)及其DNA甲基化研究.pdf

1、研究背景:胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，常用的治療手段為手術(shù)治療和化療，但它們的療效均不令人滿意，其總體5年生存率低于30％，因此，進(jìn)一步闡明胃癌的發(fā)生及發(fā)展機(jī)制對于胃癌的治療具有重要的指導(dǎo)意義。近年來，隨著腫瘤分子生物學(xué)研究的進(jìn)展，越來越多的證據(jù)表明，胃癌的發(fā)生是多種因素共同作用的結(jié)果，包括癌基因的激活、抑癌基因的失活、染色體的雜合性缺失、DNA損傷修復(fù)機(jī)制的破壞等。另外，表觀遺傳改變在基因表達(dá)的調(diào)控中起關(guān)鍵作用，它是指非基因序列改

2、變所致基因表達(dá)水平的變化，如DNA甲基化與組蛋白修飾。大量動物實驗證明，在哺乳動物體內(nèi)，三葉因子1具有粘膜保護(hù)與上皮重建、腫瘤抑制、信號傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡等功能。三葉因子1在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及機(jī)制值得進(jìn)一步研究。 目的: 通過檢測在胃癌、癌旁及正常組織中三葉因子1 mRNA的表達(dá)情況及其DNA啟動子甲基化情況，進(jìn)一步探討三葉因子1與胃癌發(fā)生、發(fā)展之間的關(guān)系，并試圖闡明它作用的機(jī)制。 方法: 44例人

3、胃癌、癌旁及遠(yuǎn)癌正常組織標(biāo)本取自空軍總醫(yī)院及301醫(yī)院手術(shù)及病理確診的胃癌患者(術(shù)前未做放化療)，15例良性潰瘍旁正常組織取自空軍總醫(yī)院及301醫(yī)院手術(shù)及病理確診患者。用半定量RT—PCR的方法檢測胃癌、癌旁、遠(yuǎn)癌正常組織及良性潰瘍旁正常組織中三葉因子1 mRNA的表達(dá)水平，其表達(dá)水平以PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果的灰度值與相應(yīng)內(nèi)參照GAPDH的比值表示。使用SPSS軟件包用方差分析及LSD—T檢驗進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，認(rèn)為p<0.05具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意

4、義。用限制性內(nèi)切酶-PCR法檢測胃癌組織、癌旁組織、遠(yuǎn)癌正常組織及良性潰瘍旁正常組織中三葉因子1的DNA啟動子甲基化情況，分析其結(jié)果及意義。 結(jié)果:胃癌組織中三葉因子1 mRNA表達(dá)水平顯著低于癌旁、遠(yuǎn)癌正常組織及良性潰瘍旁正常組織，癌旁三葉因子1 mRNA表達(dá)水平高于遠(yuǎn)癌正常組織中三葉因子1 mRNA表達(dá)水平，癌旁三葉因子1 mRNA表達(dá)水平與良性潰瘍旁正常組織無顯著差異；44例胃癌組織中三葉因子1的DNA啟動子發(fā)生甲基化例數(shù)

5、為18例(甲基化率為40％)，癌旁、遠(yuǎn)癌正常組織及良性潰瘍的正常組織未見甲基化。 結(jié)論: 胃癌組織中三葉因子1 mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)或表達(dá)缺失，提示三葉因子1可能是胃癌的抑制因子，胃癌組織中三葉因子1有較高的甲基化率，提示胃癌的發(fā)生可能與三葉因子1的DNA啟動子甲基化有關(guān)，胃癌組織中三葉因子1 mRNA表達(dá)減少或缺失可能與其DNA啟動子甲基化有關(guān)。同時也提供了一個潛在的胃癌治療的靶點，但其參與胃癌發(fā)生、發(fā)展的具體分子