大黃對糖尿病血管病變保護(hù)機(jī)制的臨床與動物實驗研究.pdf

1、目的：分析既往文獻(xiàn)表明清熱類中藥具有抗動脈粥樣硬化的作用，糖尿病為動脈粥樣硬化的一個獨立危險因素，其在動脈硬化的發(fā)生發(fā)展中扮演了重要角色，因而在臨床當(dāng)中糖尿病患者合并動脈硬化非常多見。我們選取清熱類中藥一大黃進(jìn)行研究，探討其對糖尿病血管病變的保護(hù)機(jī)制，為臨床防治糖尿病動脈硬化提供一條途徑。 方法：1 動物實驗部分：將50只大鼠隨機(jī)分為正常組12只，造模組38只。造模組大鼠禁食12h后腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg，7

2、2h后尾靜脈取血測血糖≥16.7mmol/L、尿糖+++～++++，確定為糖尿病大鼠。成模后，隨機(jī)抽取24只分為糖尿病對照組(12只)及大黃組(12只)，大黃組即給予大黃煎劑2ml灌胃，其余兩組每日給予同等劑量純凈水灌胃。實驗期間，大鼠自由進(jìn)食水，持續(xù)給藥8周，禁食12h后，尾靜脈取血測定血糖，然后麻醉，腹主動脈取血收集血標(biāo)本，血清硝酸還原酶法測定一氧化氮(NO)，血漿放免法測定內(nèi)皮素-1(ET-1)。大鼠取血后，迅速打開胸腔，切取胸主

3、動脈段，剪成長約3mm的動脈環(huán)。懸置于血管浴槽內(nèi)，用10<'-6>mol/L的Ach檢測內(nèi)皮完整性，選擇能抑制由0.62×10<'-6>mol/L NE引起血管收縮30％以上的血管用于實驗，觀察不同累積濃度的Ach對NE引起的血管收縮的抑制率。留取胸主動脈時，另留取一段制備病理切片，SP法免疫組化染色，應(yīng)用彩色病理圖文分析系統(tǒng)計算病理切片組織中細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)及血管細(xì)胞間粘附分子-1(VCAM-1)陽性染色面積與視窗面

4、積的百分比。2.臨床試驗部分：臨床中選擇有便秘的糖尿病患者60例，隨機(jī)分為三組：糖尿病對照組20例，通便靈組20例，大黃治療組20例。給藥1個月后，取血血漿應(yīng)用放免法測定ET-1，血清硝酸還原酶法測定NO，并與給藥前進(jìn)行比較。3.統(tǒng)計學(xué)處理：數(shù)據(jù)以X±s表示，應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件系統(tǒng)，組間比較采用方差分析，自身前后對照比較應(yīng)用配對t檢驗。 結(jié)果：1.動物實驗部分：①糖尿病對照組及大黃組血糖較成模時血糖變化無明顯差異(P

5、=0.95)，大黃組與糖尿病對照組相比差別無顯著意義(P>0.05)，正常組灌胃前后血糖亦無顯著性差異(P>0.05)。②經(jīng)過8周后，糖尿病對照組及大黃組與正常組相比血漿內(nèi)皮素-1明顯升高(P<0.05)；大黃組與糖尿病對照組相比血漿內(nèi)皮素明顯下降，(P<0.05)。糖尿病對照組及大黃組與正常組相比，NO明顯下降(P<0.05)；糖尿病對照組與大黃組相比NO明顯下降，(P<0.05)。③糖尿病對照組血管環(huán)對去甲腎上腺素(NE)收縮反應(yīng)明

6、顯強(qiáng)于正常對照組及大黃組(P<0.05)，且大黃組對NE的收縮反應(yīng)亦強(qiáng)于正常組(P<0.05)。當(dāng)各組收縮達(dá)坪值后，然后按遞增濃度給藥法給予乙酰膽堿(Ach)(10<'-8>～10<'-5>)。結(jié)果顯示，各組胸主動脈環(huán)呈濃度依賴性抑制NE引起的血管收縮。在相同Ach濃度下，糖尿病對照組及大黃組胸主動脈環(huán)對Ach的舒張作用明顯弱于正常組(P<0.05)，糖尿病對照組胸主動脈環(huán)對Ach的舒張作用亦明顯弱于大黃組(P<0.05)。④胸主動脈I

7、CAM-1及VCAM-1的表達(dá)。 正常組僅見較少的棕黃色顆粒狀陽性染色物質(zhì)表達(dá)；糖尿病對照組可見大量的棕黃色顆粒狀陽性染色物質(zhì)表達(dá)，部分融合成片，陽性染色百分比明顯高于正常組(P<0.05)；大黃組棕黃色顆粒狀陽性染色物質(zhì)表達(dá)明顯低于糖尿病對照組(P<0.05)，但高于正常組(P<0.05)。2.臨床試驗部分：糖尿病對照組及通便靈組治療前后血漿ET-1及血清NO無明顯變化(P>0.05)，且1個月后通便靈組與糖尿病對照組相比血漿

8、ET-1及血清NO亦無明顯變化(P>0.05)；大黃組治療后血漿ET-1較治療前明顯下降(P<0.05)，血清NO明顯上升(P<0.05)；大黃組治療后血漿ET-1較糖尿病對照組及通便靈組明顯下降(P<0.05)，血清NO明顯上升(P<0.05)。 結(jié)論：1.本研究復(fù)制的糖尿病大鼠模型經(jīng)過3個月及6個月后存在內(nèi)皮功能障礙；2.糖尿病大鼠血管環(huán)對NE誘導(dǎo)的收縮作用增強(qiáng)；3.大黃具有降低糖尿病大鼠ET-1及升高NO的作用；能夠保護(hù)內(nèi)