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文檔簡(jiǎn)介
1、銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)是一種分布廣泛的條件致病菌,有多種毒力因子,如彈性蛋白酶、堿性蛋白酶和一些小分子的次級(jí)代謝物如鼠李脂、綠膿素(pyocyanin)等,所以常在臨床上引起頑固性、難治性感染,成為臨床治療的棘手問題。綠膿素作為綠膿桿菌最重要的一種色素,具有很強(qiáng)的致病性。 本文以一株臨床分離的銅綠假單胞菌PA68做受體菌,應(yīng)用Mu轉(zhuǎn)座復(fù)合物技術(shù)研究銅綠假單胞菌色素合成與調(diào)控的機(jī)制。 本
2、文首次將Mu轉(zhuǎn)座復(fù)合物技術(shù)應(yīng)用到假單胞菌的功能基因組研究,成功優(yōu)化條件將Mu轉(zhuǎn)座復(fù)合物轉(zhuǎn)入到銅綠假單胞菌PA68中,得到3.66x104CFU/μgDNA的高轉(zhuǎn)化效率,構(gòu)建了菌株P(guān)A68的Mu轉(zhuǎn)座突變文庫。通過一系列的表型篩選,得到8株色素合成能力改變的突變子。經(jīng)基因克隆、核苷酸測(cè)序研究,證明轉(zhuǎn)座子分別插入到hmgA、ptsP、sucC、phzS、phzF1五個(gè)基因中。hmgA基因轉(zhuǎn)座失活導(dǎo)致酪氨酸分解代謝中間產(chǎn)物尿黑酸的積累,后四種情
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