DNA芯片技術檢測HBV-DNA多點基因突變的臨床研究.pdf

1、目的；利用基因芯片技術分析乙肝病毒閱讀框架多位點變異及其在不同的人群中、不同的治療條件下的分布和臨床意義，為臨床的珍斷和個性化治療提供科學依據，并對病人的預后和轉歸做出判斷。 方法；采集114例慢乙肝患者血清其中輕度9例，中度51例，重度15例，肝硬化30例，重型肝炎9例，分別按性別及治療條件的不同設立為男女對照組,HbeAg陽性和抗-Hbe陽性對照組，應用拉米夫定或干擾素抗病毒治療和未進行抗病毒治療的對照組以及應用拉米夫定治療

2、和應用干擾素治療對照組。通過乙肝基因芯片技術檢測各型肝炎以及各對照組中乙肝病毒閱讀框架pre-1814、pre-1896、BCP1762、BCP1764、P528、P552六個位點的變異，并分析其在不同的人群中及不同的治療條件下分布的意義。同時隨機選用應用芯片檢測的位點變異陽性的血清做全基因序列測序以證實基因芯片方法的準確性。 結果；6個位點的變異在不同的對照組中均有分布。其中pre-1814在慢乙肝輕度、中度、重度以及肝硬化、

3、重型肝炎中的變異率分別是0、0、0、10％、0；pre-1896的變異率分別是33.3％、41.2％、46.6％、53.3％、44.4％；BCP1762的變異率分別是33.3％、76.5％、80.0％、90.0％、100％；BCP1764的變異率分別是44.4％、70.6％、73.3％、80.0％、100％；P528的變異率分別是22.2％、17.6％、20.0％、26.7％、22.2％；P552的變異率分別是22.2％、41.2％、4

4、6.6％、36.7％、44.4％。 男女對照組中pre-1814、pre-1896、BCP1762、BCP1764、P552五個位點的變異頻率無差別，P528位點的變異在男性中高于在女性中的分布(p＜0.05)，有明顯差異；HbeAg陽性和抗-Hbe陽性對照組中pre-1814、BCP1762、BCP1764、P528、P552五個位點的變異頻率無差別，pre-1896變異在抗-Hbe陽性的病人組中高于HbeAg陽性的病人組(p

5、＜0.05)，有明顯差異；應用拉米夫定或干擾素抗病毒治療和未進行抗病毒治療的對照組中pre-1814、pre-196、BCP1762、BCP1764、P528五個位點的交異頻率無差別，P552變異在應用拉米夫定或干擾素抗病毒治療組中高于未進行抗病毒治療組(p＜0.05)，有明顯差異；應用拉米夫定治療和應用干擾素治療對照組中，pre-1814、pre-1896、BCP1762、BCP1764、P528五個位點的變異頻率無差別，P552變異

6、在應用拉米夫定治療組中高于干擾素治療組(p＜0.05)，有明顯差異。全基因序列測定結果與基因芯片所測陽性結果完全吻合。 結論；基因芯片是有效的的檢測HBV多點基因突變的方法。HBV基因多點突變廣泛存在。BCP1762、1764位點的變異與慢乙肝的重型化相關，兩個位點的聯合變異尤以明顯。山東地區(qū)抗-Hbe陽性、HBV-DNA陽性的慢乙肝病例中，以pre-1896位點的變異為常見。拉米夫定與HBV-P-552位點發(fā)生變異密切相關，但