庫姆塔格沙漠微生物物種多樣性及建蘭炭疽病菌拮抗菌株的篩選.pdf

1、本淪文通過可培養(yǎng)方法從庫姆塔格沙漠土壤樣品獲得菌株，依據(jù)平板上菌落形態(tài)的不同進行菌株的分離純化及16S rDNA序列測定，并對菌株進行種屬鑒定及種群多樣性分析。然后從分離保存的菌株中，通過平板對峙法和平板擴散法篩選得到一株對建蘭炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）具有較高拮抗活性的菌株N147-1-3，并對菌株進行16SrDNA序列分析和生理生化試驗鑒定，最后對抑菌物質(zhì)進行初步探索，并對性質(zhì)做了分析。

2、研究結(jié)果如下:
　　利用兩種培養(yǎng)基(R2A、1/4R2A)對從庫姆塔格沙漠的9份土壤樣品進行分離菌株，共得到190株菌株。菌株主要分布在在厚壁菌門(Firmicutes)、變形菌門(Proteobacteria)和放線菌門(Actinobacteria)，經(jīng)統(tǒng)計該沙漠區(qū)域內(nèi)分離的菌株共有30個屬，57種，其中芽孢桿菌有119株，占總菌株數(shù)的63％，為該沙漠區(qū)域的優(yōu)勢種。潛在的新種有22株，經(jīng)與EzBioCloud網(wǎng)站數(shù)據(jù)已知序列的

3、相似性相比在97.5％以下，占總菌株的11％，有待進一步研究。對R2A培養(yǎng)基和1/4R2A培養(yǎng)基分離的菌株的種群多樣性的四個參數(shù)為:R2A:物種豐富度(S)為12.37±56.55、優(yōu)勢度指數(shù)(D)為0.2913±0.0536、Shannon-Wiener(H)為1.3262±0.3612、均勻度指數(shù)(E)為0.6034±0.0312。1/4R2A:物種豐富度(S)為10.62±41.41、優(yōu)勢度指數(shù)(D)為0.3566±0.0544、

4、Shannon-Wiener(H)為1.3025±0.3576、均勻度指數(shù)(E)為0.6066±0.0476。
　　從分離保存的菌株中篩選得到一株對建蘭炭疽病菌有較高活性的菌株N147-1-3，經(jīng)16S rDNA序列分析和生理生化試驗結(jié)果，將菌株鑒定為甲基營養(yǎng)性芽孢桿菌（Bacillus methylotrophicus）。菌株抑菌物質(zhì)的搖瓶發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果為:5.0％蔗糖，2.0％NaNO3，0.05％CaCl2和0.3％KNO