外源性磷酸肌酸對先心病直視手術患者心肌細胞超微結構及凋亡的影響.pdf

1、目的：體外循環(huán)心內直視手術中良好的心肌保護是確保手術成功的重要手段。冷晶體停跳液是目前心肌保護普遍應用的方法之一，它能使心肌處于舒張停跳狀態(tài)，維持心肌低溫以降低心肌代謝及氧耗。然而在心臟阻斷期間，心肌細胞內三磷酸腺苷（ATP）、磷酸肌酸（CP）水平顯著下降，細胞內Ca2+代謝紊亂，氧自由基增加。冷晶體停跳液作為一種被動性保護措施是不能滿足長時間主動脈阻斷的心肌保護的要求。本實驗通過在先天性心臟病矯治術中提供外源性能量底物一磷酸肌酸（cr

2、eatine phosphate，CP），探討其心肌保護作用以及對心肌細胞超微結構及凋亡的影響。
　　 方法：
　　 1）先天性心臟病矯治術患兒40例，隨機分成兩組，實驗組（A）、對照組（B）每組20名。實驗組（A）：在改良St.Thomas'Ⅱ號心臟停搏液中加入注射用磷酸肌酸鈉（CP）濃度為10mmol/L；對照組（B）：常規(guī)使用改良St.Thomas'Ⅱ號心臟停搏液。兩組均采用Stockert-ShillyⅡ型體外循

3、環(huán)機，Minimax膜肺，常規(guī)體外循環(huán)（CPB）預充，Hct維持在0.20～0.28，ECC方法采用中低溫（27.2±2.1）℃，全身灌注流量1.6～2.8 L/（㎡.min），平均主動脈壓維持在40～60mmHg。兩組患兒均用泵灌注心臟停搏液，依心電活動情況確定心臟停搏液灌注次數(shù)，首次劑量為15～20 ml/kg，以后量減半。2）于麻醉后手術開始前、手術后6小時、12小時、24小時抽取靜脈血。心肺轉流前，上腔靜脈插管時剪取部分右心耳組

4、織；心臟復跳，停止心肺轉流拔除上腔靜脈插管時再剪取部分未被結扎過的右心耳組織。3）在抽血后2小時內，將標本在4℃條件下置入離心機3000rpm5分鐘取血清。心肌標本采集后部分立即浸入10％福爾馬林液保存，24小時內制成石蠟塊標本；部分立即侵入4％的戊二醛磷酸緩沖電鏡液中固定做電鏡觀察。4）兩組患兒體外循環(huán)CBP及手術均順利，最終均能成功脫機。5）檢測血清肌酸激酶同工酶、心肌肌鈣蛋白Ⅰ；電鏡觀察兩組心肌細胞超微結構變化；Tunel染色計算

5、心肌細胞凋亡指數(shù)。6）將收集到的數(shù)據(jù)輸入EXCEL數(shù)據(jù)庫，用STATA7.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)整理和分析，分析采用方差分析， P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 1）兩組患者術前基本情況：實驗組（A）男12例，女8例，年齡（6.5±+2.2）歲，體重（13.9±5.5）kg，其中室間隔缺損12例（合并房缺1例），房間隔缺損5例，法洛四聯(lián)癥3例；對照組（B）男11例，女9例，年齡（6.9±2.4）歲，體重（

6、14.3±5.2）kg，其中室間隔缺損13例（合并房缺2例），房間隔缺損4例，法洛四聯(lián)癥3例。開放升主動脈前后5 min均未用利多卡因，心律失常的發(fā)生率在兩組間比較無明顯差異（P>0.05）。2）手術結果：室間隔缺損單純縫合7例，修補18例；房缺全部補片，法洛四聯(lián)癥行根治術。全部病人體外循環(huán)順利手術順利，均痊愈出院。兩組間手術方式無顯著差異（p>0.05）。3）血清肌酸激酶同工酶CK-MB（nh/ml）術前、術后6小時、12小時和24小

7、時結果分別為：實驗組12.46±3.41、54.78±11.69、102.44±19.07、52.41±12.73；對照組10.75±4.23、68.98±15.64、129.57±26.25、79.87±14.30。兩組術前結果比較無差異（P>0.05），術后6小時、12小時和24小時3個時間點比較均有顯著差異（P<0.05），實驗組均低于對照組。5）心肌肌鈣蛋白Ⅰ cTnl（ng/ml）術前、術后6小時、12小時和24小時結果分別為

8、：實驗組0.03±0.02、9.85±1.89、12.08±1.4、10.73±2.12：對照組0.04±0.01、15.26±3.75、28.18±4.54、25.41±6.02；兩組間術前比較無差異（P>0.05），術后6小時、12小時和24小時3個時間點比較均有顯著差異（P<0.05），實驗組低于對照組。6）電鏡下觀察：術前心肌細胞超微結構兩組間無差異均為正常心肌細胞；轉流后對照組可見細胞間間隙增寬，胞漿，核膜腫脹，部分線粒體腫脹