肝X受體與小鼠心臟功能及能量代謝的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分、肝X受體抑制小鼠病理性心肌肥厚
　　 目的:近年來研究發(fā)現(xiàn)多種核受體家族成員包括肝X受體在抑制機體炎癥反應(yīng)中起到不同程度的作用,但在心肌細胞炎癥反應(yīng)以及心肌肥厚方面卻無研究。本文通過體內(nèi)及體外實驗,研究肝X受體是否對病理性刺激后小鼠心臟細胞炎癥反應(yīng)以及病理性心肌肥厚反應(yīng)具有調(diào)節(jié)作用,并探討其可能的作用機制。
　　 方法:(1)通過TAC手術(shù)建立小鼠心肌肥厚模型,檢測小鼠模型心肌細胞LXR表達情況;(2)分別對野

2、生型和LXRα基因敲除小鼠進行TAC手術(shù),誘導心肌炎癥反應(yīng)以及病理性心肌肥厚,通過觀察其心肌肥厚反應(yīng)程度以分析LXR心肌炎癥反應(yīng)的關(guān)系;(3)通過體外細胞實驗,觀察LXR人工合成配體T1317對AngⅡ或LPS誘導心肌肥厚反應(yīng)作用,并通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染及熒光素酶實驗進一步分析其作用機制。
　　 結(jié)果:在TAC誘導的小鼠心肌肥厚模型中,LXRα表達明顯增加,而LXRβ表達沒有改變。LXRα基因敲除后,小鼠在TAC手術(shù)的誘導下,出現(xiàn)更為顯

3、著的心肌肥厚變化。細胞實驗進一步證實T1317激活LXR的表達后,能夠抑制由AngⅡ或LPS誘導的心肌細胞炎癥反應(yīng)以及心肌肥厚。同時,LXR激活對心肌肥厚反應(yīng)的抑制作用是通過阻斷NF-κB信號傳導通路而實現(xiàn)。通過腺病毒分別激活兩種LXR亞型,發(fā)現(xiàn)雖然兩者都有抑制心肌肥厚的作用,LXRα在兩者中起主要的作用。
　　 結(jié)論:(1)LXRα是心肌適應(yīng)病理性心肌肥厚的重要調(diào)控元素,在病理性刺激的情況下,其缺失將導致小鼠心臟出現(xiàn)更加嚴重的

4、心肌肥厚現(xiàn)象;(2)LXR人工合成配體T1317激活LXR后,可抑制NF-κB信號傳導通路,從而減輕病理性刺激誘導的心肌肥厚現(xiàn)象。(3)LXRα與LXRβ均能通過抑制NF-κB信號傳導通路從而負調(diào)節(jié)心肌細胞肥厚性生長,而且LXRα作用更為明顯。
　　 第二部分、肝X受體對心肌脂肪酸與葡萄糖代謝的調(diào)節(jié)作用
　　 目的:LXR不但作為全身膽固醇調(diào)節(jié)元件,同時在脂肪酸代謝方面也有著重要的調(diào)節(jié)作用。盡管LXR已被證明在成年心臟內(nèi)

5、表達,但是LXR在成年心臟能量代謝方面的具體作用卻仍然不清楚。本部分實驗我們通過對條件性心肌特異LXRα基因敲除小鼠進行相關(guān)研究,分析成年小鼠心肌LXRα基因缺失后心肌代謝改變,并觀察其對心臟形態(tài)及功能的影響。
　　 方法:(1)培育條件性心肌特異LXRα基因敲除小鼠,在LXRα基因敲除后檢測心肌代謝相關(guān)基因的變化。(2)通過離體工作心實驗以及體外細胞實驗對LXRα基因敲除小鼠心臟及心肌細胞的糖脂代謝進行研究。(3)對轉(zhuǎn)基因小鼠

6、心臟進行組織形態(tài)學觀察,并通過超聲心動圖和離體心實驗對小鼠心臟功能分別進行研究。
　　 結(jié)果:成年小鼠心肌特異敲除LXRα基因后,導致部分調(diào)節(jié)脂肪酸與葡萄糖代謝靶基因的下調(diào)。心肌脂肪酸與葡萄糖氧化率以及葡萄糖攝取率下降,ATP生成減少,并引起了小鼠心臟出現(xiàn)以心肌纖維化、心肌肥厚為特征的心肌重構(gòu),心臟功能下降。
　　 結(jié)論:本研究表明LXRα是心肌脂肪酸與葡萄糖代謝的重要調(diào)節(jié)因子,成年小鼠LXRα心肌特異性敲除可使得脂肪酸