EGFR、ADAM9在胰腺癌Panc-1微球體細(xì)胞中表達(dá)的研究.pdf

1、目的：通過無血清培養(yǎng)法體外培養(yǎng)胰腺癌微球體細(xì)胞，驗(yàn)證其腫瘤干細(xì)胞的富集效果，檢測(cè)EGFR和ADAM9在胰腺癌微球體細(xì)胞中的表達(dá)。
　　 方法：運(yùn)用無血清條件培養(yǎng)基，懸浮培養(yǎng)胰腺癌Panc-1細(xì)胞，并連續(xù)傳代培養(yǎng)。將培養(yǎng)好的微球體接種于含血清培養(yǎng)基及膠原底物培養(yǎng)條件下進(jìn)行分化誘導(dǎo)。收集微球體細(xì)胞及分化細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)側(cè)亞群細(xì)胞（side population，SP）比例；Real-time PCR及Western blot檢測(cè)

2、EGFR和ADAM9 mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：成功培養(yǎng)出胰腺癌Panc-1細(xì)胞微球體，并能在體外連續(xù)傳代；分化誘導(dǎo)后重新貼壁生長(zhǎng)。微球體細(xì)胞和分化細(xì)胞中SP比例分別為（3.38±0.46）％和（1.41±0.32）％ (P<0.05)。微球體細(xì)胞與分化細(xì)胞相比，EGFR及ADAM9 mRNA表達(dá)分別上調(diào)了約2.5和3.0倍（P<0.05）；蛋白表達(dá)分別上調(diào)了約2.84倍和2.0倍（P<0.05）。
　　 結(jié)論