中藥通絡(luò)搽劑治療軟組織損傷的主要藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：通過建立動(dòng)物損傷模型，采用甘肅省中醫(yī)院院內(nèi)制劑-中藥通絡(luò)搽劑作為治療藥物，從分子生物學(xué)、組織形態(tài)學(xué)、病理學(xué)角度研究中藥通絡(luò)搽劑對(duì)大鼠閉合性軟組織損傷的修復(fù)作用，為該藥臨床治療急性閉合性軟組織損傷提供理論依據(jù)。本研究將得到一種具有藥物不良反應(yīng)小、提高機(jī)體局部疼痛閾值、迅速修復(fù)受損軟組織的特點(diǎn)的創(chuàng)新藥物，為中藥現(xiàn)代化的發(fā)展提供新的佐證。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)取50只健康、成年清潔級(jí)大鼠，月齡2月，體重180~220g，雌雄各半。造模

2、方法參照邱桐等[1-3]動(dòng)物閉合性軟組織損傷的實(shí)驗(yàn)方法并且略加修改。隨機(jī)分為3組：通絡(luò)搽劑組、陽性藥物對(duì)照組、模型對(duì)照組，造模成功后1小時(shí)開始給藥，模型對(duì)照組不使用任何藥物。每日兩個(gè)相同時(shí)相點(diǎn)重復(fù)，用醫(yī)用橡膠手套切取寬約1cm的條帶綁扎患肢，以免大鼠舔舐實(shí)驗(yàn)用藥，造模后按第一天、第三天、第五天三個(gè)時(shí)相，每組隨機(jī)取5只大鼠采集血液和損傷軟組織置入4％多聚甲醛溶液固定。本次實(shí)驗(yàn)主要通過以下幾個(gè)方面來觀察治療軟組織損傷疾病的藥理作用。1)血液

3、使用ELISA法檢測(cè)炎癥因子白介素、前列腺素含量變化；2）軟組織使用HE染色和免疫組化檢測(cè)三組大鼠軟組織病理改變和新生血管內(nèi)皮標(biāo)志物JG12和Ki67的出現(xiàn)及分布情況；3）肉眼觀察并評(píng)定其損傷結(jié)果變化。
　　結(jié)果：1）大鼠經(jīng)造模后通絡(luò)搽劑組、正骨水組、模型對(duì)照組三組血液中炎癥因子白介素IL-1和前列腺素PGE2濃度變化經(jīng)用ELISA法檢測(cè)情況：模型組與通絡(luò)搽劑組比較在第5天時(shí)相點(diǎn)差異性顯著(P＜0.05)，說明中藥通絡(luò)搽劑治療閉合

4、性軟組織損傷在該指標(biāo)上效果顯著；通絡(luò)搽劑組與正骨水組比較集中在第一、三次測(cè)量時(shí)相時(shí)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，說明二者治療閉合性軟組織損傷在該指標(biāo)方面無明顯差異性。模型對(duì)照組血清中PGE2和IL-1含量明顯高于通絡(luò)搽劑組和正骨水組；通絡(luò)搽劑組在損傷第1天、第3天、第5天均能明顯抑制損傷軟組織中PGE2和IL-1的升高，且與正骨水組比較，無顯著性差異；但通絡(luò)搽劑組和正骨水組跟模型對(duì)照組有顯著性差異。2）大鼠經(jīng)造模后通絡(luò)搽劑組、正骨水組、

5、模型對(duì)照組三組損傷軟組織標(biāo)本中用藥后的組織切片 HE染色情況顯示：在本實(shí)驗(yàn)的造模情況下經(jīng)過中藥通絡(luò)搽劑5天治療后局部損傷軟組織基本接近于正常組織。3）大鼠經(jīng)造模后通絡(luò)搽劑組、正骨水組、模型對(duì)照組三組損傷軟組織標(biāo)本中用藥后的組織切片以SABC法免疫組化染色進(jìn)一步觀察微血管的增生，①在通絡(luò)搽劑組中有表達(dá)，在正骨水組和模型對(duì)照組中接近于無表達(dá)；4）肉眼觀察結(jié)果損傷征候指數(shù)觀察見通絡(luò)搽劑組和正骨水組均能促進(jìn)損傷局部腫脹、皮下瘀斑和皮下出血的消散